【摘要】：本文旨在對發(fā)熱伴血小板減少綜合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)患者中和抗體進(jìn)行定性和效價(jià)評估,建立中和抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。用96孔微量培養(yǎng)板培養(yǎng)非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero-E6)并接種發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV),以抗核衣殼蛋白(nucleocapsid protein,NP)單克隆抗體為一抗,使用間接ELISA檢測SFTSV NP,根據(jù)光密度(optical density,OD)判斷陽性孔數(shù),采用ReedMuench方法計(jì)算病毒半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量(50%tissue culture infective dose,TCID_(50)),以反映SFTSV在Vero-E6細(xì)胞中的復(fù)制水平。ELISA檢測中和抗體作用后的病毒殘余量,可間接反映中和抗體的作用效果并進(jìn)行定量。應(yīng)用以上建立的微量中和-ELISA對10例SFTS患者的雙份血清進(jìn)行中和抗體效價(jià)測定,8例患者恢復(fù)期血清效價(jià)較急性期增高4倍以上,7份患者恢復(fù)期血清效價(jià)達(dá)1∶1 280,急性期血清效價(jià)最高為1∶640。結(jié)果提示,本研究建立的ELISA操作簡便,結(jié)果判定客觀,所需時(shí)間短,可用于臨床血清抗體診斷,也可用于血清流行病學(xué)調(diào)查和疫苗效果臨床評價(jià)等。

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