西洼湖戈登氏菌CGMCC 4.218 4含有一個高效的腈水合酶/酰胺酶體系。本文利用該菌株全細胞中的腈水合酶(Nitrile hydratas)催化2-羥基-4-甲硫基丁腈(HMTBN)水合為2-羥基-4-甲硫基丁酰胺(HMTBAm),利用酰胺酶(Amidase)以原位串聯(lián)的方式將2-羥基-4-甲硫基丁酰胺水解為2-羥基-4-甲硫基丁酸(HMTBA,蛋氨酸羥基類似物)。考察了底物濃度、細胞質(zhì)量濃度、溫度、pH、反應(yīng)時間對腈水合酶和酰胺酶活性的影響,對腈水合酶、酰胺酶的熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性進行了測定。結(jié)果表明,最優(yōu)的反應(yīng)條件為:50 mmol/L HMTBN,3 g/L干重細胞,溫度30℃,pH=8.0,反應(yīng)時間30 min。在最優(yōu)反應(yīng)條件下,采用分批補料策略,細胞可使用23批次,HMTBA的累積量在44 h內(nèi)達到164 g/L,其產(chǎn)率為95%。

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【文章目錄】：
1實驗部分
    1.1實驗材料
    1.2實驗方法
        1.2.1培養(yǎng)基
        1.2.2培養(yǎng)條件
        1.2.3腈水合酶活性測定
        1.2.4酰胺酶活性測定
        1.2.5分析方法
2結(jié)果與討論
    2.1反應(yīng)條件優(yōu)化
        2.1.1底物濃度對腈水合酶和酰胺酶活性的影響
        2.1.2細胞質(zhì)量濃度對腈水合酶和酰胺酶活性影響
        2.1.3溫度對腈水合酶和酰胺酶活性的影響
        2.1.4腈水合酶和酰胺酶的熱穩(wěn)定性
        2.1.5 p H對腈水合酶和酰胺酶活性的影響
        2.1.6腈水合酶和酰胺酶的p H穩(wěn)定性
        2.1.7反應(yīng)時間的影響
    2.2分批補料制備HMTBA
3結(jié)論



本文編號：4009371