發(fā)布時間：2020-11-14 10:01

　　 背景原發(fā)性肝癌作為臨床上最常見的惡性腫瘤之一,嚴重威脅著人民的健康。流行病學發(fā)現(xiàn),我國的肝癌患者中約90%有HBV感染病史。已有文獻報道,在慢性肝病患者中可觀察到腸道細菌移位,小腸細菌過度生長(Small Intestinal Bacterial Overgrowth,SIBO)及內(nèi)毒素血癥。Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)作為最重要的模式識別受體之一,在宿主抗病原微生物入侵的免疫應答中發(fā)揮重要作用。越來越多的研究顯示慢性炎癥持續(xù)存在與肝癌的發(fā)生密切相關,TLRs介導的免疫炎癥反應在此過程中起重要作用,但具體的機制仍不清楚。目的探討乙肝相關性肝癌患者外周血單核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)表面TLR2和TLR4的表達水平及與SIBO的關系。方法選取2015年8月至2017年8月期間鄭州人民醫(yī)院消化內(nèi)科收住院的乙肝相關性肝癌患者(乙肝肝癌組)46例,慢性乙型肝炎患者(慢乙肝組)35例和健康體檢者(健康對照組)16例。利用流式細胞術(Flow cytometry,FCM)檢測三組研究對象外周血CD14~+單核細胞表面TLR2~+細胞、TLR4~+細胞所占的比例(%)和平均熒光強度的幾何均數(shù)(geometric mean fluorescence,GMF);行乳果糖氫呼氣試驗(lactoluse hydrogen breath test,LHBT)檢測SIBO的發(fā)生率;應用顯色基質(zhì)鱟試劑試管法檢測內(nèi)毒素水平。比較健康對照組、慢乙肝組及乙肝肝癌組三組間TLR2和TLR4的表達、內(nèi)毒素水平、SIBO發(fā)生率的不同,并比較慢乙肝組和乙肝肝癌組合并SIBO陽性者與其對應的SIBO陰性者TLR2、TLR4的表達水平有無差異,最后將TLR2、TLR4在乙肝相關性肝癌者中的表達水平與內(nèi)毒素進行相關性分析。結果1.乙肝肝癌組SIBO陽性率為71.7%,慢乙肝組SIBO陽性率為28.6%,健康對照組SIBO陽性率為6.3%,三組的SIBO陽性率差異具有統(tǒng)計學意義(?~2=26.77,P0.05);進一步進行兩兩比較顯示,乙肝肝癌組SIBO陽性率高于慢乙肝組及健康對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(?~2=14.87,Pα’=0.017;?~2=20.56,Pα’=0.017);慢乙肝組SIBO的陽性率高于健康對照組,但差異無統(tǒng)計學意義(Pα’=0.017)。2.乙肝相關性肝癌患者外周血CDl4~+單核細胞表面TLR2~+細胞、TLR4~+細胞所占的比例(%)和GMF分別為70.08±11.83、76.27±11.13和94.35±26.05、41.96±14.32顯著高于慢乙肝組25.29±7.28、22.97±7.39和32.66±7.57、26.67±5.77及健康對照者20.83±6.08、14.89±8.21和26.96±6.47、15.21±6.87差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。慢乙肝患者TLR2~+細胞的比例與健康對照組者相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);TLR2~+細胞的GMF、TLR4~+細胞的比例及GMF與健康對照組者相比,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.將患者依乳果糖氫呼氣的結果分為SIBO陽性組和SIBO陰性組;其中乙肝相關性肝癌合并SIBO陽性患者外周血CDl4~+單核細胞表面TLR2~+細胞、TLR4~+細胞的比例(%)及GMF分別為73.62±11.10、80.58±9.00及103.19±22.75、46.81±13.90與其各自對應的SIBO陰性組61.09±11.10、65.34±8.25及71.91±20.11、29.65±4.96相比差異均具有統(tǒng)計學意義(均P0.05)。慢乙肝合并SIBO陽性組TLR2~+細胞、TLR4~+細胞的比例(%)及GMF分別為30.85±7.49、28.15±10.32及38.24±10.48、28.15±10.32與其對應的SIBO陰性組23.90±6.65、21.67±6.03及31.26±6.13、24.86±4.76相比差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.乙肝相關性肝癌患者血漿內(nèi)毒素水平高于慢乙肝組和健康對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);乙肝肝癌合并SIBO陽性者內(nèi)毒素水平高于SIBO陰性者,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.乙肝相關性肝癌患者外周血CDl4~+單核細胞表面TLR2~+細胞、TLR4~+細胞的比例(%)及GMF與內(nèi)毒素水平呈正相關(r分別為0.371、0.656、0.469、0.805,均P0.05)。結論乙肝相關性肝癌患者易發(fā)生SIBO,而合并SIBO患者TLR2、TLR4表達水平及血漿內(nèi)毒素濃度增高,且內(nèi)毒素濃度與TLR2、TLR4的表達水平升高呈正相關,SIBO可能通過TLR2、TLR4的高表達在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮一定的作用。
【學位單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R512.62;R735.7
【部分圖文】：

新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文利用前向散射光 (Forward light scatter FSC) 和側向散射光 (Side light sc散點圖, 并去除死亡細胞及碎片，CD14 標記外周血單核細胞，CD14 與出 PBMC（見圖 1.圖 2）。每份樣本獲取 10000 個 CD14+單核細胞，記錄單核細胞表面 TLR2+和 TLR4+細胞的比例（%）及 GMF,作直方圖比較

新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文利用前向散射光 (Forward light scatter FSC) 和側向散射光 (Side light sc散點圖, 并去除死亡細胞及碎片，CD14 標記外周血單核細胞，CD14 與出 PBMC（見圖 1.圖 2）。每份樣本獲取 10000 個 CD14+單核細胞，記錄單核細胞表面 TLR2+和 TLR4+細胞的比例（%）及 GMF,作直方圖比較

圖3：乙肝肝癌組，慢乙肝組，健康對照組外周血CD14+單核細胞表面TLR2+細胞所占比例的流式檢測圖圖4：乙肝肝癌組，慢乙肝組，健康對照組外周血CD14+單核細胞表面TLR2+細胞GMF的流式檢測圖
【參考文獻】

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本文編號：2883354