本文關(guān)鍵詞：低分子肝素對膿毒癥大鼠肺血管內(nèi)皮細胞功能的影響

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【摘要】：目的:本研究通過靜脈注射內(nèi)毒素(LPS)制備膿毒癥大鼠模型,通過測定各組大鼠血清s TM、s E-selectin表達的變化,以及觀察肺組織病理形態(tài)學(xué)變化和肺組織VEC凋亡的變化,探討低分子肝素對膿毒癥大鼠血管內(nèi)皮細胞損傷和凋亡的作用,及其可能的機制,為膿毒癥的治療提供理論依據(jù)。方法:(1)將72只SPF級的SD雄性大鼠分為對照組(18只)、膿毒癥組(18只)、脂多糖+肝素(LPS+UFH)組(18只)和脂多糖+低分子肝素(LPS+LMWH)組(18只),各組再按照觀察時間點平均分為造模后6h、12h和24h各3個亞組,每亞組6只。(2)取造模后各時間點各組大鼠的肺組織制作石蠟切片,并分別進行HE和Hoechst 33258染色,用以檢測肺血管內(nèi)皮細胞的損傷和凋亡情況。(3)運用免疫組化法檢測各實驗組大鼠肺各時間點血管內(nèi)皮細胞Bcl-2、Bax的表達量;(4)用ELISA的方法檢測實驗組大鼠肺各時間點血清中s TM和s E-selectin的表達。結(jié)果:(1)HE染色結(jié)果顯示膿毒癥導(dǎo)致肺泡腔和小血管內(nèi)紅細胞聚集,并且而隨著建模時間的延長癥狀加劇。LPS+UFH組和LPS+LMWH組與膿毒癥組相比,肺水腫及紅/白細胞浸潤的現(xiàn)象顯著改善,其中LPS+LMWH組較LPS+UFH組改善效果明顯。(2)Hoechst 33258染色結(jié)果表明,膿毒癥發(fā)生時易導(dǎo)致肺血管內(nèi)皮細胞呈現(xiàn)不同程度的核固縮,且隨著時間延長,血管內(nèi)皮細胞的凋亡顯著增加;LPS+UFH組和LPS+LMWH組較膿毒癥組VEC凋亡顯著降低(P0.01),與對照組相比,LPS+UFH組凋亡細胞核明顯增多(P0.01),LPS+LMWH組凋亡細胞核較LPS+UFH組減少(P0.05)。(3)免疫組化檢測Bcl-2、Bax結(jié)果表明,LPS+UFH組和LPS+LMWH組血管內(nèi)皮細胞Bax蛋白的表達均明顯低于膿毒癥組(P0.01);每組Bcl-2的表達量無統(tǒng)計學(xué)意義,但Bax/Bcl-2值與膿毒癥組相比顯著降低(P0.05);LPS+LMWH組較LPS+UFH組Bax的表達量顯著下降(P0.05)。(4)血清s TM和s E-selectin表達量檢測發(fā)現(xiàn),與對照組相比,膿毒癥組在各時間點(6 h、12 h和24 h)血漿s TM濃度均升高(P0.01);LPS+UFH組和LPS+LMWH組與膿毒癥組相比,在各時間點血漿s TM濃度均降低(P0.01),但較對照組仍有升高(P0.01);LPS+LMWH組與LPS+UFH組相比略有降低(P0.05)。從各時間點來看,膿毒癥組在6 h、12 h、24 h s E-selectin表達量與對照組相比仍然較高(P0.01),而在24 h時LPS+UFH組和LPS+LMWH組與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異;各時間點LPS+UFH組和LPS+LMWH組與膿毒癥組相比s E-selectin表達量均有下降(P0.01)。結(jié)論:(1)膿毒癥大鼠血清中s TM和s E-selectin的表達量顯著升高,大鼠肺VEC中Bax的表達量升高,Bax/Bcl-2增大,肺VEC凋亡增加;(2)LMWH可降低膿毒癥大鼠s TM和s E-selectin水平,減輕膿毒癥大鼠肺病理損傷程度,對膿毒癥時肺VEC具有保護作用,這可能是通過對凝血-炎癥軸的作用來實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：低分子肝素 膿毒癥 血管內(nèi)皮細胞 細胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 英文縮略語10-11
• 前言11-14
• 一、材料與方法14-20
• 1 實驗材料14-15
• 1.1 實驗動物14
• 1.2 實驗試劑14
• 1.3 實驗儀器14-15
• 1.4 主要溶液配制15
• 2 試驗方法15-20
• 2.1 實驗分組15
• 2.2 處理方法15-16
• 2.3 膿毒癥模型的評價16-17
• 2.4 檢測指標及方法17-20
• 二、結(jié)果20-29
• 1 大鼠一般情況觀察20
• 2 膿毒癥大鼠模型的評價20-21
• 3 HE染色結(jié)果21-23
• 4 Hoechst 33258染色法觀察肺VEC的凋亡23-26
• 5 免疫組化法檢測Bcl-2 和Bax表達26
• 6 s TM和s E-selectin檢測26-29
• 三、討論29-35
• 1 膿毒癥動物模型的建立29-30
• 1.1 膿毒癥動物模型的類型及評價29-30
• 1.2 實驗性膿毒癥LPS模型的建立30
• 1.3 LPS膿毒癥模型效果的評價30
• 2 膿毒癥時肺血管內(nèi)皮細胞的變化30-32
• 3 膿毒癥時血管內(nèi)皮細胞Bcl-2、Bax的表達量32
• 4 膿毒癥時血清s TM和s E-selectin的表達量32-33
• 5 肝素和低分子肝素對膿毒癥中肺血管內(nèi)皮細胞的保護作用33-34
• 6 研究的局限性34-35
• 四、結(jié)論35-36
• 參考文獻36-41
• 綜述41-48
• 綜述參考文獻45-48
• 致謝48-49
• 作者簡介49-50
• 導(dǎo)師評閱表50

【參考文獻】

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本文編號：1125017