目的:乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）共價(jià)閉合環(huán)狀DNA（Covalently closed circular DNA,cccDNA）是乙肝病毒前基因組RNA（Pregenomic RNA,pg RNA）復(fù)制的原始模板,對乙肝病毒的復(fù)制以及感染狀態(tài)的建立具有十分重要的意義。以往文獻(xiàn)報(bào)告了多種進(jìn)行HBV cccDNA定量檢測的方法,各有其利弊。本研究擬采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)即熒光定量PCR（Fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）的檢測方法進(jìn)行HBV cccDNA定量檢測,初步探討HBV cccDNA熒光定量檢測方法在慢性乙型肝炎患者肝組織中的臨床應(yīng)用及意義。方法:通過使用HBV cccDNA、HBV Total DNA以及HBV pg RNA的特異性引物和探針,將含有HBV基因的p HBV1.3-B6質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品,根據(jù)HBV質(zhì)粒的不同拷貝數(shù),建立FQ-PCR檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測HBV cccDNA、BV Total DNA以及HBV pg RNA含量;用Ju... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

建立病毒學(xué)指標(biāo)的熒光定量PCR擴(kuò)增曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖 2 終末期肝病患者肝組織病毒學(xué)指標(biāo)的表達(dá)情況A 圖：終末期肝病患者肝細(xì)胞 HBV cccDNA 的表達(dá)情況，B 圖：終末期肝病患者肝細(xì)胞 HBVtal DNA 的表達(dá)情況，C 圖：NAs 經(jīng)治的終末期肝病患者肝細(xì)胞 HBV cccDNA 的表達(dá)情況，D：NAs 經(jīng)治的終末期肝病患者肝細(xì)胞 HBV Total DNA 的表達(dá)情況。

圖 3 為核苷經(jīng)治慢性乙型肝炎患者基線和治療 48 周時(shí)肝細(xì)胞病毒學(xué)指標(biāo)A 圖：肝細(xì)胞 HBV cccDNA 定量；B 圖：肝細(xì)胞 HBV Total DNA 定量；C 圖：肝細(xì)胞 HBV pgRNA定量；D 圖：血清 HBsAg 定量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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