本文關(guān)鍵詞：小鼠MSCs三種移植途徑在急性肝損傷的活體成像示蹤研究

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【摘要】：目的：通過小動物活體成像系統(tǒng)(in vivo imaging system, IVIS),對MSCs在急性肝損傷小鼠體內(nèi)進行動態(tài)示蹤,了解MSCs在小鼠體內(nèi)遷移、分布和定植情況。 方法：1.復(fù)蘇、傳代綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)-熒光素酶(Luciferase, Luc)雙報告基團轉(zhuǎn)染的MSCs;2.選取雄性C57BL/6小鼠,48只；3.建立四氯化碳急性肝損傷模型；4.小鼠隨機分為四組：尾靜脈組(8只),門靜脈組(8只),肝組織內(nèi)組(8只)和對照組(8只)；5.分別經(jīng)尾靜脈、門靜脈、肝組織內(nèi)移植MSCs;6.移植后6h、24h、72h、120h、168h,使用IVIS示蹤各組小鼠體內(nèi)和體外臟器MSCs的定植情況。 結(jié)果：1.復(fù)蘇傳代后的MSCs狀態(tài)良好,MSCs發(fā)光效果穩(wěn)定,熒光強度隨細(xì)胞濃度的增加而增強；2.建立了均衡性與穩(wěn)定性高的小鼠急性肝損傷模型；3. IVIS示蹤顯示：經(jīng)尾靜脈途徑移植MSCs在小鼠尾部與肺臟有熒光素表達現(xiàn)象,但肝臟部位未見熒光素表達；經(jīng)門靜脈、肝組織內(nèi)移植的小鼠肝臟均可見熒光素表達；5.經(jīng)門靜脈移植MSCs的生物發(fā)光的熒光素表達光子數(shù)量較肝組織內(nèi)移植的高,但兩者無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；6.MSCs三種途徑移植在體內(nèi)、體外臟器熒光素表達強度均隨時間變化逐漸衰減。 結(jié)論：經(jīng)門靜脈、肝內(nèi)組織移植的MSCs可在小鼠受損的肝臟定植。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 急性肝損傷 移植途徑 活體成像系統(tǒng)
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R657.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 目錄8-11
• 英文縮略詞表11-12
• 第零章 緒論12-15
• 0.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞12
• 0.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與肝臟損傷修復(fù)12-13
• 0.3 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與移植途徑13-14
• 0.4 體內(nèi)生物發(fā)光成像技術(shù)14-15
• 第一章 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代15-21
• 1.1 背景15
• 1.2 實驗材料15-16
• 1.2.1 主要實驗試劑15
• 1.2.2 主要實驗器材15-16
• 1.2.3 相關(guān)實驗試劑配置16
• 1.3 實驗方法16-18
• 1.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇16
• 1.3.2 細(xì)胞傳代16-17
• 1.3.3 MSCs細(xì)胞懸液的配置及細(xì)胞轉(zhuǎn)染發(fā)光強度的鑒定17-18
• 1.4 實驗結(jié)果18-19
• 1.5 附圖19-21
• 第二章 C57BL/6小鼠急性肝損傷模型的建立21-26
• 2.1 背景21
• 2.2 實驗材料21-22
• 2.2.1 實驗動物21
• 2.2.2 主要試劑及器材21
• 2.2.3 相關(guān)實驗試劑配置21-22
• 2.3 實驗方法22-24
• 2.3.1 實驗動物分組及飼養(yǎng)22
• 2.3.2 急性肝損傷模型的建立22
• 2.3.3 小鼠肝臟組織石蠟切片HE染色分析22-24
• 2.3.4 統(tǒng)計學(xué)方法24
• 2.4 實驗結(jié)果24-25
• 2.5 附圖25-26
• 第三章 三種移植途徑的技術(shù)操作部分26-31
• 3.1 背景26
• 3.2 實驗材料26
• 3.2.1 實驗動物準(zhǔn)備26
• 3.2.2 主要試劑及器材26
• 3.2.3 細(xì)胞懸液的配置26
• 3.3 實驗方法26-27
• 3.3.1 尾靜脈移植標(biāo)準(zhǔn)化操作流程26-27
• 3.3.2 門靜脈移植標(biāo)準(zhǔn)化操作流程27
• 3.3.3 肝組織內(nèi)移植標(biāo)準(zhǔn)化操作流程27
• 3.4 實驗結(jié)果27-29
• 3.5 附圖29-31
• 第四章 三種移植途徑的活體成像分析31-44
• 4.1 背景31
• 4.2 實驗材料31-32
• 4.2.1 實驗動物31
• 4.2.2 主要試劑及器材31
• 4.2.3 熒光素酶的配置31-32
• 4.3 實驗方法32-33
• 4.3.1 細(xì)胞成像32
• 4.3.2 小鼠體內(nèi)和體外臟器成像32
• 4.3.3 數(shù)據(jù)的獲取32-33
• 4.3.4 統(tǒng)計學(xué)分析33
• 4.4 實驗結(jié)果33-39
• 4.4.1 96孔板細(xì)胞成像結(jié)果33
• 4.4.2 小鼠體內(nèi)活體成像結(jié)果33-34
• 4.4.3 臟器離體成像結(jié)果34-35
• 4.4.4 統(tǒng)計學(xué)結(jié)果35-39
• 4.5 附圖39-44
• 第五章 討論44-51
• 5.1 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代44-45
• 5.2 C57BL/6小鼠急性肝損傷模型的建立45-46
• 5.2.1 染毒途徑的選擇45-46
• 5.2.2 染毒劑量的選擇46
• 5.2.3 染毒時間的選擇46
• 5.3 小鼠活體成像分析46-51
• 5.3.1 關(guān)于MSCs移植的數(shù)量46-47
• 5.3.2 三種移植途徑的活體成像評價47-51
• 第六章 結(jié)論51-52
• 參考文獻52-56
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果56-57
• 致謝57

【參考文獻】

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5 李冬梅;萬春麗;李繼承;;小動物活體成像技術(shù)研究進展[J];中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報;2009年06期

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本文編號：1009669