本文關(guān)鍵詞：二丁顆�？鼓c道病毒71型作用的體內(nèi)外實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的：腸道病毒71型（enterovirus71， EV71）為小RNA病毒科腸道病毒屬的成員，是引起手足口�。℉and, Foot and Mouth Disease，，HFMD）的主要病原體。EV71型手足口病常會并發(fā)神經(jīng)源性肺水腫、無菌性腦膜炎、腦干腦炎、心肌炎、急性馳緩性麻痹等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，致殘率和死亡率較高。目前尚無行之有效的抗EV71病毒藥物、疫苗和治療手段。二丁顆粒是由紫花地丁、半邊蓮、蒲公英和板藍(lán)根4味藥材制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解毒的功能。本研究將對其體內(nèi)外抗EV71作用、免疫調(diào)節(jié)作用等方面進(jìn)行研究。 材料及方法：體外實驗：采用MTT比色法測定二丁顆粒及陽性對照藥物（利巴韋林）對Vero細(xì)胞的毒性作用，非線性回歸構(gòu)建各藥物劑量與毒性效應(yīng)關(guān)系曲線，計算最大無毒濃度（TC0）和半數(shù)毒性濃度（TC50）；MTT比色法測定二丁顆粒對EV71致細(xì)胞病變（CPE）的抑制作用，計算最大無毒濃度下，各藥物對病毒的抑制率。體內(nèi)實驗：采用腹腔注射腸道病毒71型感染5日齡Balb/c乳鼠，建立EV71實驗動物模型，并分別用二丁顆粒和利巴韋林進(jìn)行治療，連續(xù)觀察14天，統(tǒng)計各組體重和臨床評分，計算各組死亡率和生命延長率。于感染后6天，取乳鼠血清和肌肉組織，流式液相多重蛋白定量技術(shù)檢測各組乳鼠血清中炎癥因子的含量；Real-time PCR檢測肌肉組織中EV71的病毒載量；HE染色進(jìn)行肌肉組織病理學(xué)檢測。 實驗結(jié)果及結(jié)論：體外實驗結(jié)果顯示，二丁顆粒對Vero細(xì)胞最大無毒濃度（TC0）為2.56mg/ml，半數(shù)毒性濃度（TC50）為16.74mg/ml；利巴韋林顆粒對Vero細(xì)胞最大無毒濃度（TC0）為1.58mg/ml，半數(shù)毒性濃度（TC50）為18.17mg/ml。二丁顆粒在最大無毒濃度下，對EV71抑制作用不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。體內(nèi)實驗結(jié)果顯示，二丁顆粒各劑量組可不同程度提高EV17模型乳鼠的生存率和生存時間；增加體重，降低臨床評分；降低乳鼠血清中IL-6、TNF-α、IFN-γ、MCP-1的含量，減輕炎癥反應(yīng)，改善組織病理。二丁顆粒治療并不能明顯抑制EV71在乳鼠肌肉中擴(kuò)增，模型乳鼠生存狀態(tài)和生理指標(biāo)的改善可能與二丁顆粒抑制細(xì)胞炎癥因子的免疫調(diào)理作用有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：腸道病毒71型 二丁顆粒 病毒載量 炎癥因子 免疫調(diào)節(jié)
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R512.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 英文縮寫詞表8-12
• 第一章 緒論12-25
• 1. 腸道病毒 71 型病原學(xué)基礎(chǔ)12-16
• 1.1 腸道病毒 71 型的生物學(xué)性狀12-13
• 1.2 EV71 所致手足口病概述13-14
• 1.3 EV71 流行病學(xué)14-15
• 1.4 EV71 致病機制及病理特征15-16
• 2. EV71 動物模型的研究進(jìn)展16-19
• 2.1 非人靈長類動物模型16-17
• 2.2 小鼠模型17-19
• 3. 抗 EV71 藥物的研究進(jìn)展19-25
• 3.1 結(jié)構(gòu)蛋白抑制劑19-20
• 3.2 非結(jié)構(gòu)蛋白抑制劑20-22
• 3.3 核苷酸類似物22
• 3.4 RNA 干擾22
• 3.5 免疫調(diào)節(jié)藥物22-23
• 3.6 藥用植物提取物23-24
• 3.7 其他24-25
• 第二章 體外實驗研究25-30
• 1 實驗材料25-26
• 1.1 藥物25
• 1.2 細(xì)胞株25
• 1.3 病毒株25
• 1.4 主要設(shè)備與試劑25-26
• 2 實驗方法26-28
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)26
• 2.2 病毒 TCID50的測定26
• 2.3 藥物毒性測定26-27
• 2.4 藥物對病毒致細(xì)胞病變作用的影響27-28
• 3 結(jié)果28-30
• 3.1 EV71 的 TCID5028
• 3.2 藥物毒性測定28-29
• 3.3 藥物對病毒致細(xì)胞病變保護(hù)作用29-30
• 第三章 體內(nèi)實驗研究30-44
• 1 實驗材料30-31
• 1.1 主要設(shè)備與試劑30
• 1.2 引物設(shè)計與合成30
• 1.3 實驗動物30-31
• 2 實驗方法31-36
• 2.1 實驗動物分組及給藥劑量31
• 2.2 建立 EV71 乳鼠感染模型31
• 2.3 給藥方法31
• 2.4 二丁顆粒對模型鼠生存狀態(tài)的影響31-32
• 2.5 流式液相多重蛋白定量技術(shù)（CBA）檢測乳鼠血清中炎癥因子32-33
• 2.6 Real-time PCR 檢測肌肉組織中病毒 RNA 相對表達(dá)量33-36
• 2.7 組織病理學(xué)檢測36
• 3 結(jié)果36-44
• 3.1 乳鼠生存率與生存時間36-37
• 3.2 乳鼠體重變化37-38
• 3.3 乳鼠臨床評分38-39
• 3.4 乳鼠血清中炎癥因子檢測39-42
• 3.5 乳鼠肌肉組織中 EV71 病毒載量42-43
• 3.6 乳鼠肌肉組織病理學(xué)檢測43-44
• 第四章 討論44-45
• 第五章 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-56
• 作者簡介56-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：二丁顆�？鼓c道病毒71型作用的體內(nèi)外實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：416928