【摘要】：目的研制一種可用于疫區(qū)現(xiàn)場快速診斷家畜日本血吸蟲感染的膠體金免疫層析試紙條。方法設計重組蛋白G并在大腸桿菌中表達,得到重組蛋白。對重組蛋白G進行膠體金標記并制備金標墊,分別用可溶性蟲卵抗原(SEA)和重組蛋白G劃線,作為檢測線和質(zhì)控線。采用組裝的試紙條檢測標準陰、陽性BALB/c鼠與新西蘭大白兔血清,以及糞檢陰、陽性的綿羊與水牛血清,評估其靈敏度和特異度;利用組裝的試紙條檢測前后盤吸蟲病病牛血清,評價其交叉反應性。結(jié)果成功構(gòu)建了重組蛋白G的原核表達質(zhì)粒并在大腸桿菌中表達。以重組蛋白G制備的試紙條可用于檢測日本血吸蟲感染BALB/c鼠、新西蘭大白兔、水牛、綿羊血清抗體。該試紙條檢測日本血吸蟲感染小鼠與兔血清的靈敏度、特異度均為100%;檢測綿羊血清的靈敏度為100%,特異度為88.46%;檢測水牛血清的靈敏度為94.44%,特異度為100%;其與前后盤吸蟲交叉反應率為5.88%。結(jié)論成功研制能檢測多種家畜血吸蟲病的膠體金免疫層析試紙條,其檢測家畜血吸蟲感染的靈敏度和特異度均較高。
[Abstract]:Objective to develop a colloidal gold immunochromatographic assay strip for rapid diagnosis of schistosoma japonicum infection in domestic animals in epidemic areas. Methods the recombinant protein G was designed and expressed in E. coli. The recombinant protein G was labeled with colloidal gold and prepared gold-labeled pad. The soluble egg antigen (SEA) and recombinant protein G were used as the detection line and the quality control line, respectively. The sensitivity and specificity of standard negative, positive BALB/c mouse and New Zealand white rabbit serum, fecal negative test and positive sheep and buffalo serum were evaluated by using assembled test strip. The cross-reactivity of bovine sera from patients with and without paragonimiasis was evaluated by using assembled test strips. Results the prokaryotic expression plasmid of recombinant protein G was successfully constructed and expressed in E. coli. The test strips prepared with recombinant protein G can be used to detect the serum antibodies against Schistosoma japonicum infected BALB/c mice, New Zealand white rabbits, buffalo and sheep. The sensitivity and specificity of the test strip were 100%, 88.46% and 100%, respectively, for the sera of mice infected with Schistosoma japonicum and rabbits, and for sheep sera, the sensitivity and specificity were 100% and 88.46%, respectively. The sensitivity and specificity of detection of buffalo serum were 94.44% and 100% respectively, and the cross-reaction rate was 5.88%. Conclusion Colloidal gold immunochromatographic assay strip can be successfully developed to detect schistosomiasis in domestic animals. The sensitivity and specificity of the strip for detecting Schistosoma japonicum infection in domestic animals are high.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所、農(nóng)業(yè)部寄生蟲學重點開放實驗室、國家防治動物血吸蟲病專業(yè)實驗室;江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院檢驗科;
【分類號】：R532.21

【參考文獻】

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本文編號：2433148