【摘要】：戊型肝炎病毒性(Hepatitis E virus,HEV)感染是世界上許多國家引起急慢性肝炎的常見原因。每年新出現(xiàn)的戊肝(Hepatitis E,HE)感染人群高達兩千萬,其中大部分的HE感染者不經(jīng)任何治療能夠自愈。HE患者的臨床癥狀各不相同,有些患者可無任何不適,有些患者可能會有急性肝衰竭的表現(xiàn),更有少數(shù)患者會發(fā)展成為慢性HE。有研究報道,在免疫系統(tǒng)受到抑制的HE患者中,如接受過器官移植或者感染過HIV的患者,HEV可以引起HE慢性化。HEV包含包括8種基因型:基因1型和2型只感染人類;基因3型和4型常感染家豬或野豬等動物,易導致人畜共患病;基因5型和6型僅見于野豬中;基因7型和8型已在駱駝中檢出。HEV是一種單股正鏈RNA病毒,其基因長度為7.2kb。HEV包括三種開放閱讀框(Open Reading Frames,ORFs),ORF1編碼一種含有RNA聚合酶的非結構蛋白。ORF2編碼一種長度為660氨基酸的結構蛋白,這種結構蛋白是HEV衣殼的主要組成成分。ORF3編碼一種長度為113 114氨基酸的磷酸化蛋白,這種磷酸化蛋白能夠與多種蛋白相互作用引起強烈的免疫反應。ORF3蛋白的氨基端包含D1和D2疏水結構域,其羧基端含有P1和P2這兩種富含脯氨酸的結構域。固有免疫(Innate immune)是機體抵御病毒侵襲的第一道防線,其對病原體的識別主要依賴模式識別受體(Pattern recognition receptors,PRRs)。PRRs中能夠識別RNA病毒的主要是Toll樣受體(Toll like receptor,TLRs)和維甲酸誘導基因-Ⅰ(Retinoic acid induced geneⅠ,RIG-Ⅰ)樣受體(RIG-I like receptors,RLRs)。病毒感染時,宿主細胞可通過內(nèi)體膜上的TLRs感知被內(nèi)化的病毒,而RLRs則主要感知進入細胞漿內(nèi)的病毒。TLR信號轉導通路分為人髓樣分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)依賴通路和非MyD88依賴通路。MyD88可以影響TLR1,TLR2,TLR5,TLR6,TLR7,TLR8和TLR9的信號傳導,而TLR3通路的信號傳導則被β干擾素TIR結構域銜接蛋白(Toll-interleukin 1 receptor homology-domain-containing adapter-inducing interferon-β,TRIF)調節(jié)。RLR家族包括RIG-Ⅰ,黑色素瘤分化相關基因5(Melanoma Differentiation-Associated protein 5,MDA5)和生理學實驗室蛋白2(laboratory of genetics and physiology-2,LGP-2)。激活TLR或者RLR通路都能夠調控NF-κB和干擾素(IFN)信號通路。這兩種信號通路的激活能夠誘導許多細胞因子和炎癥因子的表達,從而啟動固有免疫反應達到抑制病毒感染的效果。NF-κB信號通路的活化是許多病毒感染機體的一種標志。NF-κB信號通路活化后,可激活多種細胞因子和趨化因子(如TNF-α,IL-6),這些激活的細胞因子和趨化因子可以引起NF-κB通路進一步激活,反過來促進這些細胞因子和趨化因子產(chǎn)生、釋放增多,使得最初的炎癥信號進一步放大。許多病毒感染宿主期間,NF-κB信號通路的活化被認為是宿主對病原體的一種保護應答。病毒感染機體引起固有免疫激活后,宿主體內(nèi)的許多調節(jié)細胞因子、趨化因子以及產(chǎn)生炎癥介質和凋亡抑制因子的酶等多種重要成分受到影響,而研究表明NF-κB信號通路的激活和編碼這些分子的基因轉錄均密切相關。同時有研究報道病毒在感染機體后,為了贏得復制和增加子代病毒產(chǎn)量的時間,通過激活NF-κB信號通路調控多種相關因子抑制凋亡和延長宿主細胞生存,是病毒為了自身生存進化出來的一種自我保護機制。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),1型HEV ORF3對TNFα及TLR3介導的NF-κB信號通路均發(fā)揮抑制作用,而尚無3型HEV ORF3對NF-κB信號通路調控研究的報道。本研究首次發(fā)現(xiàn)3型HEV ORF3蛋白能夠增加Poly(I:C)誘導的P65活性激活NF-κB信號通路。并且HEV ORF3的P2結構域對P65的激活起關鍵作用。HEV ORF3蛋白是通過TLR3-TRIF通路激活P65通路。HEV ORF3通過調節(jié)TLR3轉錄水平和延長TLR3半衰期增加TLR3的表達。同樣的HEV ORF3通過調節(jié)TRIF轉錄水平及延長TRIF半衰期增加TRIF的表達。本研究闡明3型HEV ORF3對NF-κB信號通路調控的作用和機制,拓展了我們對HE致病機制的認識,為臨床防治HE提供新思路和新的作用靶點。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R512.6
【圖文】：

圖 1 HEV 感染人體發(fā)病進程[12]在 HEV 流行區(qū)域， ET-NANBH 的暴發(fā)流行主要由 HEV 引起，因此對于該區(qū)域中出現(xiàn)黃疸癥狀的肝炎病人，應將 HEV 相關檢查作為常規(guī)檢查。在急性 HEV 病例出現(xiàn)較少的國家，如歐洲和美國等發(fā)達國家，如果出現(xiàn)黃疸癥狀、ALT 水平升高或者近期去過 HEV 流行區(qū)域也應考慮 HEV 感染的可能，并及時行 HEV 實驗室檢測明確是否是 HEV 感染；而如果出現(xiàn)上述癥狀而無旅行史的病人，需要首先排除常見的肝炎和膽汁郁積的病因引起，如果排除了以上疾病此時應考慮 HEV 感染的可能并及時行相關實驗室檢查。1.3 戊型肝炎病毒的結構構成1.3.1 戊型肝炎病毒粒子HEV 是一種無包膜的單股正鏈 RNA 病毒。Bradley 等[14]通過免疫電鏡首次觀察到 HEV 為球形病毒顆粒，大小約 27-34nm，其表面有許多類似于杯狀病毒的突起和缺刻結構；病毒顆粒有有實心和空心兩種，前者占天然 HEV 病毒顆粒的 2/3，后者推

圖 2 HEV 天然病毒顆粒的免疫電鏡觀察結果[14]毒的基因組成等[16]首次報道了HEV是一個全長約7.2Kb的單股正7G 帽子結構， 3’端為長度為 65-74 nt 的多聚腺苷酸（常見的基因組外，還包括另外兩個大小分別為 2.0 Kn，這兩個亞基因組 mRNA 都是由基因組外的互補鏈產(chǎn)基因組的 3’端。HEV 基因組包含三個開放閱讀框（，分別是 ORF1，ORF2，ORF3，其中 ORF1 大小約為 RNA 聚合酶的非結構蛋白；ORF2 大小約為 5147-712，該結構蛋白是病毒衣殼的主要組成成分，是 HEV 的同病毒株間存在一定差異，一般在 342-369 nt，編碼 1年來對 ORF3 的研究日益增多，盡管其具體的生物學功

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 Jiang-bing SHUAI;Lu-huan LI;Ai-yun LI;Yong-qiang HE;Xiao-feng ZHANG;;基因3型豬戊型肝炎病毒浙江株全基因組序列分析（英文）[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2017年06期

2 紀方曉;陳濟鐺;梁煥斌;朱婉君;古洪浪;王衡;王林川;張桂紅;;豬戊型肝炎病毒液相蛋白芯片檢測方法的建立[J];中國獸醫(yī)學報;2017年01期

3 蘇艷麗;李世忠;王樹祥;吳冰;;戊型肝炎病毒檢測技術研究進展[J];口岸衛(wèi)生控制;2017年04期

4 李麗娟;申元英;艾志瓊;王濤;張文;李東;段彪;;大理地區(qū)豬源甲型、乙型、戊型肝炎病毒血清流行病學調查[J];四川生理科學雜志;2012年03期

5 桑志迪;張文;沈權;華修國;;戊型肝炎病毒最新研究進展[J];上海預防醫(yī)學雜志;2008年05期

6 李敬云;蔣豫圖;;戊型肝炎病毒的分子生物學研究進展[J];國外醫(yī)學(微生物學分冊);1993年02期

7 王治偉;馬文麗;夏薇;楊瓊;鄭文嶺;;戊型肝炎病毒診斷基因芯片制備的初步研究[J];廣東藥學院學報;2010年03期

8 ;PNAS發(fā)表北京大學基礎醫(yī)學院尹長城課題組關于戊型肝炎病毒結構研究成果[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2009年05期

9 張維誼;劉健;鞠厚斌;周錦萍;;RT-nPCR檢測屠宰場膽汁中豬戊型肝炎病毒[J];中國獸醫(yī)雜志;2009年11期

10 魏紹靜,唐漾波,董惠卿,蔡曉莉;糞便中戊型肝炎病毒散發(fā)株的核酸序列分析[J];中華傳染病雜志;1998年02期

相關會議論文 前10條

1 喬彩霞;張鶴曉;賴平安;高志強;汪琳;蒲靜;吳丹;柏亞鐸;谷強;張偉;段向英;;戊型肝炎病毒熒光定量RT-PCR快速檢測技術的建立和初步應用[A];京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會暨新思想、新觀點、新方法論壇論文集[C];2008年

2 屈勇剛;金寧一;李昌;李霄;;戊型肝炎病毒基因結構及基因分型研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術研討會論文集（上冊）[C];2009年

3 趙欽;周恩民;姜世金;孫培明;荊勝濤;董施偉;張璐;胡守彬;趙菲菲;孫亞妮;;我國首列禽戊型肝炎病毒的基因檢測與鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2009學術年會論文集（下冊）[C];2009年

4 張曉峰;帥江冰;李愛云;方維煥;;浙江地區(qū)豬群中戊型肝炎病毒分子流行病學研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2009學術年會論文集（下冊）[C];2009年

5 屈勇剛;金寧一;金洪濤;魯會軍;李昌;李霄;田明堯;;戊型肝炎病毒宿主動物研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第十二次學術研討會論文集[C];2007年

6 屈勇剛;金寧一;賈鵬;朱光澤;;戊型肝炎病毒流行病學及其感染機理探索研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第七次研討會論文集[C];2008年

7 周錦萍;劉佩紅;張維誼;劉健;鞠厚斌;沈莉萍;李凱航;;上海地區(qū)豬群中戊型肝炎病毒流行情況的調查[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2009學術年會論文集（下冊）[C];2009年

8 周恩民;趙欽;孫亞妮;王鑫杰;趙冀楠;;中國禽戊型肝炎病毒的檢出及流行病學狀況[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十六次學術研討會論文集[C];2012年

9 李霄;金寧一;張鈺;屈勇剛;;戊型肝炎病毒研究現(xiàn)狀及動態(tài)[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第十二次學術研討會論文集[C];2007年

10 伏麗萍;王曉鈞;相文華;趙宏坤;;戊型肝炎病毒的研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會成立20周年慶典暨第十次學術研討會論文集（上）[C];2003年

相關重要報紙文章 前7條

1 記者 陳志江;日本發(fā)現(xiàn)多人感染戊型肝炎病毒[N];光明日報;2002年

2 程守勤;戊肝病毒可能存在不同的血清型亞型[N];中國醫(yī)藥報;2002年

3 ;鯤鵬展翅 志在九霄[N];中國醫(yī)藥報;2002年

4 ;戊型肝炎病毒可能存在不同血清型亞型[N];科技日報;2002年

5 付東紅　嚴軼鋒;北大成功解析戊型肝炎病毒顆粒三維結構[N];中國醫(yī)藥報;2009年

6 程守勤;戊肝病毒摩洛哥亞型[N];大眾衛(wèi)生報;2002年

7 本報記者 賀延芳;志存高遠 腳踏實地[N];中國知識產(chǎn)權報;2013年

相關博士學位論文 前10條

1 王敏;基因3型戊型肝炎病毒ORF3蛋白對NF-κB通路調控作用的研究[D];華中科技大學;2018年

2 雷青松;戊型肝炎病毒開放讀碼框3蛋白在HEV免疫逃逸中的作用及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2018年

3 趙宇軍;豬戊型肝炎病毒結構蛋白基因表達及其基因特異性噬菌體展示肽庫構建[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2005年

4 顧穎;戊型肝炎病毒中和表位研究[D];廈門大學;2006年

5 朱光澤;戊型肝炎流行病學和戊型肝炎病毒全基因克隆與表達研究[D];吉林大學;2007年

6 屈勇剛;戊型肝炎病毒流行病學及其感染機理探索研究[D];吉林大學;2008年

7 趙欽;國內(nèi)禽戊型肝炎病毒的分離鑒定及其抗原性的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2011年

8 章述軍;武漢地區(qū)戊型肝炎的流行病學研究[D];華中科技大學;2010年

9 馬紅霞;戊型肝炎病毒ORF2和ORF3多肽的抗原性及ORF3多肽的免疫原性研究[D];吉林大學;2009年

10 李丹丹;豬戊型肝炎病毒V1蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2008年

相關碩士學位論文 前10條

1 龍飛燕;鋅指抗病毒蛋白ZAP對戊型肝炎病毒復制的影響[D];昆明理工大學;2017年

2 白怡霖;豬戊型肝炎病毒血清抗體間接ELISA檢測方法的建立與應用[D];西北農(nóng)林科技大學;2018年

3 拓曉玲;陜西楊凌蛋雞場禽戊型肝炎病毒流行情況調查[D];西北農(nóng)林科技大學;2016年

4 劉啟文;豬戊型肝炎病毒表位的篩選及間接ELISA方法的建立[D];上海師范大學;2011年

5 張厚勇;豬戊型肝炎病毒的分子流行病學調查及ORF2區(qū)的克隆和表達[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2010年

6 房健;禽戊型肝炎病毒的鑒定及其致病性研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2016年

7 劉濤;基于Ⅳ型豬戊型肝炎病毒重組ORF3蛋白的表達、純化及初步應用研究[D];海南大學;2010年

8 閆蕾;豬戊型肝炎病毒熒光定量PCR檢測方法的建立及鹽城地區(qū)流行病學調查[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學;2016年

9 張序;豬戊型肝炎病毒RT-nPCR方法的建立及SHEV-JX株的分離[D];江西農(nóng)業(yè)大學;2011年

10 于敏;戊型肝炎病毒ORF2基因分段克隆與序列分析[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2004年

本文編號：2724844