發(fā)布時(shí)間：2020-06-25 02:03

【摘要】：目的探討iNOS、CD206、CD163及Arg1在慢性乙型肝炎與乙型肝炎肝硬化外周血及肝臟組織中表達(dá)差異,以及單核-巨噬細(xì)胞的極化類型并分析其與疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。方法外周血部分:納入慢性乙型肝炎患者61例,包括HBeAg陰性慢性乙型肝炎31例,HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎30例;乙型肝炎肝硬化63例,其中肝硬化代償期33例、肝硬化失代償期30例;正常對(duì)照組36例。收集納入人群外周靜脈血,進(jìn)行全血總RNA的提取,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)外周血iNOS、CD206、CD163及Arg1 mRNA的表達(dá),并分析上述指標(biāo)mRNA表達(dá)量與各肝功能生化指標(biāo)的關(guān)系。肝臟組織部分:納入19例肝癌合并乙型肝炎肝硬化患者行手術(shù)切除的組織(距離癌灶"g5cm處或遠(yuǎn)離癌灶邊緣處)及1例未合并肝癌的乙型肝炎肝硬化患者的肝組織作為乙型肝炎肝硬化組,共20例;納入5例肝臟良性腫瘤或肝囊腫患者行手術(shù)切除的旁邊正常組織作為正常對(duì)照組。提取一部分肝臟組織的總RNA,檢測(cè)乙型肝炎肝硬化患者肝臟中iNOS、CD206、CD163及Arg1 mRNA的表達(dá);將另一部分肝臟組織制作蠟塊,進(jìn)行HE及Masson染色,免疫組化方法檢測(cè)iNOS、CD206的蛋白質(zhì)表達(dá)水平,并采用IPP圖像分析軟件檢測(cè)平均光密度值。結(jié)果外周血部分:慢性乙型肝炎及乙型肝炎肝硬化中iNOS、CD206、CD163及Arg1 mRNA的表達(dá)量較正常對(duì)照組均增高(均P0.05),肝炎組以iNOS mRNA上升為主,肝硬化組以CD206、CD163及Arg1 mRNA上升為主,且肝硬化失代償期CD206、CD163 mRNA表達(dá)量高于肝硬化代償期(均P0.01)。HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎iNOS mRNA表達(dá)量較HBeAg陰性肝炎增高(P0.05)。肝硬化組CD163 mRNA表達(dá)水平與總膽紅素水平成正相關(guān),與凝血酶原活動(dòng)度成負(fù)相關(guān)。肝臟組織部分:乙型肝炎肝硬化組肝臟中iNOS、CD206、CD163及Arg1 mRNA的表達(dá)量均高于正常組(均P0.01)。肝硬化組中CD206、CD163 mRNA比iNOS mRNA表達(dá)量高(均P0.05),以CD206、CD163 mRNA上升為主。正常組中iNOS mRNA與CD206、CD163及Arg1 mRNA表達(dá)量相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。乙型肝炎肝硬化組及正常組HE染色結(jié)果可見(jiàn)與正常組相比,肝硬化組肝臟組織結(jié)構(gòu)紊亂,炎癥細(xì)胞及壞死細(xì)胞明顯增多。Masson染色可見(jiàn)乙型肝炎肝硬化組中膠原纖維表達(dá)量較正常組明顯升高(P0.01),見(jiàn)假小葉形成。免疫組化結(jié)果提示乙型肝炎肝硬化組中肝臟iNOS、CD206的表達(dá)量較正常組增高(P0.01),肝硬化組中CD206表達(dá)量高于iNOS(P0.01),正常組中肝臟iNOS與CD206表達(dá)量相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論慢性乙型肝炎患者外周血單核細(xì)胞可能以向M1方向極化為主,iNOS可能參與了慢性乙型肝炎的慢性化發(fā)展過(guò)程;在乙型肝炎肝硬化患者體內(nèi),巨噬細(xì)胞可能同時(shí)向M1/M2方向極化,但以向M2方向極化為主,CD163與乙型肝炎肝硬化發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),其可能是預(yù)測(cè)其預(yù)后及評(píng)價(jià)病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R512.62;R575.2
【圖文】：

P <0.05），其中CD206、CD163及Arg1 mRNA表達(dá)量與HBeAg陰性肝炎組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。正常對(duì)照組外周血CD206、CD163及Arg1的mRNA表達(dá)量均高于iNOS（P <0.05）。見(jiàn)表3、圖1、圖2。表3 各組外周血中iNOS、CD206、CD163及Arg1 mRNA表達(dá)水平Table 3 The mRNA expression levels of iNOS 、CD206、CD163 andArg1 in the peripheral blood betweengroups分組 iNOS CD206 CD163 Arg1NC 0.326±0.306 1.959±1.472 18.300±11.962 8.306±4.274HBeAg(-)CHB 2.015±0.675 3.377±2.527 24

NOS、CD206、CD163 及 Arg1 表達(dá)及意義 碩士學(xué)位論文23圖2 各組外周血中CD163及Arg1 mRNA表達(dá)水平Figure 2 The mRNA expression levels of CD163 and Arg1 in the peripheral blood between groups注：圖1及圖2中* P <0.05 ** P <0.01 vs NC，# P <0.05 ## P <0.01 vs HBeAg(-)CHB，o P <0.05 oo P<0.01 vs HBeAg(+)CHB，a P <0.05 aa P <0.01 vs CHBRC2.1.3 乙型肝炎肝硬化外周血中iNOS、CD206、CD163及Arg1的mRNA表達(dá)水平 乙型肝炎肝硬化代償期及失代償期iNOS、CD206、CD163及Arg1的mRNA相對(duì)表達(dá)量高于正常對(duì)照組（均P=0.000，P <0.01）,肝硬化組中CD206、CD163及Arg1 mRNA表達(dá)量與正常組相比分別上升約11、12、13倍，其中iNOS mRNA表達(dá)量與正常組相比上升約8.6倍，提示CD206、CD163及Arg1 mRNA增高幅度比iNOS大，且肝硬化失代償期iNOS、CD206及CD163 mRNA表達(dá)量高于肝硬化代償期（UiNOS=660、UCD206=707、UCD163=744,均P <0.05）

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本文編號(hào)：2728698