目的:在體內(nèi)探討中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)增強(qiáng)后對黏液型銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.a)生物膜(biofilm,BF和其重要的胞外基質(zhì)藻酸鹽的影響。方法:建立大鼠氣道黏液型P.a BF感染模型,分別用呼吸爆發(fā)增強(qiáng)劑(PMA)(BF-PMA組)和生理鹽水(BF-對照組)干預(yù),平板計數(shù)法檢測BF內(nèi)活菌數(shù)目,掃描電鏡觀察BF的結(jié)構(gòu);硫酸-咔唑法測定BF內(nèi)藻酸鹽含量;HE染色觀察2組肺組織病理損傷情況、ELISA分析炎癥反應(yīng)水平。結(jié)果:掃描電鏡顯示BF-PMA組的BF結(jié)構(gòu)較對照組更復(fù)雜、更厚,且BF-PMA組的BF活菌數(shù)目明顯高于對照組(P=0.000);BF-PMA組BF內(nèi)藻酸鹽合成明顯高于對照組(P=0.004);HE染色發(fā)現(xiàn)BF-PMA組肺組織病理改變更嚴(yán)重,且炎癥反應(yīng)更重,γ干擾素(interferon-γ,IFN-γ)水平較對照組高(P=0.002),IFN-γ與白介素-10(interleukin-10,IL-10)的比值也高于對照組(P=0.023)。結(jié)論:在體內(nèi)中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)增強(qiáng)后可能通過促進(jìn)黏液型P.a BF的重要胞外基質(zhì)藻酸鹽的合成,導(dǎo)致黏液...

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圖3 藻酸鹽合成分析

圖2生物膜結(jié)構(gòu)2.4肺組織病理學(xué)改變

圖1 生物膜活菌數(shù)目

平板計數(shù)法測定生物膜活菌數(shù)目，結(jié)果顯示氣管插管第3天時，2組導(dǎo)管上仍存在大量活菌，未被機(jī)體完全清除。然而BF-PMA組殘留的細(xì)菌數(shù)量[(2.35±0.53)×105CFU]明顯高于BF-對照組[(0.70±0.28)×105CFU]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=6.761,P=0.....

圖2 生物膜結(jié)構(gòu)

硫酸-咔唑法測定BF內(nèi)藻酸鹽含量，結(jié)果顯示2組均合成大量的藻酸鹽，但是BF-PMA組藻酸鹽合成量[(104.47±47.84)mg/g]明顯高于BF-對照組[(29.32±10.21)mg/g]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.763,P=0.004，圖3)。圖3藻酸鹽合成分析

圖4 肺組織病理改變（HE染色，100×）

光鏡下見空白導(dǎo)管組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常，無炎癥細(xì)胞浸潤(圖4A)。BF-PMA組肺部感染嚴(yán)重，光鏡下可見肺泡間隙明顯增寬，大量的肺泡結(jié)構(gòu)被破壞，眾多的炎癥細(xì)胞浸潤(圖4B)。BF-對照組肺部感染較輕，光鏡下見肺泡間隔增寬，部分肺泡結(jié)構(gòu)被破壞，少量炎癥細(xì)胞浸潤(圖4C)。2.5血清....

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