【摘要】：背景:胸腔積液(PE)是一種非常常見的疾病,由于其病因多而復(fù)雜,發(fā)病機(jī)制各不相同,確診常常需要侵入性手段。已有文獻(xiàn)報(bào)道,結(jié)核性胸膜炎與惡性胸腔積液表現(xiàn)均以淋巴細(xì)胞為主,常規(guī)及生化結(jié)果常相似。鑒于結(jié)核性胸腔積液(TPE)和惡性胸腔積液(MPE)兩種疾病的治療方案及預(yù)后均存在非常大差異,早期鑒別診斷顯得尤為重要。但使用現(xiàn)有的各種生化指標(biāo),如ADA指標(biāo)水平、胸腔積液生化、腫瘤標(biāo)志物等單用于結(jié)核性胸膜炎與惡性胸腔積液鑒別診斷效能是有限的。因此,本研究中,我們探索一種聯(lián)合診斷方法僅通過僅收集胸腔積液而無需有創(chuàng)組織學(xué)檢查就能夠容易地區(qū)分這兩種疾病的方法。目的:探討評(píng)估結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白γ干擾素釋放試驗(yàn)(Interferon gamma Release Assay,IGRA)酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(Enzyme-linked immunospot detection technology;ELISPOT)檢測(cè)技術(shù),胸腔積液常規(guī)實(shí)驗(yàn)室生物標(biāo)志物、腫瘤標(biāo)志物CEA在結(jié)核性胸膜炎和惡性胸腔積液診斷中的表現(xiàn);評(píng)估IFN-γ-ELISPOT檢測(cè)和常規(guī)實(shí)驗(yàn)室生物標(biāo)志物中腺苷脫氨酶(Adenosine deaminase,ADA)、癌胚抗原(carcinoma-embryonic antigen,CEA)在結(jié)核性胸膜炎(tuberculous pleurisy,TPE)和癌性胸腔積液(malignant pleural effusion,MPE)鑒別診斷中的表現(xiàn);多參數(shù)優(yōu)化結(jié)核性胸腔積液與惡性胸腔積液之間的鑒別診斷能力。方法:對(duì)2010年1月至2016年12月深圳市第三人民醫(yī)院住院的胸腔積液患者201例進(jìn)行分析(確診為結(jié)核性胸膜炎的患者共143例;確診為惡性胸腔積液的患者58例)。檢測(cè)患者的血及胸腔積液標(biāo)本結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白的Y干擾素水平,并與胸腔積液生化,ADA、CEA檢測(cè)結(jié)果一起分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,最終進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)ROC分析以獲得胸腔積液ADA、CEA檢測(cè)結(jié)核性胸膜炎的最佳截?cái)嘀怠＝Y(jié)果:(1)本次分析結(jié)果提示,惡性胸腔積液患者胸腔積液CEA值明顯高于結(jié)核性胸膜炎CEA值,ROC曲線分析曲線下面積(AUC)為0.9713,用于診斷惡性胸腔積液準(zhǔn)確性高;本研究統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析以CEA cut-off值為2.025ng/L,CEA檢測(cè)胸腔積液用于鑒別診斷惡性胸膜炎的敏感度和特異度最佳。(2)結(jié)核性胸腔積液組患者胸腔積液中ADA值明顯高于檢測(cè)到的惡性胸腔積液組ADA值,差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;以ADA cut-off值為35U/L,用于胸腔積液鑒別診斷結(jié)核性胸膜炎的敏感度和特異度高;其中ROC分析AUC曲線下面積為0.9585,提示檢測(cè)胸腔積液中的ADA是診斷結(jié)核性胸膜炎的一項(xiàng)敏感診斷指標(biāo)。(3)結(jié)核性胸腔積液組患者胸腔積液中檢測(cè)到的血及胸腔積液用ESAT-6蛋白和peptid-pool肽刺激的IFN-Y-ELispot值均明顯高于惡性胸腔積液組;差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。用ESAT-6蛋白和peptid-pool肽刺激的PFMC中抗原特異性IFN-Y斑點(diǎn)形成細(xì)胞(SFC)的值約2-4倍于來自同一TPE患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC);(ROC)分析證明胸腔積液單核細(xì)胞(Pleural effusion mononucleus,PFMC)ELISPOT測(cè)定法在曲線下的面積(AUC)高于PBMC ELISPOT測(cè)定法;均提示與PBMC ELISPOT測(cè)定相比,使用PFMC ELISPOT診斷結(jié)核性胸膜炎診斷效能更高。(4)聯(lián)合ELISPOT試驗(yàn)與ADA診斷結(jié)核性胸膜炎特異性由28.1%明顯增加了特異性至98.5%,并且PPV同時(shí)增加至98.3%,有明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同樣,胸腔積液IFN-γ-ELispot聯(lián)合CEA診斷MPE的特異性,PPV也優(yōu)于非聯(lián)合診斷,但敏感性稍低(87.1%比99.3%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義),意味著結(jié)核性胸膜炎與惡性胸腔積液鑒別診斷時(shí),使用IFN-γ-ELispot與ADA、CEA聯(lián)合診斷,可明顯提高診斷效能。(5)我們將結(jié)核性胸膜炎患者通過胸腔鏡檢查鏡下所示,將患者進(jìn)一步分組,分為胸膜黏連組31例與無黏連組16例,對(duì)比其胸腔積液中生化指標(biāo),發(fā)現(xiàn)胸膜黏連組患者ADA值及LHD值均高于胸膜無黏連組患者指標(biāo),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:(1)診斷結(jié)核性胸膜炎,使用胸腔積液IFN-γ-ELispot檢查較外周血IFN-γ-ELispot有優(yōu)勢(shì);(2)在結(jié)核性胸膜炎的診斷中,胸腔積液ADA、結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白的IFN-γ-ELispot值的診斷效能高,具有高特異性、高敏感性;在惡性胸腔積液診斷中,胸腔積液CEA值具有特異性高的特點(diǎn);(3)聯(lián)合各生化指標(biāo)用于結(jié)核性胸膜炎與惡性胸腔積液鑒別診斷可提高鑒別診斷陽性率;將胸腔積液IFN-γ-ELispot、ADA值聯(lián)合起來用于不明原因胸腔積液診斷可明顯提高結(jié)核性胸膜炎診斷陽性率;將胸腔積液IGRA、ADA、CEA值聯(lián)合起來用于結(jié)核性胸膜炎與惡性胸腔積液鑒別診斷,其診斷敏感性、特異性高。(4)ADA值和LDH值在結(jié)核性胸膜炎胸膜增厚患者中明顯異常升高,可用于判斷結(jié)核性胸膜炎胸膜增厚嚴(yán)重程度;胸腔積液IFN-γ-ELispot結(jié)果穩(wěn)定,不受胸膜黏連增厚程度影響。
【圖文】：

A ESAT-6 B Peptide圖 2 所示，MTB 感染在感染部位引起更強(qiáng)的 IFN-γ反應(yīng)。我們用 ESAT-6 蛋白（a）和肽（b）刺激 TPE（n=143）患者的配對(duì) PBMCs 和 PFMCs，用 elispot 測(cè)定MTB 特異性 IFN-γ反應(yīng)，我們使用配對(duì) t 檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異。2.3 評(píng)估胸腔積液生物標(biāo)志物。在評(píng)估 TPE 和 MPE 鑒定的分析潛力時(shí)，我們將結(jié)核性胸膜炎與惡性胸腔積液的外周血生化指標(biāo)及胸腔積液生物標(biāo)志物數(shù)據(jù)做比較分析。如表 2 所示，兩種疾病類型的胸腔積液中 LDH，單核細(xì)胞比例, TP 和 GLU 對(duì)比沒有差異，而外周血中的紅細(xì)胞沉降率（ESR），C 反應(yīng)蛋白（ CRP）和胸腔積液中白細(xì)胞計(jì)數(shù)（ WCC ）均表現(xiàn)出結(jié)核性胸膜炎和惡性胸腔積液類別之間存在顯著性差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能有助于區(qū)分 TPE 和 MPE 患者。然而，ROC 曲線分析

胸膜 ADA 和 CEA 水平有助于鑒別 TPE 和 MPE。圖 3A 對(duì) TPE（n=143）患者胸腔積液進(jìn)行離心分離后，分離上清液，用過氧化物酶法測(cè)采用直接化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定胸腔積液上清液中癌胚抗原的含量 檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)分析。采用圖 C，D ROC 分析法評(píng)價(jià) ADA（C）和 CEA（PE 的識(shí)別能力。ADA、CEA、IFN-γ-ELispot 三者兩兩聯(lián)合對(duì)照分能在臨床實(shí)踐中，為了提高鑒別診斷的準(zhǔn)確性，避免任何誤診，必，而不是使用任何一種方法。為了提高檢測(cè)的特異性，，需要將幾合起來，我們研究了胸膜 IGRA、ADA、CEA 的診斷價(jià)值及其綜E 和 MPE 的鑒別診斷價(jià)值（如表格 3 所示）。雖然 IGRA、AD
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R521.7;R730.4

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本文編號(hào)：2666446