本文選題：雞毒支原體　切入點(diǎn)：脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(LAMPs)　出處：《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：Toll樣受體2(TLR2)在雞毒支原體(MG)誘導(dǎo)天然免疫反應(yīng)機(jī)制中的作用尚未明確。為鑒定TLR2在MG脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(LAMPs)誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)IL-1β中的作用,本研究通過(guò)RT-PCR和ELISA方法檢測(cè)LAMPs刺激后DF-1細(xì)胞中IL-1β的m RNA和蛋白水平,結(jié)果顯示LAMPs可以誘導(dǎo)DF-1細(xì)胞分泌IL-1β,并確定最佳刺激時(shí)間為6 h,最佳刺激劑量為1μg/m L。此外,通過(guò)構(gòu)建TLR2重組表達(dá)質(zhì)粒p CMV-HA-TLR2,并將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染DF-1細(xì)胞進(jìn)行過(guò)表達(dá)及通過(guò)抗體封閉TLR2的兩種處理方式,處理后采用LAMPs刺激細(xì)胞。經(jīng)檢測(cè)顯示:TLR2過(guò)表達(dá)處理組的IL-1βm RNA和蛋白水平顯著升高,而抗體處理組的IL-1βm RNA和蛋白水平下調(diào)。結(jié)果表明,LAMPs能夠與DF-1細(xì)胞膜上的TLR2受體結(jié)合,有效的誘導(dǎo)DF-1細(xì)胞表達(dá)并分泌IL-1β,而且IL-1β的釋放可能與天然免疫系統(tǒng)的經(jīng)典通路即NF-κB信號(hào)通路調(diào)控有關(guān)。本研究為闡述MG的致病機(jī)制提供相關(guān)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:The role of Toll-like receptor 2-TLR2 in the mechanism of innate immune response induced by Mycoplasma gallus is unclear.In order to investigate the role of TLR2 in the expression of IL-1 尾 in MG lipide-associated membrane protein (lamps), the m RNA and protein levels of IL-1 尾 in DF-1 cells stimulated by LAMPs were detected by RT-PCR and ELISA.The results showed that LAMPs could induce DF-1 cells to secrete IL-1 尾, and the optimal stimulation time was 6 h and the optimal stimulation dose was 1 渭 g / mL.In addition, the recombinant TLR2 expression plasmid pCMV-HA-TLR2 was constructed and transfected into DF-1 cells for overexpression and blocking of TLR2 by antibody. After treatment, the cells were stimulated by LAMPs.The results showed that the IL-1 尾 m RNA and protein levels were significantly increased in the overexpression treatment group, while the IL-1 尾 m RNA and protein levels were down-regulated in the antibody treatment group.The results showed that lamps could bind to TLR2 receptor on DF-1 cell membrane and induce DF-1 cells to express and secrete IL-1 尾 effectively. Moreover, the release of IL-1 尾 may be related to the regulation of NF- 魏 B signaling pathway, which is the classical pathway of innate immune system.This study provides experimental basis for elucidating the pathogenesis of MG.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;湖北工業(yè)大學(xué)生物工程與食品學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/動(dòng)物支原體病團(tuán)隊(duì);東北農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：防治畜禽支原體病中藥制劑的研究及應(yīng)用 黑龍江省高校科技成果產(chǎn)業(yè)化前期研發(fā)培育項(xiàng)目(1254CGZH16) 自噬在TLR2介導(dǎo)雞支原體炎性損傷中的作用機(jī)制研究 獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題基金(SKLVBF201409)
【分類號(hào)】：S852.62

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