本文關(guān)鍵詞：阿薩希毛孢子菌體外氟康唑誘導(dǎo)耐藥的方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的毛孢子菌屬(Trichosporon spp.)廣泛存在于自然界中,包含50個(gè)種,其中可以引起人類感染的包括16種。臨床上由毛孢子菌引起的感染約占所有已確診的播散性真菌感染疾病的10%。其中,T.asahii是毛孢子菌侵入性感染的常見(jiàn)致病原,可導(dǎo)致系統(tǒng)性、致命性的毛孢子菌病。常見(jiàn)于免疫缺陷或低下宿主,如中性粒細(xì)胞減少、器官移植、惡性血液病、大面積燒傷及AIDS患者,預(yù)后較差。近10年間,伴隨著抗真菌藥物特別是唑類藥物的廣泛應(yīng)用,關(guān)于阿薩希毛孢子菌對(duì)抗真菌藥物出現(xiàn)耐藥的報(bào)道明顯增多。T.asahii耐藥現(xiàn)象的出現(xiàn),使臨床治療面臨著前所未有的困難,而研發(fā)新型抗真菌藥往往需要足夠長(zhǎng)的周期,因此研究有關(guān)氟康唑?qū)υ摼哪退帣C(jī)制,進(jìn)而尋找新的藥物治療靶點(diǎn)具有重要意義。而研究T.asahii對(duì)唑類藥物耐藥機(jī)制的關(guān)鍵是獲得穩(wěn)定的唑類耐藥菌株。通過(guò)體外誘導(dǎo)獲得耐藥株常存在誘導(dǎo)成功率低、耐藥性不穩(wěn)定等問(wèn)題,極大地限制了耐藥株的應(yīng)用。因此,需要建立一種成功率高、耐藥性穩(wěn)定的T.asahii唑類藥物耐藥誘導(dǎo)方法。本研究嘗試應(yīng)用氟康唑聯(lián)合甲潑尼龍琥珀酸鈉體外誘導(dǎo)T.asahii,獲得氟康唑耐藥株,并評(píng)價(jià)其耐藥株獲得成功率及耐藥性的穩(wěn)定性,進(jìn)一步奠定T.asahii唑類耐藥機(jī)制的理論研究基礎(chǔ)。研究方法1.依據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)指南文件M27-A3對(duì)16株T.asahii進(jìn)行氟康唑藥物敏感性檢測(cè);2.根據(jù)藥敏結(jié)果,對(duì)篩選出的T.asahii氟康唑敏感菌株,分別進(jìn)行氟康唑濃度梯度誘導(dǎo)耐藥、氟康唑濃度梯度聯(lián)合甲潑尼龍琥珀酸鈉誘導(dǎo)耐藥、單純甲潑尼龍琥珀酸鈉誘導(dǎo)耐藥,并設(shè)定不含任何藥物的空白對(duì)照組;3.在無(wú)藥YPD培養(yǎng)基中對(duì)獲得的氟康唑耐藥菌株進(jìn)行30次傳代,每次傳代后均測(cè)定菌株的最小抑菌濃度(MIC),觀察菌株氟康唑耐藥性的穩(wěn)定性;4.參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的M27-A3標(biāo)準(zhǔn)化方案,對(duì)確立的穩(wěn)定氟康唑耐藥株進(jìn)行伏立康唑、伊曲康唑、兩性霉素B和卡泊芬凈藥物敏感性檢測(cè),觀察耐藥株的交叉耐藥情況。結(jié)果1.16株T.asahii均為氟康唑敏感菌株,MIC均在0.125μg/mL-4μg/mL范圍內(nèi);2.應(yīng)用氟康唑?qū)?6株T.asahii進(jìn)行誘導(dǎo)后,獲得12株T.asahii耐氟康唑菌株(75%),MIC值在16~64μg/m L濃度范圍,MIC50=64μg/mL,MIC90=64μg/mL。受試菌株經(jīng)甲潑尼龍琥珀酸鈉聯(lián)合氟康唑誘導(dǎo)耐藥后,產(chǎn)生氟康唑耐藥菌株16株(100%),MIC值均≥64μg/mL。甲潑尼龍琥珀酸鈉干預(yù)組菌株的MIC均在0.25μg/mL-4μg/mL范圍內(nèi),MIC50=0.5μg/mL,MIC90=4μg/mL,與傳代前的原始MIC值相比無(wú)明顯變化�？瞻讓�(duì)照組菌株的MIC均在0.5μg/mL-4μg/mL范圍內(nèi),MIC50=1μg/mL,MIC90=4μg/mL,與傳代前的原始MIC值相比無(wú)明顯變化;3.兩組中獲得的T.asahii氟康唑耐藥株經(jīng)30代無(wú)藥培養(yǎng)后,單純氟康唑誘導(dǎo)組獲得6株穩(wěn)定的氟康唑耐藥株(37.5%),甲潑尼龍琥珀酸鈉聯(lián)合氟康唑誘導(dǎo)組獲得9株穩(wěn)定的氟康唑耐藥株(56.25%);4.對(duì)單純氟康唑誘導(dǎo)后獲得的6株T.asahii氟康唑耐藥株進(jìn)行伏立康唑、伊曲康唑、兩性霉素B、卡泊芬凈的藥物敏感性檢測(cè),6株原代菌株及其誘導(dǎo)菌株、傳代菌株均對(duì)AMB均不耐藥,對(duì)CAS均不敏感。6株菌隨著氟康唑誘導(dǎo)濃度增加,對(duì)VRC和ITC的MIC亦逐漸升高,5株菌對(duì)ITC耐藥,MIC≥1μg/mL,2株菌對(duì)VRC表現(xiàn)為耐藥,MIC≥4μg/mL。結(jié)論甲潑尼龍琥珀酸鈉聯(lián)合氟康唑誘導(dǎo)法與單純氟康唑誘導(dǎo)法相比,可以獲得更高的耐藥成功率,具有更好的耐藥穩(wěn)定性,甲潑尼龍琥珀酸鈉在T.asahii氟康唑耐藥性誘導(dǎo)過(guò)程中起協(xié)同作用。T.asahii唑類藥物敏感菌株經(jīng)氟康唑聯(lián)合甲潑尼龍琥珀酸鈉誘導(dǎo)后,可以產(chǎn)生對(duì)氟康唑的耐藥性,同時(shí)對(duì)伏立康唑、伊曲康唑的耐藥性變化與氟康唑耐藥性呈正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：氟康唑 阿薩希毛孢子菌 最小抑菌濃度 耐藥性
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R519;R446.5
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-6
• 英文摘要6-8
• 中文摘要8-10
• 1. 前言10-14
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料14-19
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法19-26
• 4. 結(jié)果26-46
• 5. 討論46-51
• 全文結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-59
• 文獻(xiàn)綜述 阿薩希毛孢子菌感染治療新進(jìn)展(待發(fā)表)59-66
• 參考文獻(xiàn)63-66
• 在讀期間發(fā)表的文章66-67
• 致謝67

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本文編號(hào)：346924