【摘要】：研究背景乙肝病毒(HBV)感染是威脅人類健康的最嚴(yán)重的疾病之一。大量研究表明,在慢性HBV(CHB)感染過程中,機(jī)體固有免疫和獲得性免疫應(yīng)答不足是造成HBV持續(xù)感染、肝臟損傷加重,乃至HBV慢性化和遷延不愈的重要原因,并且HBV感染可引起免疫細(xì)胞的功能發(fā)生改變。NK細(xì)胞是天然免疫系統(tǒng)中的重要效應(yīng)細(xì)胞,在HBV感染早期可從外周募集至肝臟,進(jìn)而發(fā)揮抗病毒作用。但是,在慢性HBV感染中,NK細(xì)胞表現(xiàn)為功能抑制狀態(tài),比如細(xì)胞毒活性降低,抗病毒分子IFN-γ的分泌受阻等。盡管有學(xué)者將NK細(xì)胞功能受損的機(jī)制歸咎于其它免疫細(xì)胞(如Treg)和免疫負(fù)調(diào)因子(如TGF-β,IL-10)等的調(diào)節(jié)作用,但是其確切機(jī)制目前還不十分清楚,尚需進(jìn)一步研究。HBV病毒雖然是嗜肝DNA病毒,但也會侵犯肝臟之外的其它器官和組織,并引起相關(guān)部位的疾病。其中,外周血單個核細(xì)胞(PBMC)一直被認(rèn)為是HBV病毒的“肝外儲存庫”,這不僅是肝臟移植后感染HBV的重要原因,而且與隱性HBV感染、圍產(chǎn)期母嬰傳播、病情的輕重和反復(fù)相關(guān)。2006年有研究發(fā)現(xiàn),雖然樹突狀細(xì)胞(DC)不支持HBV病毒在其細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制,但是在乙肝患者的DC中檢測到了HBV基因成分。此后的研究也發(fā)現(xiàn),與HBV病毒顆�；蚩乖跤�,DC的表型和應(yīng)答能力顯著受到抑制。那么,在慢性HBV感染的病人中,HBV病毒成分能否通過某些途徑侵入外周血的NK細(xì)胞,以及NK細(xì)胞功能受損與HBV病毒是否有直接的關(guān)系,這些問題目前還未見研究報道。研究表明,HBV病毒成分(HBsAg、HBeAg、HBx、HBV聚合酶、DNA及其轉(zhuǎn)錄中間體等)可通過影響固有模式識別系統(tǒng)(如TLRs,RLRs),進(jìn)而影響肝細(xì)胞或者免疫細(xì)胞的應(yīng)答能力。例如,HBsAg能下調(diào)粒細(xì)胞／巨噬細(xì)胞中TLR2配體誘導(dǎo)的IL-12的表達(dá)。那么,NK細(xì)胞同樣表達(dá)大量的固有模式識別受體,HBV成分是否也會通過模式識別受體直接影響NK細(xì)胞的應(yīng)答能力,以及影響NK細(xì)胞重要的信號通路?另外,“胞外體(exosomes)"的研究近年來引起了病毒學(xué)界的關(guān)注,它可以介導(dǎo)某些病毒在細(xì)胞之間進(jìn)行傳遞。那么,胞外體(exosomes)能否介導(dǎo)HBV病毒侵入NK細(xì)胞?基于上述問題,我們開展了關(guān)于慢性HBV感染引起NK細(xì)胞功能受損的分子機(jī)制研究。研究目的論文首先利用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等手段,驗證了CHB患者外周血NK細(xì)胞中確實存在HBV病毒成分；然后,詳細(xì)分析了HBV病毒成分(HBV抗原、HBV基因)對NK細(xì)胞生物學(xué)活性和功能的影響,并探討了其發(fā)揮作用的分子機(jī)制；最后,從慢性HBV感染患者的血清中分離獲取了胞外體,并證實胞外體可將其攜帶的HBV病毒成分傳遞到NK細(xì)胞中,進(jìn)而影響NK細(xì)胞的功能。論文不僅為HBV存在肝外感染提供有利的證據(jù),還探討了HBV感染使NK細(xì)胞功能受損的分子機(jī)制和途徑。論文的研究結(jié)果擴(kuò)展了我們對HBV病毒干預(yù)免疫系統(tǒng)的認(rèn)識,還將為HBV診斷、治療和預(yù)防提供了新的切入點。研究方法1.我們首先從臨床收集了CHB患者的外周血,分離其外周血單個核細(xì)胞,并用磁珠分選了NK細(xì)胞。采用普通PCR,探針定量PCR以及ELISA方法進(jìn)一步驗證CHB患者的血清、PBMC以及外周血NK細(xì)胞中是否存在HBV病毒成分,包括HBV DNA(rcDNA和cccDNA)和蛋白成分(HBsAg和]HBeAg),通過透射電鏡觀察慢性HBV患者的外周血NK細(xì)胞中是否存在病毒顆粒。隨后,采用MTT法檢測臨床標(biāo)本的PBMC對人白血病細(xì)胞系K562的殺傷比率,并采用Spearman秩相關(guān)分析,分析了NK細(xì)胞殺傷比率與血清HBV載量、與PBMC中HBV載量、以及與血清中抗原含量之間的線性關(guān)系。采用ELISA方法檢測CHB患者血清中細(xì)胞因子TGF-β的含量。2.將表達(dá)HBV全基因組的載體以電穿孔的方法轉(zhuǎn)入NK細(xì)胞系NK-92,經(jīng)嘌呤霉素篩選建立穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,研究HBV基因?qū)K細(xì)胞的影響。此外,HBV抗原(HBsAg和HBeAg)與NK-92細(xì)胞共孵育,用于檢測HBV抗原對NK細(xì)胞的影響。與此同時,我們還收集了臨床樣本,將CHB患者的外周血NK細(xì)胞與NK-92細(xì)胞系的結(jié)果進(jìn)行對比分析。分別用MTT法和CFSE細(xì)胞增殖示蹤檢測試劑盒檢測了NK細(xì)胞的增殖能力,Annixin V/PI凋亡檢測試劑盒分析了HBV基因和抗原對NK細(xì)胞凋亡的影響,NK細(xì)胞周期則采用PI周期檢測試劑盒進(jìn)行測定。通過RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)的方法檢測NK細(xì)胞受體(NKG2D,NKG2A等),殺傷相關(guān)分子(IFN-γ,TNF-α等)和模式識別受體(TLR3,RIG-I)的基因和蛋白表達(dá)水平的變化。以肝癌細(xì)胞HepG2和白血病細(xì)胞K562為靶細(xì)胞,用CFSE/7AAD流式細(xì)胞術(shù)檢測NK細(xì)胞的殺傷水平。采用流式檢測術(shù)分析了代表NK細(xì)胞脫顆粒能力的CD107a分子的表達(dá)水平。通過Western blot和流式細(xì)胞術(shù)方法分析NK細(xì)胞信號傳遞的蛋白NF-kB (p65)、MAPK(ERK1/2, c-jun, JNK,p38)以及STATs信號通路的活化水平。3.我們分別利用胞外體提取試劑盒和超速離心的方法提取CHB患者血清中的胞外體。通過透射電鏡觀察胞外體的形態(tài)。采用普通PCR的方法,檢測胞外體中HBV基因成分,并采用ELISA方法檢測胞外體中HBsAg、HBeAg和HBsAb的含量。最后,我們將CHB血清來源的胞外體與健康志愿者的外周血NK細(xì)胞共孵育,進(jìn)而觀察HBV病毒成分能否進(jìn)入NK細(xì)胞,并采用流式檢測術(shù)檢測CHB血清來源的胞外體對NK細(xì)胞的脫顆粒水平CD107a和IFN-γ的分泌水平的影響。結(jié)果一、CHB患者外周血NK細(xì)胞功能受到顯著抑制1.CHB患者的外周血PBMC細(xì)胞殺傷功能抑制與健康志愿者相比,CHB患者來源的PBMC細(xì)胞殺傷效率明顯降低。與此同時,CHB患者血清中TGF-β含量明顯高于健康志愿者,說明慢性HBV感染患者的PBMC細(xì)胞活性與免疫負(fù)調(diào)因子TGF-p相關(guān)。2.CHB患者的外周血淋巴細(xì)胞亞群分布檢測PBMC的細(xì)胞分群發(fā)現(xiàn),CHB患者外周血中NK細(xì)胞和T細(xì)胞比例明顯下降,而NKT細(xì)胞比例沒有統(tǒng)計學(xué)差異。3.CHB外周血NK細(xì)胞的增殖與存活能力的變化利用磁珠分選柱(MASC)分選純化出NK細(xì)胞檢測其細(xì)胞生物學(xué)活性,包括增殖、周期和凋亡。與健康志愿者相比,CHB患者來源的NK細(xì)胞增殖水平明顯降低；NK細(xì)胞的S期比例升高,G2期比例降低；在血清饑餓培養(yǎng)的條件下,NK細(xì)胞凋亡水平明顯升高。說明在慢性HBV感染時,外周血NK細(xì)胞生物學(xué)活性發(fā)生了改變。4.CHB患者外周血NK細(xì)胞的功能受到抑制分離健康志愿者和CHB患者的PBMC,分析了CD56+CD3-NK細(xì)胞CD107a脫顆粒水平和分泌抗病毒分子IFN-y的能力。結(jié)果顯示,CHB患者NK細(xì)胞CD107a的表達(dá)水平和IFN-y的分泌水平均明顯低于健康志愿者。5.CHB患者外周血NK細(xì)胞的受體發(fā)生改變我們檢測了CHB患者外周血NK細(xì)胞的活化性受體NKG2D、NKp30、 NKp44、NKp46和2B4,以及抑制性受體NKG2A的變化。結(jié)果顯示,CHB來源的NK細(xì)胞中,活化性受體NKp30和2B4顯著性降低,其它活化性受體NKG2D、NKp44和NKp46以及抑制性受體NKG2A的表達(dá)在CHB患者和健康志愿者之間沒有明顯的差異性。二、CHB患者PBMC和外周血NK細(xì)胞中存在HBV病毒成分1.CHB患者PBMC細(xì)胞中存在HBV病毒成分提取CHB患者PBMC的基因組DNA,普通PCR擴(kuò)增HBV-rcDNA和HBV-cccDNA,結(jié)果證實CHB患者PBMC存在HBV DNA。探針PCR檢測CHB患者血清中的HBV的載量和PBMC中的HBV的載量,采用Spearman秩相關(guān)分析,發(fā)現(xiàn)兩者存在較好的正相關(guān)性(r=0.644,p0.01)。MTT法檢測CHB患者PBMC對K562細(xì)胞的殺傷率,并比較其和病毒載量之間的線性關(guān)系,結(jié)果顯示兩者之間存在較好的負(fù)相關(guān)性(r=-0.5868,p0.05)。此外,我們還分析了PBMC的殺傷率與血清抗原含量之間的線性關(guān)系,發(fā)現(xiàn)兩者之間并不存在線性關(guān)系。2.CHB患者外周血NK細(xì)胞中存在HBV病毒成分利用MACS分選CHB患者PBMC中的NK細(xì)胞,采用普通PCR和探針PCR方法檢測到CHB患者來源的NK細(xì)胞中存在HBV DNA,并且我們通過透射電鏡觀察到NK細(xì)胞的胞漿中存在HBV病毒的包涵體。三、HBV基因/抗原對NK細(xì)胞生物學(xué)功能的影響1.HBV基因?qū)K細(xì)胞生物學(xué)功能的影響1.1 HBV過表達(dá)細(xì)胞株的建立和鑒定我們通過電穿孔的方法將含GFP標(biāo)簽的對照質(zhì)粒LMP和HBV過表達(dá)質(zhì)粒LMP-HBV1.2轉(zhuǎn)入NK-92細(xì)胞系,篩選建立穩(wěn)定過表達(dá)細(xì)胞株,將其分別命名為NK-92-LMP和NK-92-HBV。PCR結(jié)果表明,NK-92-HBV細(xì)胞中可以檢測到HBV-rcDNA、HBx、HBs/p以及HBc基因,但是其培養(yǎng)上清和細(xì)胞裂解液中均未檢測到HBsAg和HBeAgo1.2 HBV基因?qū)K細(xì)胞生物學(xué)活性的影響與轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒組NK-92-LMP細(xì)胞相比,MTT法檢測到NK-92-HBV細(xì)胞的增殖率明顯降低,流式細(xì)胞術(shù)顯示NK-92-HBV細(xì)胞被阻滯在G1期。低濃度血清饑餓培養(yǎng)條件下,與NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞的凋亡比例明顯增加,說明HBV基因會影響NK細(xì)胞的存活和基礎(chǔ)代謝。1.3 HBV基因抑制NK-92細(xì)胞的殺傷活性與NK-92-LMP細(xì)胞相比,表達(dá)HBV的NK-92細(xì)胞對K562和HepG2細(xì)胞的殺傷能力顯著降低,反應(yīng)脫顆粒能力的CD107a陽性細(xì)胞比例也明顯下降,說明HBV的基因可影響NK細(xì)胞的殺傷功能。1.4 HBV基因抑制NK-92細(xì)胞的殺傷和炎癥相關(guān)分子的表達(dá)與NK-92-LMP細(xì)胞相比,PCR結(jié)果顯示,表達(dá)HBV的NK-92細(xì)胞,抗病毒分子IFN-γ和TNF-a以及殺傷相關(guān)分子perforin的轉(zhuǎn)錄水平均顯著降低；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果證實,NK-92-HBV細(xì)胞中IFN-γ和perforin的蛋白表達(dá)明顯受到抑制。1.5 HBV基因改變NK-92細(xì)胞受體的表達(dá)與空載體NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞中活化性受體NKp30、 NKp44和2B4受體的表達(dá)降低,NKG2D的變化無統(tǒng)計學(xué)差異；而抑制性性受體NKG2A表達(dá)顯著升高。2.HBV抗原對NK細(xì)胞生物學(xué)功能的影響2.1 HBsAg和HBeAg的濃度測定透射電鏡觀察HBV抗原(HBsAg和HBeAg)的形態(tài),采用ELISA試劑盒,對的濃度進(jìn)行測定。將HBsAg和HBeAg進(jìn)行倍比稀釋,稀釋至0.5 μg/mL備用。2.2 HBV抗原對NK細(xì)胞生物活性的影響將不同濃度的HBsAg和HBeAg (2μg/mL、4μg/mL和20 μg/mL)與NK-92細(xì)胞進(jìn)行共孵育,繼而檢測NK-92細(xì)胞的增殖、周期和凋亡。結(jié)果顯示,與BSA對照組相比,HBsAg和HBeAg對NK細(xì)胞的增殖和凋亡均無顯著性影響。但是,高濃度(20μg/mL)的HBsAg使NK-92細(xì)胞的S期比例略有上升,G2期比例略下降。這說明,與HBV基因的影響相比,HBV抗原對NK細(xì)胞的存活和基礎(chǔ)代謝的影響較弱。2.3 HBV抗原抑制NK-92細(xì)胞的殺傷活性與BSA對照組相比,HBsAg和HBeAg抗原孵育后的NK-92細(xì)胞對K562和HepG2細(xì)胞的殺傷能力顯著降低,反應(yīng)脫顆粒能力的CD107a陽性比例也明顯下降,說明HBsAg和HBeAg均可影響NK細(xì)胞的殺傷功能。2.4 HBV抗原對NK-92細(xì)胞的殺傷和炎癥相關(guān)分子的表達(dá)無顯著影響HBV抗原孵育NK-92細(xì)胞后,我們用流式細(xì)胞術(shù)檢測了其胞內(nèi)抗病毒分子IFN-y和TNF-a以及殺傷相關(guān)分子perforin和GramB的表達(dá)。結(jié)果顯示,與BSA組相比,經(jīng)抗原孵育的NK-92細(xì)胞分泌IFN-γ、TNF-α、perforin和GramB的能力沒有受到明顯的影響。2.5 HBV抗原改變NK-92細(xì)胞的受體的表達(dá)HBV抗原孵育NK-92細(xì)胞后,我們流式細(xì)胞術(shù)檢測了其表面活化性受體和抑制性受體的變化。結(jié)果顯示,HBV抗原孵育后,NK-92細(xì)胞活化性受體NKp30和NKp44陽性比例下降,2B4比例雖無顯著性差異,但其平均熒光強(qiáng)度顯著降低；而抑制性受體NKG2A的陽性比例升高。此外,我們利用磁珠分選了健康志愿者的外周血NK細(xì)胞,加入HBsAg和HBeAg進(jìn)行孵育(2 μg/mL)。結(jié)果顯示,與BSA處理組相比,HBeAg孵育后,外周血NK細(xì)胞僅NKG2D陽性比例顯著下降,其它受體均沒有顯著性變化。四、HBV基因/抗原可以影響NK細(xì)胞對免疫刺激的應(yīng)答1.HBV基因航原可抑制NK細(xì)胞對PMA/Ionomycin的應(yīng)答經(jīng)PMA/Ionomycin刺激后,與NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞分泌IFN-y和GramB的水平顯著降低,而perforin和TNF-a的表達(dá)未受到顯著影響。經(jīng)PMA/Ionomycin刺激后,與BSA組相比,HBsAg和HBeAg孵育后的NK-92細(xì)胞分泌IFN-γ和TNF-a的水平顯著下降,而perforin和GranB的表達(dá)無顯著差異。2.HBV基因/抗原可以抑制NK細(xì)胞對poly I:C的應(yīng)答流式細(xì)胞術(shù)的結(jié)果顯示,經(jīng)poly I:C刺激后,與NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞分泌IFN-γ、perforin和GramB的水平顯著降低；而TNF-a的表達(dá)未受到顯著影響。流式細(xì)胞術(shù)的結(jié)果顯示,經(jīng)poly I:C刺激后,與BSA組相比,HBsAg和HBeAg孵育后的NK-92細(xì)胞分泌GramB的水平顯著降低,而IFN-γ、TNF-a和perforin的表達(dá)無顯著差異。此外,還檢測了NK細(xì)胞脫顆粒水平CD107a的表達(dá)。結(jié)果顯示,經(jīng)poly I:C刺激后,NK-92-HBV細(xì)胞CD107a的表達(dá)上調(diào),但仍低于NK-92-LMP細(xì)胞。同樣的,經(jīng)poly I：C刺激后,與BSA組相比,HBsAg可以顯著抑制NK-92細(xì)胞中CD107a的表達(dá)。五、HBV對NK細(xì)胞模式識別受體信號通路的影響1.HBV對NK細(xì)胞模式識別受體表達(dá)水平的影響PCR和流式細(xì)胞術(shù)實驗結(jié)果證明,與NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞中TLR3和RIG-I的mRNA水平、蛋白表達(dá)均受到了顯著抑制。PCR和western blotting實驗結(jié)果顯示,與BSA組相比,HBsAg和HBeAg孵育后,NK-92細(xì)胞中RIG-1的]mRNA水平和蛋白表達(dá)明顯下降。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果證實,CHB患者的外周血NK細(xì)胞中RIG-I受體表達(dá)明顯低于健康志愿者。最后,在NK-92-HBV細(xì)胞中過表達(dá)RIG-I,能逆轉(zhuǎn)HBV對NK細(xì)胞的抑制作用,即細(xì)胞的殺傷活性、IFN-7和D107a的表達(dá)均得到恢復(fù)。以上結(jié)果提示,CHB患者的外周NK細(xì)胞中RIG-I通路在HBV感染后可能受到抑制。2.HBV影響NK細(xì)胞中的NF-kB和p38-MAPK信號通路未經(jīng)刺激或經(jīng)poly I:C刺激的條件下,與NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞中,NF-kB (p65)的磷酸化水平明顯下降；MAPK通路中p38的磷酸化水平也明顯受到了抑制,而ERK、JNK和c-Jun活化水平未受到影響。同樣的,我們還觀察到,未經(jīng)刺激或經(jīng)poly I:C刺激的條件下,與BSA組相比,HBsAg和HBeAg孵育后的NK-92細(xì)胞中NF-kB (p65)和p38信號通路也存在同樣的趨勢。進(jìn)一步,我們采用流式細(xì)胞術(shù)檢測了CHB患者外周血NK細(xì)胞中的NF-kB和p38的磷酸化表達(dá)水平,結(jié)果顯示,與健康志愿者相比,CHB患者外周血NK細(xì)胞中的NF-kB和p38的磷酸化水平明顯降低。3.HBV對NK細(xì)胞STATs通路的影響PCR和Western blotting實驗結(jié)果顯示,與對照組NK-92-LMP細(xì)胞相比,NK-92-HBV細(xì)胞中STAT1及STAT3的mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平均顯著下降。與之相似,HBsAg和HBeAg孵育后的NK-92細(xì)胞中STAT1的mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平受到了顯著抑制,但是STAT3的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平無顯著性變化。六、HBV病毒通過胞外體(exosomes)進(jìn)入NK細(xì)胞1.CHB患者血清中胞外體的分離提取我們提取了CHB患者血清中胞外體,通過透射電鏡觀察到,CHB患者血清來源的胞外體的直徑介于50-100nm之間,大小不均,是具有典型脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)的小囊泡,呈現(xiàn)圓形或橢圓形。并且,我們還觀察到的～22nm左右的HBsAg。2.CHB患者血清的胞外體中檢測到HBV病毒成分普通PCR的方法顯示,CHB患者血清來源的胞外體中含有HBV-rcDNA和HBV-cccDNA;而ELISA實驗證實,CHB患者血清的胞外體中含有HBsAg和HBeAg。3.CHB患者血清的胞外體可以介導(dǎo)HBV進(jìn)入NK細(xì)胞CHB患者血清來源的胞外體與健康志愿者外周血NK細(xì)胞共孵育,PCR方法證實孵育后的NK細(xì)胞中存在HBV-DNA,說明胞外體可能是HBV病毒進(jìn)入免疫細(xì)胞的有效途徑。4.CHB患者血清的胞外體對NK細(xì)胞功能的影響CHB患者血清的胞外體與健康志愿者外周血NK細(xì)胞共孵育,流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果證實,孵育后的NK細(xì)胞分泌CD107a和IFN-γ的水平均受到顯著抑制。七、細(xì)胞因子可逆轉(zhuǎn)HBV對NK細(xì)胞功能的抑制作用IL-2、IL-12、IL-15以及IFN-α是四種常用的NK細(xì)胞活化因子。我們將不同濃度的IL-2、IL-12、IL-15以及IFN-α與NK-92-HBV細(xì)胞共孵育,進(jìn)而檢測了NK-92細(xì)胞脫顆粒水平CD107a的表達(dá)和分泌細(xì)胞因子IFN-γ的水平。結(jié)果顯示,低濃度的細(xì)胞活化因子刺激后,NK-92-HBV細(xì)胞的CD107a和IFN-γ的分泌水平顯著低于與NK-92-LMP細(xì)胞。高濃度的細(xì)胞活化因子刺激后,NK-92-HBV細(xì)胞的CD107a和IFN-γ的分泌水平顯著升高,與NK-92-LMP細(xì)胞大致相當(dāng)。這說明高濃度的IL-2、IL-12、IL-15以及IFN-α均逆轉(zhuǎn)HBV對NK細(xì)胞的抑制作用。研究意義：1.進(jìn)一步證實CHB患者外周血NK細(xì)胞中存在HBV病毒成分,為HBV的肝外感染提供了依據(jù)。2.從CHB患者血清中分離獲得胞外體(exosomes),證明其中含有HBV病毒成分,且胞外體可能是HBV進(jìn)入NK細(xì)胞的有效途徑。3.系統(tǒng)分析了HBV抗原和HBV基因?qū)K細(xì)胞功能的影響,發(fā)現(xiàn)HBV成分不僅可抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性,而且還可以抑制NK細(xì)胞的中重要的固有免疫通路,即RIG-I下游的NK-κB和p38-MAPK信號通路。4.此項研究成果擴(kuò)展了我們對HBV病毒直接干預(yù)免疫系統(tǒng)的認(rèn)識,為逆轉(zhuǎn)NK細(xì)胞功能狀態(tài),以及臨床HBV治療提供了新的切入點。
文內(nèi)圖片：
圖片說明： 于嗜肝性ＤＮＡ病毒科，其基因組是從感染者血清中經(jīng)過克隆、測序進(jìn)行鑒定的。逡逑１．邋ＨＢＶ病毒逡逑完整的ＨＢＶ病毒是具有雙層衣殼結(jié)構(gòu)的球形顆粒（圖１），，又稱Ｄａｎｅ顆粒，逡逑直徑４２ｎｍ。病毒外層結(jié)構(gòu)是脂蛋白包膜，內(nèi)層結(jié)構(gòu)為核衣殼，核衣X蚰謔遣《懼義匣蜃楹途酆廈縛冢蕁ｅ義希歟

本文編號：2513066