為了研究外源性金屬硫蛋白(MT)對(duì)熱應(yīng)激下體外培養(yǎng)奶牛淋巴細(xì)胞凋亡的影響。將屠宰獲取的奶牛脾臟淋巴細(xì)胞隨機(jī)分為4組,每組細(xì)胞培養(yǎng)液中MT的終濃度分別為0μg/ml(對(duì)照組)、0μg/ml第Ⅰ組)、140μg/ml第Ⅱ組)、210μg/ml(第Ⅲ組),同時(shí)置于細(xì)胞培養(yǎng)箱(37℃、5%CO2)中培養(yǎng)20h,之后同時(shí)置于43℃水浴鍋中進(jìn)行熱應(yīng)激處理1h,再回細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3h,然后進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)。結(jié)果如下： 1)通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和AO/EB染色觀察,結(jié)果表明,添加MT可以有效緩解熱應(yīng)激對(duì)奶牛淋巴細(xì)胞的損傷,但緩解效果隨MT濃度的增加而下降。 2)MT對(duì)奶牛淋巴細(xì)胞凋亡指數(shù)和活性的影響結(jié)果：對(duì)照組的奶牛淋巴細(xì)胞凋亡指數(shù)與試驗(yàn)Ⅱ組差異不顯著,試驗(yàn)Ⅲ組顯著高于其他三組(P<0.01,),對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅱ組顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅰ組奶牛淋巴細(xì)胞活性著高于其他組(P<0.01),且試驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組的細(xì)胞相對(duì)成活率隨著MT的含量增加而呈下降趨勢(shì)。表明MT可以抑制奶牛淋巴細(xì)胞的凋亡,提高奶牛淋巴細(xì)胞存活率。 4)MT對(duì)淋巴細(xì)胞內(nèi)抗氧化指標(biāo)的影響結(jié)果：第Ⅰ-Ⅲ組的C...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 金屬硫蛋白的概述
        1.1 MT的結(jié)構(gòu)及其理化性質(zhì)
        1.2 MT的誘導(dǎo)
        1.3 MT的生物功能
    2 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的概述
        2.1 在病毒學(xué)上的應(yīng)用
        2.2 在腫瘤學(xué)上的應(yīng)用
        2.3 在藥理學(xué)上的應(yīng)用
        2.4 在動(dòng)物上的應(yīng)用
        2.5 其他方面研究
    3 細(xì)胞凋亡的概述
        3.1 線粒體在細(xì)胞凋亡中的作用
        3.2 細(xì)胞色素C在細(xì)胞凋亡中的作用
        3.3 Bcl-2家族在細(xì)胞凋亡中的作用
        3.4 Caspase家族在細(xì)胞凋亡中的作用
    4 熱應(yīng)激與細(xì)胞凋亡
    5 研究目的與意義
第二部分 材料與方法
    1 材料
        1.1 主要儀器設(shè)備與試劑
        1.2 淋巴細(xì)胞的提取、處理與培養(yǎng)
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 淋巴細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察
        2.2 淋巴細(xì)胞活性的檢測(cè)
        2.3 淋巴細(xì)胞內(nèi)抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)
        2.4 主要基因的檢測(cè)
    3 數(shù)據(jù)的處理
第三部分 結(jié)果與分析
    1 淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
    2 AO/EB染色觀察結(jié)果
    3 奶牛淋巴細(xì)胞活性的檢測(cè)結(jié)果
    4 淋巴細(xì)胞內(nèi)抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果
    5 細(xì)胞凋亡基因Bax、Bcl-2、p50的檢測(cè)結(jié)果
第四部分 討論與結(jié)論
    1 MT對(duì)熱應(yīng)激下淋巴細(xì)胞形態(tài)的影響
    2 MT對(duì)熱應(yīng)激下淋巴細(xì)胞細(xì)胞活性和凋亡率的影響
    3 MT對(duì)熱應(yīng)激下淋巴細(xì)胞內(nèi)抗氧化功能的影響
    4 MT對(duì)熱應(yīng)激下淋巴細(xì)胞內(nèi)Bax、Bcl-2基因表達(dá)的影響
    5 MT對(duì)熱應(yīng)激下淋巴細(xì)胞內(nèi)p50基因表達(dá)的影響
    6 結(jié)論
    7 創(chuàng)新點(diǎn)
    8 有待進(jìn)一步研究的問(wèn)題
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4031911