目的:探究木犀草素、槲皮素、楊梅素、芹菜素、山柰酚及白楊素這6種黃酮對RAW264.7巨噬細(xì)胞極化的抑制活性及構(gòu)效關(guān)系。方法:選擇100 ng/mL脂多糖刺激RAW264.7巨噬細(xì)胞建立炎癥模型;利用噻唑藍(lán)法檢測細(xì)胞增殖活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面蛋白CD274和CD38表達(dá);Western blot檢測炎性信號通路中相關(guān)蛋白的表達(dá);定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)記基因水平。結(jié)果:6種黃酮在20 μmol/L下均不影響細(xì)胞正常生長;6種黃酮對巨噬細(xì)胞CD274和CD38表達(dá)均有抑制作用,其中木犀草素、芹菜素和白楊素的抑制作用強(qiáng)于槲皮素、楊梅素和山柰酚;木犀草素對核因子κB信號通路激活的抑制活性強(qiáng)于芹菜素和槲皮素,而楊梅素、山柰酚和白楊素沒有明顯抑制效果;木犀草素、芹菜素和白楊素抑制iNOS mRNA表達(dá)的活性強(qiáng)于其他3種化合物,木犀草素、槲皮素和芹菜素抑制IL-1β及MCP1 mRNA表達(dá)的活性強(qiáng)于其他3種化合物。結(jié)論:C環(huán)上3位的羥基取代不利于黃酮類化合物抑制巨噬細(xì)胞M1極化的活性,而B環(huán)上3’、4’位羥基取代有利于增強(qiáng)其活性。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 儀器與設(shè)備
    1.3 方法
        1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.3.2 MTT法檢測細(xì)胞活性
        1.3.3 流式細(xì)胞分析
        1.3.4 總蛋白質(zhì)提取及Western blot檢測
        1.3.5 總RNA提取及定量PCR分析
    1.4 數(shù)據(jù)處理及分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 6種黃酮對巨噬細(xì)胞活性的影響
    2.2 6種黃酮對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記蛋白的影響
    2.3 6種黃酮對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中IκB磷酸化的影響
    2.4 6種黃酮對LPS誘導(dǎo)的M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)記基因表達(dá)水平的影響
3 討論



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