艾滋病是威脅人類的健康的最重要的傳染病之一,其在全球的流行形勢十分嚴峻,疫苗是預防控制傳染病的最有效最經濟的手段,因此研制出安全有效的艾滋病疫苗迫在眉睫。DNA疫苗作為最具發(fā)展?jié)摿Φ男滦鸵呙绮呗?可以有效的誘導細胞免疫反應及體液免疫反應,同時可以誘導長期免疫記憶。然而,較弱的免疫原性一直是制約DNA疫苗產業(yè)化的瓶頸。本研究優(yōu)化了HIV-1雙表達盒DNA疫苗pENVPOL及pGAGTNR的免疫策略,并聯合重組復制型痘苗病毒疫苗VTKgpe及蛋白疫苗gp140,采用初免-加強策略,大幅度提高了HIV-1疫苗的免疫原性。本研究首先探索了體內電穿孔技術對DNA疫苗質粒pENVPOL及pGAGTNR免疫原性的影響。實驗結果表明,內電穿孔技術可以顯著提升pENVPOL和pGAGTNR質粒在小鼠體內的表達水平。50μg DNA質粒使用體內電穿孔介導后,誘導的HIV-1 Env特異性抗體反應滴度提高了10倍,HIV-1抗原特異性細胞免疫反應強度提高了1倍；5μg DNA在使用體內電穿孔介導后,誘導的Env特異性抗體反應滴度仍為50μg單獨肌肉注射組的5倍,總體HIV-1抗原特異性細胞免疫反應與50μg... 

【文章來源】：中國疾病預防控制中心北京市

【文章頁數】：105 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．３ＥＬＩＳｐｏｔ檢測Ｔ細胞免疫反應結果??Ｆｉｇ?１．３?Ｔ?ｃｅｌｌ?ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＥＬＩＳｐｏｔ

Ｅｎｖ抗原特異的體液免疫反應ＥＬＩＳＡ測定結果顯示，ＤＮＡ肌肉注射后電（ＤＮＡ?ＩＭＥ巧組誘導的Ｅｎｖ特異性體液免疫反應強度顯著高于單獨肌肉注＋ＩＬ１５?佐劑（ＤＮＡ＆Ｌ－１５?ＩＭ）及?ＤＮＡ＋ＢＣＧ?佐劑組（ＤＮＡ＆ＢＣＧＩＭ），＋ＰＡ－ＭＳＨＡ佐劑組（ＤＮＡ＆ＰＡ?ＩＭ）免疫反應強度基本相同。ＤＮＡ加佐劑肌后進行體內電穿孔刺激誘導的Ｅｎｖ特異性體液免疫反應強度均顯著高于應的ＤＮＡ加佐劑單獨肌肉注射組。ＤＮＡ＆ＰＡ?ＩＭＥＰ組與ＤＮＡ＆ＢＣＧ?ＩＭ３３??

化刺激的化ＩＳｐｏｔ結果顯示，ＤＮＡ＆ＰＡ?ＩＭＥＰ組誘導了最為理想的性Ｔ細胞免疫反應口８４９?±?１１７?ＳＦＵ／１０６細胞），總體Ｔ細胞免疫ＥＰ?組（１８６５?±１２６ＳＦＵ／１０６?細胞）提高了?１．５?倍，同時?Ｅｎｖ、Ｐｏｌ、Ｔ免疫反應強度也顯著高于ＤＮＡ?ＩＭＥＰ組，表明與ＰＡ－ＭＳＨＡ佐樣進行體內電穿孔刺激，ＤＮＡ質�？烧T導比單獨免疫時更為反應。Ｐ〇ｒ持異柱細胞免疫反應結果顯示，ＤＮＡ加佐劑肌注后體的免疫反應強度均顯著高于其相對應的ＤＮＡ加佐劑單獨肌肉注－１５?ＩＭＥＰ組誘導的Ｅｎｖ特異性細胞免疫恆答顯著高于ＤＮＡ＆Ｌ－１加佐劑肌注后電穿孔組誘導的ＴＮＲ特異性細胞免疫應答顯著高肌肉注射組，同時也均顯著窩于ＤＮＡＩＭＥＰ組。??及ＶＴＫｇｐｅ不同免疫間隔小鼠實驗??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]HIV-1 DNA疫苗的免疫效價及其與免疫劑量的相關性[J]. 郝彥玲,李平,何彥平,孫紅巖,傅晶晶,邵一鳴.  中國生物制品學雜志. 2012(08)
[2]體內電穿孔在質粒介導的基因轉移及DNA免疫中的應用[J]. 張舟,徐智勇,陳佩,周芳,張憲省,劉勇,邵一鳴.  中華微生物學和免疫學雜志. 2010 (06)
[3]用電穿孔方法研究H5N1禽流感病毒DNA疫苗對動物的免疫保護作用(英文)[J]. 張強哲,秦曦明,董海麗,梁榮,何宏軒,李希,姜北宇,劉湘軍,段明星.  生物化學與生物物理進展. 2005(08)



本文編號：2908706