目的探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 (hUCMSCs)對脂多糖 (LPS)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞功能表型的影響。方法實(shí)驗(yàn)設(shè)未誘導(dǎo)對照組 (加入PBS無LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞),LPS誘導(dǎo)組 (加入1.0 μg/mL的LPS誘導(dǎo)BV-2細(xì)胞向M1型分化),按比例加入不同濃度hUCMSCs進(jìn)行干預(yù) (LPS+低、中、高濃度hUCMSCs干預(yù)組hUCMSCs與BV-2細(xì)胞比例分別為:1:100、1:10、1:1),分別于24、48、72 h觀察BV-2形態(tài)變化,Griess法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中M1表型產(chǎn)物一氧化氮 (NO)的濃度;將hUCMSCs與BV-2細(xì)胞在不同條件下 (LPS+/LPS-)共培養(yǎng),qRT-PCR檢測BV-2細(xì)胞M2表型標(biāo)記物精氨酸酶1表達(dá)變化。數(shù)據(jù)分析采用重復(fù)測量資料的方差分析,組間比較采用Tukey分析。結(jié)果 BV-2細(xì)胞經(jīng)LPS誘導(dǎo)后活化,細(xì)胞變大,呈"煎餅狀"、"阿米巴狀"變化,呈經(jīng)典的M1表型分化;與未誘導(dǎo)對照組相比,LPS誘導(dǎo)組48、72 h BV-2細(xì)胞NO含量升高[48 h:(0.507±0.012)μg/mL比 (5.183±0.171)μg/ mL;72 h:(0...

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【文章目錄】：
材料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)試劑
    二、方法
        1.hUCMSCs的體外分離、培養(yǎng)及鑒定:
        2.BV-2永生細(xì)胞系培養(yǎng)及鑒定:
        3.hUCMSCs對LPS誘導(dǎo)BV-2細(xì)胞分泌NO的影響:
        4.hUCMSCs對BV-2細(xì)胞表達(dá)精氨酸酶1的影響:
        5.細(xì)胞培養(yǎng)上清NO檢測:
        6.總RNA提取及qRT-PCR分析:
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
結(jié) 果
    一、BV-2培養(yǎng)及鑒定結(jié)果
    二、hUCMSCs影響LPS誘導(dǎo)BV-2表型變化形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
    三、細(xì)胞培養(yǎng)上清NO檢測結(jié)果
    四、qRT-PCR檢測共培養(yǎng)體系BV-2細(xì)胞M2表型基因表達(dá)
討 論



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