白術(shù)多糖是中藥白術(shù)發(fā)揮生物學活性作用的重要成分，對細胞的生長、增殖及分化具有明顯的促進作用，為不斷提高卵母細胞體外成熟率、受精卵發(fā)育能力和優(yōu)化培養(yǎng)體系，本研究在體外培養(yǎng)液中添加白術(shù)多糖，研究白術(shù)多糖對牛、羊卵母細胞的體外成熟及受精卵發(fā)育的影響。試驗通過從屠宰場收集的廢棄牛、羊卵巢，比較抽吸法和挖卵法對獲得的卵母細胞數(shù)量及質(zhì)量的影響；取A/B級卵母細胞，在體外成熟培養(yǎng)液中分別添加10、50、100、150、200μg/mL的白術(shù)多糖溶液，檢測白術(shù)多糖的最適添加濃度，在此基礎(chǔ)上，對卵母細胞進行高溫處理，研究白術(shù)多糖對卵母細胞熱應(yīng)激損害的保護作用；對獲得的成熟卵母細胞進行體外受精，篩選體外基礎(chǔ)培養(yǎng)液及共培養(yǎng)體細胞種類，在受精卵體外培養(yǎng)液中，添加上述濃度的白術(shù)多糖共同孵育培養(yǎng)，檢測24h和48h的卵裂率，試驗結(jié)果如下： 1、不同的集卵方法對卵母細胞的獲得數(shù)量和質(zhì)量有很大影響，使用特制挖卵刀獲得的卵母細胞數(shù)及A/B級卵母細胞率與抽吸法相比，差異顯著（P<0.05），其中，羊卵巢采用挖卵法能獲得更多的A/B級卵母細胞。 2、在體外成熟培養(yǎng)液中添加不同濃度的白術(shù)多糖溶液，對牛、羊卵母細胞...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1卵母細胞的采集方法

仲愷農(nóng)業(yè)工程學院碩士學位論文⑴抽吸法：用帶有6號針頭的5mL注射器抽取表面直徑為2～4mm（羊）、3-6mm（牛）卵泡內(nèi)的卵泡液，收集卵泡液于盛有38.5℃滅菌TL-Hepes液的培養(yǎng)皿中備檢。⑵挖卵法：用特制挖卵刀切割卵巢表面直徑為2～4mm卵泡，....

圖2-2卵母細胞分級評定標準（1010）

圖2-2卵母細胞分級評定標準（1010）Figure2-2Thestandardofoocytegrade結(jié)果采卵方法對羊卵母細胞采集率的影響-1可以看出，不同的采集方法對羊卵母細胞的數(shù)量和質(zhì)量均有影響，細胞，卵母細胞損失少，且卵丘細胞保存完好。所獲得的平均可....

圖3-1卵母細胞洗滌及培養(yǎng)方法

覆蓋液體石蠟2.5mL，在原液滴上追加140μL成熟培養(yǎng)液，微滴總量為180μL個培養(yǎng)皿上放置2個微滴。38.5℃、5%CO2環(huán)境孵育4-6h備用。選取洗滌后的A/B級卵母細胞，用撿卵針移入預平衡4-6h的成熟培養(yǎng)液微滴內(nèi)行培養(yǎng)，每....

圖3-3多糖試驗組體外成熟培養(yǎng)液中牛、羊卵母細胞的形態(tài)（1020）

A.:低劑量多糖組（10μg/mL、50μg/mL）；B:中等劑量多糖組（100μg/mL）；C:高劑量多糖組（150μg/mL、200μg/mL）圖3-3多糖試驗組體外成熟培養(yǎng)液中牛、羊卵母細胞的形態(tài)（1020）A:LowconcentrationPAM....

本文編號：4031955