本文關(guān)鍵詞：干擾素-γ釋放方法評(píng)價(jià)成人VZV特異性細(xì)胞免疫效果，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：水痘-帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)是水痘和帶狀皰疹的致病病原體,在兒童初次感染引起水痘,恢復(fù)后病毒潛伏在體內(nèi),少數(shù)病人在成人后病毒再激活而引起帶狀皰疹。目前我國(guó)水痘的真實(shí)發(fā)病率很高,是突發(fā)公共衛(wèi)生事件的主要原因之一。帶狀皰疹的發(fā)生與VZV特異性細(xì)胞免疫水平密切相關(guān),當(dāng)免疫水平下降時(shí),VZV被激活而發(fā)生帶狀皰疹。目前針對(duì)水痘和帶狀皰疹的治療均無法完全清除體內(nèi)病毒,而疫苗的接種可以有效的預(yù)防這兩種疾病。隨著水痘疫苗接種人數(shù)的增多和帶狀皰疹疫苗的推廣應(yīng)用,迫切需要建立一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的方法評(píng)價(jià)疫苗的細(xì)胞免疫效果,評(píng)價(jià)成人的VZV特異性CMI,判斷其是否為易感人群,是否需接種疫苗預(yù)防帶狀皰疹。目前免疫學(xué)中檢測(cè)VZV特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答的方法主要有細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色法、皮膚試驗(yàn)、IFN-γ Eli spot和IFN-γ釋放試驗(yàn),前三者分別存在靈敏度低、實(shí)驗(yàn)室無法實(shí)施和操作繁瑣等缺點(diǎn),而且都不能定量。近年發(fā)展的基于ELISA的IFN-γ釋放試驗(yàn)正逐漸被認(rèn)可,已應(yīng)用于TB/LTB的診斷并且有相關(guān)商品化試劑盒批準(zhǔn)上市,在HCMV和VZV CMI檢測(cè)上的應(yīng)用也有諸多報(bào)道�；谝陨涎芯�,本論文應(yīng)用這一新的IFN-γ釋放試驗(yàn)評(píng)價(jià)成人的VZV特異性CMI,考察研究對(duì)象接種水痘疫苗后細(xì)胞免疫應(yīng)答水平的變化。在本研究中,我們首先優(yōu)化IFN-γ釋放試驗(yàn)條件,確定了刺激抗原的處理方式、抗原加入量、全血與抗原共孵育的最佳時(shí)間、全血穩(wěn)定性等,確定試驗(yàn)的最佳條件。然后隨機(jī)選擇12名成人作為研究對(duì)象,在接種前采集全血用于ELISA試驗(yàn)檢測(cè)其中IFN-γ釋放水平,考察未知人群針對(duì)VZV的CMI水平。每人接種水痘減毒活疫苗一支,21天后采集全血檢測(cè)IFN-γ釋放水平,與接種前水平進(jìn)行比較,觀察個(gè)體接種疫苗后CMI水平的變化。本研究試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),(1)刺激抗原的處理方式、抗原加入量、全血與抗原共孵育的最佳時(shí)間、全血穩(wěn)定性等均對(duì)干擾素-γ釋放有影響,紫外滅活的水痘抗原刺激效果較好,全血與抗原共孵育48h左右較為合適,全血樣本應(yīng)盡快進(jìn)行孵育試驗(yàn)；(2)12名研究對(duì)象接種水痘減毒活疫苗前全血中干擾素-γ釋放水平存在差異,接種疫苗后均有不同程度提高,干擾素-γ釋放水平幾何平均值(GMT)接種前后分別為6.13pg/ml和234.75pg/ml。由于年齡、性別以及身體狀況等不同,增長(zhǎng)的倍數(shù)和數(shù)值在個(gè)體間均存在較大差異。(3)由于樣本量有限,無法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,難以確定高危人群干擾素-γ釋放水平閡值,接下來將擴(kuò)大樣本量進(jìn)行研究,確定水痘-帶狀皰疹易感人群的干擾素-γ釋放水平范圍,期望應(yīng)用該法指導(dǎo)帶狀皰疹臨床研究中高危人群的篩選。
【關(guān)鍵詞】：水痘帶狀皰疹病毒 細(xì)胞免疫 干擾素-γ釋放試驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R752.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一章 前言11-23
• 1.1 研究背景介紹11-14
• 1.1.1 VZV相關(guān)疾病11-12
• 1.1.2 水痘和帶狀皰疹的發(fā)病機(jī)制和傳播途徑12-13
• 1.1.3 水痘和帶狀皰疹的流行情況13-14
• 1.2 水痘-帶狀皰疹病毒14-16
• 1.3 水痘和帶狀皰疹的防治16-18
• 1.3.1 水痘和帶狀皰疹的預(yù)防和治療16-17
• 1.3.2 水痘疫苗及帶狀皰疹疫苗17-18
• 1.4 水痘疫苗和帶狀皰疹疫苗免疫效果評(píng)價(jià)18-23
• 1.4.1 體液免疫效果評(píng)價(jià)18-19
• 1.4.2 細(xì)胞免疫效果評(píng)價(jià)19-23
• 本論文研究目的、思路和方法23-24
• 第二章 材料與方法24-32
• 2.1 主要試驗(yàn)材料、儀器設(shè)備、耗材24-26
• 2.1.1 材料24
• 2.1.2 主要試劑24
• 2.1.3 主要溶液及其配制24-25
• 2.1.4 主要儀器設(shè)備25-26
• 2.1.5 主用耗材26
• 2.2 試驗(yàn)方法26-32
• 2.2.1 VZV刺激抗原的制備26-27
• 2.2.2 新鮮全血的采集27
• 2.2.3 全血與刺激抗原共孵育27
• 2.2.4 hIFN-γ ELISA試驗(yàn)27-28
• 2.2.5 比較不同方式制備的抗原的刺激效果28-29
• 2.2.6 VZV抗原中其他成分對(duì)IFN-γ釋放的影響29
• 2.2.7 不同孵育時(shí)間對(duì)IFN-γ釋放的影響29-30
• 2.2.8 不同抗原量對(duì)IFN-γ釋放的影響30
• 2.2.9 全血放置時(shí)間對(duì)IFN-γ釋放的影響30
• 2.2.10 觀察個(gè)體接種水痘疫苗前后IFN-γ釋放水平的變化30-31
• 2.2.11 結(jié)果統(tǒng)計(jì)和分析31-32
• 第三章 結(jié)果與討論32-40
• 3.1 不同方式制備的抗原的刺激效果比較32
• 3.2 VZV抗原中其他成分對(duì)IFN-γ釋放的影響32-33
• 3.3 不同孵育時(shí)間對(duì)IFN-γ釋放的影響33-34
• 3.4 不同抗原量對(duì)IFN-γ釋放的影響34-35
• 3.5 全血穩(wěn)定性35-36
• 3.6 觀察個(gè)體接種水痘疫苗前后IFN-γ釋放水平的變化36-37
• 3.7 討論37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 致謝46

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫兆增;李愛學(xué);孔德強(qiáng);趙爽;趙彥斌;劉冰;時(shí)彥勝;曾林;;印度尼西亞源食蟹猴干擾素-γ基因的克隆和序列分析[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2010年10期

2 張耀東,張麗華,耿信篤;人干擾素-γ基因工程大腸桿菌的培養(yǎng)及其產(chǎn)物的純化與復(fù)性[J];生物工程學(xué)報(bào);1999年02期

3 施煥中,鐘小定,許輝,龍學(xué)明,陳一強(qiáng),李超乾;干擾素-γ對(duì)抗原引起氣道嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的影響[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1997年01期

4 張曉軍,何韶衡;老年慢性阻塞性肺疾病患者血漿白細(xì)胞介素與干擾素-γ水平的相關(guān)性[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年18期

5 胡成君;;氨溴索聯(lián)合干擾素-γ霧化吸入治療慢性支氣管炎急性發(fā)作的療效觀察[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2011年20期

6 孫亞萍;王英明;喬守怡;;干擾素及其最新研究進(jìn)展[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2006年07期

7 李麗麗;顧玉海;;干擾素-γ在結(jié)核性滲出性胸膜炎診斷中的價(jià)值[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2013年11期

8 韓延華;辛雪艷;;消抗靈Ⅱ號(hào)對(duì)小鼠解脲支原體感染及感染后血清中干擾素-γ的影響[J];世界中西醫(yī)結(jié)合雜志;2008年02期

9 楊生海;殷宏;劉永生;張杰;;干擾素-γ研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通報(bào);2010年08期

10 徐淑鳳;慢性阻塞性肺疾病與白介素-4、8和干擾素-γ的關(guān)系[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(呼吸系統(tǒng)分冊(cè));2003年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 袁紅;張振文;鄭春秀;梁立武;王向黨;王梅康;劉平;李春雷;白麗敏;;電針對(duì)帕金森病干擾素-γ、腫瘤壞死因子-α和白介素-1β影響[A];中醫(yī)藥中青年科技創(chuàng)新與成果展示論壇論文集[C];2009年

2 袁紅;張振文;鄭春秀;梁立武;王向黨;王梅康;劉平;李春雷;白麗敏;;電針對(duì)帕金森病干擾素-γ、腫瘤壞死因子-α和白介素-1β影響[A];自主創(chuàng)新與持續(xù)增長(zhǎng)第十一屆中國(guó)科協(xié)年會(huì)論文集（3）[C];2009年

3 王亞賢;王惠國(guó);王麗;王玉璽;;祛毒膠囊對(duì)狼瘡樣小鼠外周血白細(xì)胞介素-6、干擾素-γ和腫瘤壞死因子-α的影響[A];全國(guó)中醫(yī)藥創(chuàng)新與發(fā)展研討會(huì)專輯[C];2005年

4 靳挺;關(guān)怡新;姚善涇;;尿素梯度離子交換層析法復(fù)性重組人干擾素-γ[A];第一屆全國(guó)化學(xué)工程與生物化工年會(huì)論文摘要集(下)[C];2004年

5 劉建;常維山;崔廣林;馮宇;;干擾素在肉雞生產(chǎn)上的應(yīng)用[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

6 田婷;范衛(wèi)新;;干擾素-γ誘導(dǎo)小鼠斑禿模型的建立[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

7 鄧進(jìn);姜華;李鵬;;創(chuàng)傷患者血槳內(nèi)毒素與干擾素-γ、白細(xì)胞介素的變化及意義[A];第十一次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

8 車向前;林育紅;;慢性阻塞性肺疾病患者血清干擾素-γ、腫瘤壞死因子-α和內(nèi)皮素-1水平與肺功能關(guān)系的臨床研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2013第十四次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

9 周廣宇;畢黎琦;;狼瘡模型鼠CD4~+T細(xì)胞干擾素-γ和白細(xì)胞介素-4的表達(dá)[A];第十屆全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 靳挺;基因工程藥物人干擾素-γ體外重折疊復(fù)性研究[D];浙江大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 仇婧;貓α和ω干擾素的原核表達(dá)及抗病毒活性測(cè)定[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 孫琦;干擾素-γ釋放方法評(píng)價(jià)成人VZV特異性細(xì)胞免疫效果[D];吉林大學(xué);2016年

3 辛雪艷;消抗靈Ⅱ號(hào)對(duì)小鼠解脲支原體感染及感染后血清干擾素-γ的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2008年

4 董尼娜;干擾素-γ聯(lián)合曲安奈德防治兔增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2014年

5 張利強(qiáng);創(chuàng)傷后干擾素-γ、白介素-6動(dòng)態(tài)變化及意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

6 陳幸德;豬干擾素-γ基因的克隆及其表達(dá)[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

7 潘曉梅;豬干擾素-γ的表達(dá)、純化及生物學(xué)活性研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 劉建;干擾素作為免疫調(diào)節(jié)劑在商品肉雞上的應(yīng)用研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

9 王麗;祛毒膠囊對(duì)狼瘡樣小鼠外周血白細(xì)胞介素-6和干擾素-γ的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

10 李瑩瑩;犬用干擾素的制備方法研究及質(zhì)量體系建立[D];長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：干擾素-γ釋放方法評(píng)價(jià)成人VZV特異性細(xì)胞免疫效果，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：265960