[目的]探討KLF4調(diào)控的TLR-2/p38MAPK/NF-κB信號通路在脊柱結(jié)核發(fā)病機制中的作用。[方法]實驗組為經(jīng)手術(shù)及病理證實的8例脊柱結(jié)核患者,對照組為5例健康人群。收集并對比分析A、B兩組的臨床表現(xiàn)、血常規(guī)、ESR、C-RP。采集外周靜脈血10 ml,提取總RNA,利用表達(dá)譜基因芯片檢測A、B兩組外周血白細(xì)胞差異表達(dá)的mRNA基因,篩選出在脊柱結(jié)核患者中高表達(dá)的KLF4基因。初步驗證采用以下三種方法:應(yīng)用RT-PCR檢測外周血中KLF4、TLR-2、p38、NF-κB基因在mRNA水平的表達(dá);應(yīng)用ELISA法對IFN-r、TNF-α、IL-1進(jìn)行檢測;應(yīng)用Western Blot法檢測外周血白細(xì)胞中KLF4、TLR-2、磷酸化p38（p-p38）、p38、NF-κB蛋白的表達(dá)。[結(jié)果]臨床結(jié)果顯示,相對于正常對照組,脊柱結(jié)核組ESR、CRP、中性粒細(xì)胞相對值升高,淋巴細(xì)胞絕對值、淋巴細(xì)胞相對值及血紅蛋白值降低。芯片結(jié)果提示脊柱結(jié)核患者與正常對照組之間顯著差異表達(dá)基因共68條,上調(diào)基因16條,下調(diào)基因52條,其中KLF4基因在脊柱結(jié)核患者外周血中差異表達(dá)最為顯著,升高2.89倍... 

【文章來源】：中國矯形外科雜志. 2016,24(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1. 1 研究對象
    1. 2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)
    1. 3 主要儀器及試劑
    1. 4 外周血白細(xì)胞總RNA的保存、提取及質(zhì)檢
    1.5表達(dá)譜芯片篩選外周血白細(xì)胞差異表達(dá)的mRNA基因
    1. 6 初步驗證基因芯片篩選的差異基因
        1. 6. 1 RT - PCR檢測KLF4、TLR - 2、p38、NF - κB基因擴增
        1. 6. 2 ELISA法檢測TNF - α、IFN - γ、IL - 1 的表達(dá)
        1. 6. 3 Western Blot法檢測KLF4、TLR - 2、p - p38、p38、NF - κB蛋白的表達(dá)
    1. 7 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2. 1 臨床結(jié)果
    2. 2 脊柱結(jié)核組與正常對照組外周血差異基因表達(dá)結(jié)果
        2. 2. 1 聚類分析結(jié)果
        2. 2. 2 差異基因參與的代謝通路分析結(jié)果
        2. 2. 3 RT - PCR驗證芯片結(jié)果
    2. 3RT - PCR法初步驗證: 外周血白細(xì)胞中KLF4、TLR - 2、p38、NF - κBmRNA的表達(dá)
    2. 4 ELISA法初步驗證: 外周血IFN - γ、TNF - α、IL - 1 的表達(dá)
    2. 5Western Blot法初步驗證: 檢測外周血白細(xì)胞中KLF4、TLR - 2、p - p38、p38、NF - κB蛋白的表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]超短程化療治療脊柱結(jié)核外周血基因表達(dá)的研究[J]. 牛寧奎,王騫,施建黨,王自立,耿廣起,金衛(wèi)東.  中華實驗外科雜志. 2015 (04)
[2]脊柱結(jié)核外科治療進(jìn)展[J]. 邵川強,王文己.  中國矯形外科雜志. 2012(03)
[3]脊柱結(jié)核病尿脫氧吡啶啉檢測及其臨床意義[J]. 施建黨,王自立,丁惠強,趙浩寧,金衛(wèi)東,李平.  中國矯形外科雜志. 2008(11)
[4]脊柱結(jié)核術(shù)后未愈及術(shù)后復(fù)發(fā)的原因探討[J]. 施建黨,王自立.  中國矯形外科雜志. 2005(15)
[5]巨噬細(xì)胞攝取結(jié)核分支桿菌相關(guān)的受體[J]. 王曉蕾,雷建強,王洪海.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2003(05)



本文編號：3131184