【摘要】：目的探討誘導(dǎo)痰上清液和血液中1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucan,BG)、Ⅱ型肺泡細胞表面抗原(krebs von den lungen-6,KL-6)、BG/KL-6、白細胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白細胞介素-4(interleukin-4,IL-4)對艾滋病(AIDS)相關(guān)肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia,PCP)的臨床診斷價值,確定相對合適的診斷界值,并初步了解BG、KL-6動態(tài)變化與AIDS相關(guān)PCP臨床療效的相關(guān)性。方法1.納入杭州市西溪醫(yī)院2016年6月~2017年7月住院的AIDS合并PCP確診患者(經(jīng)病原學(xué)染色和/或分子生物學(xué)等方法結(jié)合臨床表現(xiàn)確診)27例,疑診患者(僅有臨床表現(xiàn))14例,定植患者(僅分子生物學(xué)方法表現(xiàn)陽性)8例,無PCP的AIDS患者20例作為研究對象。其中經(jīng)綜合治療后有AIDS合并PCP確診患者22例,疑診患者5例,定植患者6例。分別留取患者入院時、治療7天后的誘導(dǎo)痰標(biāo)本及血標(biāo)本。采用動態(tài)濁度法檢測各組誘導(dǎo)痰上清液、血漿中BG含量,ELISA方法測定KL-6、IL-8、IL-6、TNF-α、IL-4含量。同時搜集并分析患者基線資料及實驗室指標(biāo),如性別、年齡、基礎(chǔ)疾病、CD4+T、LDH、CRP、PCT、Pa O2、白細胞計數(shù)、HIV-1病毒載量、胸部影像學(xué)檢查、治療情況等。2.分別將各組痰上清液及血液中BG、KL-6、BG/KL-6、IL-8、IL-6、TNF-α和IL-4與耶氏肺孢子菌(pneumocystis jeroveci,PJ)檢測情況和患者臨床表現(xiàn)進行對比,綜合分析BG、KL-6敏感度、特異度,確定相對合適的診斷界值,探索BG聯(lián)合KL-6檢測在AIDS合并PCP診斷中的應(yīng)用價值。3.比較治療前后患者痰上清液、血液中BG、KL-6的動態(tài)變化,并與PJ檢測情況及臨床療效情況對比,探討其對PCP治療效果的評估價值。4.采用SPSS19.0統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計分析處理。結(jié)果1.AIDS合并PCP患者治療前誘導(dǎo)痰上清液中確診組BG濃度高于疑診組、定植組和對照組,其中確診組和定植組、確診組和對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.032,P=0.008);痰上清中KL-6濃度為確診組疑診組定植組對照組,其中確診組和對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.035);4組痰上清中IL-8、IL-6、TNF-α、IL-4、BG/KL-6比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.AIDS合并PCP患者治療前血漿確診組BG濃度高于疑診組、定植組和對照組,其中確診組和對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000);血清KL-6濃度確診組疑診組對照組定植組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.045);4組血清中IL-8、IL-6、TNF-α、IL-4、BG/KL-6比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.痰上清、血漿BG診斷AIDS合并PCP的曲線下面積(AUC)為0.729(95%CI 0.582~0.876,P=0.009)、0.756(95%CI 0.592~0.919,P=0.008),最佳臨界值為17.55 pg/m L、4.20 pg/m L,敏感度(Se)為52.0%、66.7%,特異度(Sp)為90.0%、86.7%,陽性預(yù)測值(PPV)為86.7%、89.9%,陰性預(yù)測值(NPV)為60.0%、61.9%。痰上清和血清KL-6診斷AIDS合并PCP的AUC為0.735(95%CI 0.585~0.885,P=0.007)、0.625(95%CI 0.443~0.807,P=0.194),最佳臨界值為120.65 U/m L、139.89 U/m L,Se、Sp、PPV、NPV分別為56.0%和66.7%,85.0%和62.5%,82.4%和72.7%,60.7%和52.9%。痰上清和血液BG聯(lián)合KL-6診斷AIDS合并PCP時AUC為0.810(95%CI 0.686~0.934,P=0.000)、0.411(95%CI 0.224~0.599,P=0.356),Se、Sp、PPV、NPV分別為76.0%和45.8%,75.0%和60.0%,79.2%和64.7%,71.4%和40.9%。4.治療7天后,痰上清確診組BG下降比率為74.80%,治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004);疑診組和定植組BG無變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。痰上清KL-6確診組、疑診組和定植組下降比率分別為85.30%、17.60%和44.80%,其中確診組治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000),疑診組和定植組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。血漿BG確診組、定植組治療7天后下降比率分別為64.80%、8.60%,疑診組水平不變,其中確診組治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003),疑診組和定植組前后差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。血清KL-6確診組、疑診組和定植組下降比率分別為13.50%、15.10%和15.80%,各組前后差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.誘導(dǎo)痰上清液中BG、KL-6及血漿BG可用以輔助診斷AIDS合并PCP,其中痰上清BG可以區(qū)分PCP確診和PJ定植。2.痰上清中BG聯(lián)合KL-6診斷AIDS合并PCP效果優(yōu)于單獨BG或KL-6。3.PCP確診患者痰上清中BG、KL-6及血漿BG均能反映病情變化。
【圖文】：

肺孢子菌六甲基四胺銀染色（1000×）

圖 1 肺孢子菌六甲基四胺銀染色（1000×）2. pAZ102 基因擴增部分 pAZ102 基因 PCR 擴增電泳結(jié)果如圖 2 所示，，陽性樣品在 500 bp 左右有目的條帶，陰性樣品及對照未見任何 DNA 條帶。
【學(xué)位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R512.91;R563.1

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1 胡e

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