本文關鍵詞：帚霉新種所致暗色絲孢霉病的臨床與實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:暗色絲孢霉病(Phaeohyphomycosis),系暗色真菌引起的淺表組織,皮膚,角膜,皮下組織甚至系統(tǒng)性感染。暗色真菌通常為土壤腐生菌和植物病原菌,其孢子廣泛存在于空氣中,其中許多為實驗室常見的污染菌,在人體表面可有短暫的停留。當機體免疫力低下,或患有糖尿病、白血病或長期服用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素時,病原菌可經(jīng)肺,皮膚傷口進入人體引起感染,甚至可以經(jīng)血液循環(huán)播散至全身引起系統(tǒng)性感染。其中一些具有親神經(jīng)性,易侵犯腦和腦膜,引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變。本文從1例引起皮下暗色絲孢霉病的帚霉新種的分離鑒定開始,圍繞其表型特征、體外藥敏、分子鑒定等方面進行了研究。第一部分:報告1例由帚霉新種所致的暗色絲孢霉病并對該菌進行分離鑒定和臨床實驗研究�；颊吣�,52歲,左手側緣疣狀增生性斑塊7年余。發(fā)病前虎口部有外傷史。期間曾予冷凍治療,效不佳。查體:左手掌外側緣境界清楚疣狀高度增生性斑塊,表面粗糙顆粒狀,少量干燥性血痂,中央皮損部分消退呈環(huán)狀。真菌鏡檢見細長分隔菌絲,未見硬殼小體;真菌培養(yǎng)可見生長緩慢的暗黑色菌落形成,表面形成放射狀皺褶伴培養(yǎng)基開裂;組織病理學檢查示表皮角化過度,假上皮瘤樣增生,真皮內(nèi)混合性炎癥細胞浸潤為主的感染性肉芽腫。基于ITS測序的BLAST分析顯示該菌株位于帚霉屬的獨立分支。診斷:帚霉新種所致皮下暗色絲孢霉病。治療采用斯皮仁諾(伊曲康唑)400mg/日和阿維A 20mg/日口服3個月后,皮損完全消退。隨訪半年無復發(fā)。第二部分:抗真菌藥物體外對抗帚霉新種的敏感性及表型研究:將從臨床患者皮損分離出的帚霉新種分別接種于不同培養(yǎng)基上,觀察其菌落形態(tài),生長速率。玻片小培養(yǎng)及掃描電鏡鏡下觀察其菌絲及孢子形態(tài)。參照美國臨床實驗室標準化委員會(CLSI)的針對產(chǎn)孢絲狀真菌的M38-A2方案進行體外藥敏試驗。結果示:此帚霉新種在不同培養(yǎng)基上表現(xiàn)為不同形態(tài)的菌落,在GC培養(yǎng)基上生長最快,PDA、SDA、MEA培養(yǎng)基上產(chǎn)孢較多。玻片小培養(yǎng)示:淡棕色分支分隔菌絲,分生孢子梗直立,帚狀枝疏散分布,瓶梗頂端產(chǎn)生長短不一、松散性分生孢子鏈。電鏡示:末端膨大的瓶梗,成串的分生孢子鏈及帚狀枝。溫度耐受試驗示此帚霉新種在37℃下生長良好。體外藥敏試驗結果示此菌株對伊曲康唑及特比萘芬敏感。第三部分:帚霉新種的分子鑒定:DNA提取、擴增及測序,將PCR擴增片段送到上海生工生物工程技術服務有限公司純化并雙向測序。隨后將測序結果進行種系發(fā)生分析。ITS和LSU測序分別獲得567 bp和580 bp的片段,相應序列結果已上傳至GenBank,分別獲得序列號KP764411和KR006348�；贗TS及LSU的序列結果與其近源的帚霉屬菌種的序列資料構建種系發(fā)生樹。結果顯示該菌株位于帚霉屬內(nèi)單獨分支上。結論:1.本病例為帚霉新種所致的暗色絲孢霉病,經(jīng)伊曲康唑及阿維A治療后完全好轉(zhuǎn)。隨訪半年無復發(fā)。2.經(jīng)表型觀察,此帚霉新種在各培養(yǎng)基上生長情況各不相同;體外藥敏試驗示其對特比萘芬及伊曲康唑敏感。溫度耐受試驗顯示37℃下培養(yǎng)7天可見菌落生長良好。3.分子鑒定:給予ITS及LSU測序結果構建種系發(fā)生樹,結果顯示該菌株位于帚霉屬內(nèi)獨立分支上。
【關鍵詞】：帚霉 暗色絲孢霉病 體外藥敏 分子鑒定
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R756
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-15
• 參考文獻13-15
• 第一部分 帚霉新種所致暗色絲孢霉病的臨床研究15-26
• 材料與方法15-20
• 結果20-22
• 討論22-24
• 參考文獻24-26
• 第二部分 抗真菌藥物體外對抗帚霉新種的敏感性及表型研究26-39
• 材料與方法26-32
• 結果32-35
• 討論35-37
• 參考文獻37-39
• 第三部分 帚霉新種的分子鑒定39-50
• 材料與方法39-41
• 結果41-47
• 討論47-49
• 參考文獻49-50
• 結論50-51
• 綜述51-70
• 參考文獻59-70
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況70-71
• 致謝71-72

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本文編號：399600