【摘要】:目的對2016~2018年寧夏地區(qū)的腹瀉病例開展監(jiān)測,了解本地區(qū)病毒性腹瀉的病原譜構成及其流行特征,為病毒性腹瀉的預防和控制提供數據基礎和理論依據。對諾如病毒進行分子流行病學研究,通過同源性和系統(tǒng)進化分析、重組分析來揭示寧夏地區(qū)諾如病毒的基因特征和分布特點,了解該病毒的傳播方式和變異規(guī)律,及時發(fā)現主要的流行株、變異株。方法1.按照納入標準和排除標準收集2016.01~2018.12期間在寧夏10家哨點醫(yī)院就診的腹瀉病例標本,同時采集病例信息(包括年齡、性別、發(fā)病時間等)。提取腹瀉標本核酸,通過實時熒光定量PCR(Real-time PCR)同時檢測RV、NoV、SaV、AstV、EAdV。結合病例信息,利用SPSS22.0、SAS軟件統(tǒng)計分析相關指標。2.對GII陽性標本的聚合酶區(qū)和衣殼蛋白區(qū)部分序列進行擴增和測序,用Mega-X軟件構建系統(tǒng)進化樹,并結合諾如病毒分型網站(http://www.rivm.nl/mpf/NoV/typingtool)綜合鑒定基因型別。對兩區(qū)型別不一致的毒株擴增包含ORF1/ORF2重疊區(qū)在內的長片段,用Simplot和RDP4軟件進行重組分析,并分析其分子流行病學特征。結果1.病毒性腹瀉監(jiān)測情況1.1腹瀉病毒檢出情況:2016~2018年寧夏地區(qū)病毒性腹瀉總陽性率為33.00%,HuCV陽性率最高為17.67%,其中GII、SaV和GI組NoV陽性率分別為14.66%、3.07%和0.61%;其次為RV、AstV和EAdV,陽性率分別為14.17%、5.29%和3.59%。1.2病原譜及混合感染:GII和RV是病毒性腹瀉的主要病原體,分別占28.83%、28.75%,其次為混合感染、AstV、SaV、EAdV和GI,分別為21.38%、7.54%、6.13%、6.13%和1.23%。合并感染分為三種,兩種病毒的混合感染共12種203例,以GII合并RV為主;三種病毒的合并感染共9種36例,以GII、RV、AstV的混合感染為主;四種病毒的合并感染共2種5例,以GII、RV、AstV、EAdV的混合感染為主。1.3時間分布:冬季陽性率最高為54.38%,其次為秋季、春季和夏季,陽性率分別為35.33%、32.05%和25.40%(?~2=126.355,P0.001)。寧夏RV、NoV、AstV呈明顯的冬季高發(fā),夏季低發(fā)特點,SaV與之相反,EAdV夏秋季高發(fā)。1.4地區(qū)分布:固原市病毒陽性率最高為44.15%,其次為石嘴山市、吳忠市、中衛(wèi)市和銀川市,陽性率分別為33.96%、31.44%、28.26%和24.76%;不同地區(qū)5種病毒陽性率差異均具有統(tǒng)計學意義,固原市RV、AstV、NoV、EAdV的陽性率均位于全區(qū)第一,SaV在石嘴山市陽性率最高。1.5人群分布:男性陽性率略高于女性(?~2=4.648,P=0.031);0~年齡組陽性率最高為41.10%,50~年齡組陽性率最低為22.09%(?~2=125.367,P0.001);散居兒童陽性率最高為39.88%,家務及待業(yè)陽性率最低為16.51%(?~2=94.058,P0.001)。2.GII組NoV基因分型及重組2.1基因分型:聚合酶區(qū)有5種基因型,GII.Pe、GII.P12、GII.P16、GII.P17和GII.P7;衣殼蛋白區(qū)有6種基因型,GII.4 Sydney_2012、GII.3、GII.2、GII.1、GII.6、GII.17。2.2重組:首次在寧夏發(fā)現12種重組類型:GII.Pe/GII.4 Sydney_2012(39.77%)、GII.P12/GII.3(30.68%)、GII.P16/GII.2(12.50%)、GII.P17/GII.17(3.41%)、GII.P7/GII.6(3.41%)、GII.P16/GII.1(2.27%)、GII.P16/GII.4 Sydney_2012(2.27%)、GII.P17/GII.4Sydney_2012(1.14%)、GII.P12/GII.2(1.14%)、GII.Pe/GII.1(1.14%)、GII.Pe/GII.2(1.14%)、GII.Pe/GII.3(1.14%)。共檢出32株重組株,為GII.Pe/GII.4 Sydney_2012、GII.P16/GII.2、GII.P16/GII.1、GII.P7/GII.6、GII.P12/GII.3型重組株,重組位點均位于ORF1區(qū),在5009bp~5079bp之間。結論1.GII和RV是寧夏病毒性腹瀉的主要病原體,其次為混合感染,混合感染又分兩種、三種、四種病毒的混合感染,主要為GII合并RV(/合并其他病毒)感染為主;寧夏RV、NoV、AstV呈明顯的冬季高發(fā),夏季低發(fā)特點,SaV與之相反,EAdV夏秋季高;.需重點關注固原市RV、AstV、NoV、EAdV及石嘴山市SaV流行情況;0~和70~年齡組為病毒性腹瀉高危人群。2.寧夏GII組NoV多為重組株,首次在該地發(fā)現12種重組類型并檢出GII.Pe/GII.4Sydney_2012、GII.P16/GII.2、GII.P16/GII.1、GII.P7/GII.6、GII.P12/GII.3型重組株,均為型間重組。GII.Pe/GII.4Sydney_2012和GII.P12/GII.3為寧夏流行株且在該地持續(xù)存在,提示應警惕GII.P16重組株未來在該地流行的可能。
【圖文】:
146 種病毒不同月份陽性率分布顯示(見圖 3),RV、GII 組 NoV、AstV 12 月份陽性率最高,RV 和 GII 組 NoV 從 11 月份至次年 3 月份陽性率維持在比較高的水平,AstV

Simplot分析2016-2017年寧夏GⅡ組NoV重組類型
【學位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R512.5;R181.3
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本文編號:2599641
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