本文關鍵詞：HIV派生的新型miRNA99對巨噬細胞釋放TNF-α、IL-6、IL-1β和吞噬功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討HIV派生的新型miRNA99對巨噬細胞釋放TNF-α、IL-6、IL-1β及其吞噬功能的影響。方法:用佛波酯(PMA)刺激人單核細胞白血病細胞(THP-1)分化成貼壁的巨噬細胞,倒差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)并用流式細胞術測定CD11b并鑒定為巨噬細胞。將鑒定好的巨噬細胞進行分組(分為對照組、LipidA組、miRNA-TAR組、miRNA99組),采用轉染試劑將化學合成的miRNAs瞬時轉染至巨噬細胞內或用LipidA作用巨噬細胞,用人TNF-α、IL-6、IL-1βELISA試劑盒測定細胞上清液TNF-α、IL-6、IL-1β的水平。采用共聚焦顯微鏡觀察巨噬細胞吞噬熒光標記的大腸桿菌的情況。將各組已吞噬熒光標記的大腸桿菌的巨噬細胞制成單細胞懸液,用流式細胞術檢測各組細胞的吞噬率。結果:1.未經PMA刺激的THP-1細胞呈單個懸浮狀態(tài),圓形或類圓形,葡萄串樣聚集;經PMA刺激后細胞貼壁生長,細胞伸出偽足,呈梭形或多邊形,表明THP-1基本分化為巨噬細胞。2.經PMA刺激24小時后細胞表面CD11b陽性率在99%以上,說明THP-1細胞已大部分分化為巨噬細胞,可以用于后期的實驗。3.LipidA組與miR99組Mφ培養(yǎng)上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量均明顯高于對照組(p0.05),有統(tǒng)計學差異。但miR-TAR組與對照組無明顯差異(p0.05)。而且miR99組較LipidA組TNF-α、IL-6、IL-1β水平明顯升高,p0.05,有統(tǒng)計學差異。4.巨噬細胞胞漿內呈現綠色熒光,說明巨噬細胞已吞噬熒光標記的大腸桿菌。5.各組巨噬細胞吞噬細菌的能力不同,經miRNA99刺激的巨噬細胞吞噬細菌的能力較對照組明顯降低。前期研究已證明內毒素能抑制巨噬細胞的吞噬功能。從上圖中得出,miRNA99組較LipidA組吞噬率降低明顯,說明miRNA99對巨噬細胞吞噬功能的損害較內毒素更明顯。結論:1.miRNA99使巨噬細胞釋放TNF-α、IL-6、IL-1β增多;2.miRNA99使巨噬細胞的吞噬功能下降。
【關鍵詞】：miRNA 巨噬細胞 TNF-α IL-6 IL-1β 吞噬功能
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R512.91
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對照表9-10
• 前言10-11
• 1 材料與方法11-13
• 1.1 材料11
• 1.2 方法11-13
• 2 結果13-19
• 2.1 經PMA刺激后的單核細胞白血病細胞形態(tài)13
• 2.2 巨噬細胞表達CD11b的情況13-14
• 2.3 各組巨噬細胞上清培養(yǎng)液中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平14-15
• 2.4 吞噬熒光標記的大腸桿菌的巨噬細胞在熒光共聚焦顯微鏡下的圖片15-16
• 2.5 各組巨噬細胞吞噬熒光標記的大腸桿菌后吞噬率的情況16-19
• 3 討論19-23
• 4 結論23-24
• 4.1 miRNA99使巨噬細胞釋放TNF-α、IL-6、IL-1β增多23
• 4.2 miRNA99使巨噬細胞的吞噬功能下降23-24
• 參考文獻24-26
• 綜述26-36
• 參考文獻32-36
• 致謝36-37
• 在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果37-38
• 個人簡歷38

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