本文關(guān)鍵詞：5-氨基酮戊酸光動力療法對白念珠菌抗菌效應(yīng)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：白念珠菌作為一種常見的條件致病菌,易引起皮膚黏膜甚至深部器官的感染。目前為止,口服及外用藥物仍是對抗白念珠菌病感染主要方法。近年來隨著糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑在臨床的大量使用,其耐藥性也日益增強(qiáng),抗白念珠菌藥物治療面臨的挑戰(zhàn)也越來越大。近年來PDT在抗白念珠菌感染的臨床治療上,部分療效得到了證實(shí)。PDT是一種微創(chuàng)醫(yī)學(xué)治療方法,利用光敏劑轉(zhuǎn)化生成的原卟啉IX(PpIX)經(jīng)光照產(chǎn)生具有殺傷作用的單線態(tài)氧而發(fā)揮治療效果。在實(shí)際應(yīng)用中,選擇什么樣的光敏劑類型、光敏劑濃度的高低、光敏劑孵育時間及照光時間的長短、光照劑量的強(qiáng)弱都處于不斷探索中。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)也不完全相同。這也影響了臨床上PDT在皮膚科抗白念珠菌感染上的發(fā)展。本研究首先探索了PDT療法對白念珠菌的抗菌效應(yīng)及量效關(guān)系,進(jìn)一步為臨床選擇最佳光敏劑濃度以及最佳孵育時間提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的：1、對兩種測定原卟啉IX (PpIX)熒光強(qiáng)度的方法進(jìn)行比較,探求高效、準(zhǔn)確、可靠、快速的檢測方法。2、探求PpIX熒光強(qiáng)度與孵育時間和ALA濃度的關(guān)系。3、研究PDT療法對白念珠菌的抗菌效應(yīng)。方法：1、將白念珠菌懸液與5-氨基酮戊酸(5-ALA)避光孵育。分別利用熒光分光光度計(jì)和共聚焦顯微鏡測量PpⅨ熒光強(qiáng)度。2、制備白念珠菌懸液,分設(shè)實(shí)驗(yàn)組和對照組,實(shí)驗(yàn)分兩部分,一是將不同濃度5-ALA與白念珠菌菌懸液混合避光60min孵育；二是將白念珠菌懸液與濃度為200mg/ml的5-ALA混合后35℃避光分別孵育15、30、45、60、90、120、150、180min。利用共聚焦激光掃描顯微鏡測量PpⅨ熒光強(qiáng)度;利用MTT法測定5-ALA-PDT對白念珠菌生長的抑制率;通過細(xì)胞計(jì)數(shù)板測定殘余菌落數(shù)。結(jié)果：1、兩種測量方法的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較p0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。共聚焦顯微鏡操作簡單,方便快捷,自帶分析軟件可以直接算出測值,計(jì)算精確,但是測量價格較貴,熒光分光光度計(jì)操作相對繁瑣,但是價格便宜。2、實(shí)驗(yàn)組白念珠菌與不同濃度ALA避光孵育后均有有熒光物質(zhì)PpⅨ產(chǎn)生,200mg/ml以上各濃度產(chǎn)生的PpⅨ之間進(jìn)行比較,p0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義300mg/ml以下各濃度組產(chǎn)生的PpⅨ熒光強(qiáng)度與濃度有相關(guān)性。對照組沒有檢測到PpⅨ。3、白念珠菌與ALA避光孵育不同時間后,實(shí)驗(yàn)組有熒光物質(zhì)PpⅨ產(chǎn)生,孵育30min到90min產(chǎn)生的PpⅨ最多,120min以后PpⅨ開始明顯減少,對照組無熒光物質(zhì)出現(xiàn)。結(jié)論：1、共聚焦顯微鏡無論從測量的簡便性還是從測量的準(zhǔn)確性都要優(yōu)于熒光分光光度計(jì)。2、PpⅨ熒光強(qiáng)度與ALA濃度及孵育時間密切相關(guān)。這直接影響到ALA-PDT對白念珠菌的抗菌效應(yīng)。也為臨床ALA-PDT治療白念珠菌疾病提供了理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：5-氨基酮戊酸 白念珠菌 光動力 原卟啉Ⅸ
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R756.5
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 緒論11-14
• 第一章 5-ALA誘導(dǎo)白念珠菌生成PpⅨ兩種檢測方法的比較14-22
• 引言14
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法15-16
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-17
• 4. 討論17-18
• 結(jié)論18-19
• 參考文獻(xiàn)19-22
• 第二章 不同濃度5-氨基酮戊酸對光動力方法抗白念珠菌效果的影響22-34
• 引言22
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料22-23
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法23-24
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-28
• 4. 討論28-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 第三章 5-氨基酮戊酸不同孵育時間對光動力方法抗白念珠菌效果的影響34-46
• 引言34
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料34-35
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法35-36
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-40
• 4. 討論40-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 文獻(xiàn)綜述46-53
• 參考文獻(xiàn)51-53
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況53-54
• 致謝54

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