發(fā)布時(shí)間：2018-06-15 20:11

  本文選題：肝炎病毒 + 乙型�。� 參考：《解放軍醫(yī)學(xué)雜志》2015年03期

【摘要】：目的分析乙型肝炎病毒(HBV)反轉(zhuǎn)錄酶區(qū)rtI233V變異的演變規(guī)律及其與阿德福韋酯(ADV)耐藥的相關(guān)性。方法分析9830例慢性HBV感染者血清樣本中HBV rtI233V變異的檢出率。選擇其中2例代表性患者,動態(tài)收集血清樣本,擴(kuò)增HBV RT基因并克隆測序(20個(gè)克隆/樣本),觀察rtI233V變異的演變過程。構(gòu)建pTriEx-HBV(C)1.1倍野生株和3種變異株(rtI233V、rtN236T、rtI233V+rtN236T)復(fù)制子,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2肝癌細(xì)胞,分別加入不同濃度的拉米夫定(LAM)、ADV、恩替卡韋(ETV)和替諾福韋(TDF)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測不同濃度藥物作用后細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBV DNA的水平,分析變異病毒復(fù)制力與表型耐藥的變化特點(diǎn)。結(jié)果9830例慢乙肝患者血清樣本中共檢出rtI233V位點(diǎn)變異28例,檢出率0.28%,其中rtI233V單獨(dú)變異19例,與rtN236T等經(jīng)典耐藥變異聯(lián)合出現(xiàn)9例。該變異的檢出患者均有ADV治療史,其中16例(57.1%)接受ADV單藥治療6個(gè)月以上,12例(42.9%)接受包括ADV的多藥序貫聯(lián)合治療1年以上。病毒復(fù)制力與表型耐藥分析顯示,rtI233V變異株的復(fù)制力與野生株接近,rtN236T變異株的復(fù)制力較野生株顯著降低;rtI233V變異株對LAM、ADV、ETV和TDF均敏感,rtI233V+rtN236T聯(lián)合變異對耐藥性的影響不大,但rtI233V變異可明顯恢復(fù)rtN236T變異株受損的復(fù)制力。結(jié)論rtI233V位點(diǎn)變異與ADV應(yīng)答不佳相關(guān),雖不直接降低病毒對ADV的敏感程度,但可增加經(jīng)典ADV耐藥病毒株的復(fù)制力,是一種復(fù)制力補(bǔ)償變異。
[Abstract]:Objective to analyze the evolution of rtI233V mutation in the reverse transcriptase region of hepatitis B virus (HBV) and its correlation with adefovir dipivoxil (ADV) resistance. Methods the detection rate of HBV rtI233V mutation in serum samples of 9830 patients with chronic HBV infection was analyzed. The HBV RT gene was amplified and sequenced (20 clones / samples) to observe the evolution of rtI233V mutation. The replicators of pTriEx-HBVC1.1-fold wild strain and three variant strains, rtI233V, rtN236Tn233V rtI233V rtN236T, were transiently transfected into HepG2 hepatoma cells. Different concentrations of lamivudine, entekavir ETV) and tenofovir (TDFV) were added to HepG2 hepatoma cells. The levels of HBV DNA in the supernatant of cell culture after different concentrations of drugs were detected by real-time fluorescence quantitative PCR, and the characteristics of replicability and phenotypic resistance of mutant virus were analyzed. Results there were 28 cases of rtI233V mutation detected in serum samples of 9830 patients with chronic hepatitis B, the detection rate was 0.28%. Among them, 19 cases were rtI233V mutation alone, 9 cases were combined with rtN236T classic drug resistance mutation. All of the patients with ADV had a history of ADV therapy, of which 16 patients (57.1) received ADV alone for more than 6 months and 12 patients (42.9%) received multi-drug sequential combination therapy including ADV for more than one year. The replicability and phenotypic resistance of rtI233V mutant was similar to that of wild strain. Compared with wild strain, the replicative power of rtI233V variant was significantly lower than that of wild strain. The combination of rtI233V variant and TDF sensitive rtI233V rN236T had little effect on drug resistance. However, rtI233V mutation could significantly restore the damaged replicability of rtN236T mutant. Conclusion rtI233V mutation is associated with poor ADV response, although it does not directly reduce the sensitivity of the virus to ADV, it can increase the replicability of classical ADV resistant strains and is a kind of replicative force compensating variation.
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院;解放軍302醫(yī)院全軍傳染病研究所、肝衰竭診療與研究中心病毒性肝炎研究室;桂林市第三人民醫(yī)院肝病科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81371852) 北京市自然科學(xué)基金(7132224)~~
【分類號】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 紀(jì)冬;劉妍;許智慧;李樂;陳麗;李曉東;陳國鳳;辛紹杰;徐東平;;乙肝病毒多聚酶區(qū)rtL229突變的演變及其表型分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2012年06期

2 王曉;劉妍;思蘭蘭;陳麗;白文林;劉立明;王嫣;許智慧;戴久增;姚增濤;徐東平;;阿德福韋酯治療失敗的慢性乙型肝炎患者HBV反轉(zhuǎn)錄酶區(qū)新變異rtN236V的表型耐藥特點(diǎn)分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2013年04期

3 姚偉明;劉妍;思蘭蘭;許智慧;李鵬高;卜綠萍;蘭金初;徐東平;;新型中藥制劑肅毒星對乙型肝炎病毒體外復(fù)制的抑制作用研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 尹德輝;楊世忠;蔣萌萌;符嬌文;景廷;謝毅強(qiáng);;�？诘貐^(qū)慢性乙型肝炎568例HBeAg陰性與陽性臨床比較分析[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年09期

2 陽吾君;;慢性乙型肝炎肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)的診斷效能評價(jià)[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床;2012年19期

3 尚建中;馬龍飛;馬宏偉;趙秋芳;趙林華;李曉飛;范燕峰;張素娥;;自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對肝硬化患者門靜脈高壓血流動力學(xué)的影響[J];臨床肝膽病雜志;2013年11期

4 湯莉;翁柳娟;劉麗瓊;梁笑欣;韓偉嬋;梅碧琪;;乙型病毒性肝炎患者家庭消毒隔離依從性差的質(zhì)性研究[J];護(hù)理學(xué)雜志;2013年23期

5 劉益軍;譚蘭香;馬新文;;角黃湯腸道滴入治療早中期慢性乙型重型肝炎59例療效觀察[J];湖南中醫(yī)雜志;2014年09期

6 陳建宏;劉妍;許智慧;思蘭蘭;戴久增;李奇;王帥;李進(jìn);韓聚強(qiáng);徐東平;;隱匿性乙型肝炎病毒感染患者S基因突變特點(diǎn)分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2015年03期

7 鄧鑫;梁健;吳發(fā)勝;李艷波;唐艷芳;;Effects of the Ganning Formula (肝寧方) on Liver Fibrosis in Patients With Chronic Hepatitis B[J];Journal of Traditional Chinese Medicine;2011年04期

8 方芳;易為;張麗菊;白玉青;劉敏;曾慧慧;蔡皓東;;HBV垂直傳播兒童免疫失敗影響因素分析[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版);2012年04期

9 張磊;唐振祥;程書權(quán);;兩種方案治療失代償期乙型肝炎肝硬化療效比較[J];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2012年11期

10 陶柏春;;恩替卡韋聯(lián)合胸腺肽α1治療HBeAg陰性慢性乙型肝炎后HBsAg/抗-HBs血清學(xué)轉(zhuǎn)換1例[J];中國實(shí)用醫(yī)藥;2013年04期

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 蘭金初,李德益,陰忠起;三歸片治療艾滋病臨床研究[J];河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年01期

2 劉妍;王春梅;紀(jì)冬;徐辰;韓萍;任曉強(qiáng);許智慧;戴久增;張玲霞;徐東平;;1121例慢性乙型肝炎患者HBV反轉(zhuǎn)錄酶區(qū)的耐藥突變分析(英文)[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

3 劉妍;李慶虹;李樂;施建飛;紀(jì)冬;白文林;姚增濤;戴久增;徐東平;;慢性HBV感染患者恩替卡韋基因型耐藥突變特征分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期

4 劉祿;郝瀚;劉永明;蘇何玲;蔣林彬;紀(jì)冬;劉文;思蘭蘭;徐東平;鐘彥偉;;HBV表型耐藥方法的建立及臨床分離株的表型耐藥分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期

5 徐東平;劉妍;;結(jié)合基因型耐藥突變檢測與表型耐藥分析探索乙肝病毒耐藥的新認(rèn)識[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2012年06期

6 劉妍;許智慧;劉立明;李樂;茹超;陳麗;白文林;李曉東;姚增濤;思蘭蘭;紀(jì)冬;辛紹杰;徐東平;;我國患者多重耐藥乙肝病毒感染的基因型和表型特點(diǎn)[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2012年06期

7 王宇明;程林;;中藥抗乙型肝炎病毒/丙型肝炎病毒研究新進(jìn)展[J];臨床肝膽病雜志;2012年11期

8 徐麗;李冬嚴(yán);吳曉燕;閆慧梅;李修范;吳邦富;;自體樹突狀細(xì)胞聯(lián)合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎IL-12和IL-6的水平變化及臨床效應(yīng)[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年03期

9 曾民德;茅益民;姚光弼;周霞秋;王豪;徐道振;姚集魯;侯金林;王宇明;任紅;陳亞崗;牛俊奇;王耀宗;;阿德福韋酯治療HBeAg陽性的中國慢性乙型病毒性肝炎患者52周的多中心臨床研究[J];中華傳染病雜志;2005年06期

10 姚光弼;計(jì)焱焱;任紅;王寶恩;徐道振;周霞秋;蔣崢榮;;恩替卡韋治療拉米夫定失效慢性乙型肝炎一年的療效[J];中華傳染病雜志;2006年06期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 段承俐,蕭鳳回,文國松,崔秀明,陳中堅(jiān),王敬波;文山三七栽培群體變異類型的分子鑒定[J];現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐;2003年S1期

2 楊全;魏勝利;王文全;劉春生;張春榮;;應(yīng)用cDNA-AFLP研究甘草不同變異類型特異表達(dá)的基因[J];中國中藥雜志;2009年13期

3 張建國,李興富;窩狀闌尾——一種闌尾變異的特殊類型[J];中國臨床解剖學(xué)雜志;1997年03期

4 朱傳武;C基因區(qū)與相關(guān)調(diào)控基因變異的分子生物學(xué)[J];國外醫(yī)學(xué)(流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊);2001年03期

5 宋樹奎;胡開元;胡多祿;;6株BALB/c系小鼠珠蛋白細(xì)微結(jié)構(gòu)分析及其與基因變異類型的關(guān)系[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);1992年02期

6 李平，，朱立煌，陳英，周開達(dá)，李仁端;水稻花藥培養(yǎng)植株后代的DNA變異[J];遺傳學(xué)報(bào);1995年04期

7 LyuR. K.,鄧劍平;急性多發(fā)性腦神經(jīng)病是否為格林-巴利綜合征的一種變異類型?[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(神經(jīng)病學(xué)分冊);2005年02期

8 Heidi Belden;于麗;;HIV,走過25年[J];中國處方藥;2006年12期

9 劉明學(xué);李瓊芳;李梁;;平武天麻GAP基地三種天麻變異類型質(zhì)量評價(jià)[J];現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐;2009年05期

10 孟祥才;楊國輝;孫暉;王喜軍;;不同變異類型五味子對藥材質(zhì)量影響的研究[J];現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐;2010年05期

相關(guān)會議論文 前3條

1 韓梅;楊利民;王秀全;張連學(xué);;柴胡變異類型主要遺傳性狀的比較研究[A];第六屆全國藥用植物和植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

2 黃敏仁;許農(nóng);施季森;陳正德;;杉木變異類型的同工酶研究[A];全國林木遺傳育種第五次學(xué)術(shù)報(bào)告會論文匯編[C];1986年

3 梁曉岳;;乙型肝炎病毒基因變異的臨床意義[A];2006年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

1 徐娟;孝南區(qū)梔子的自然變異類型評價(jià)及優(yōu)株選擇[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

2 鄭偉;過路黃彩脈變異類型的離體培養(yǎng)和植株再生研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

3 亓民;基因芯片檢測慢性乙肝患者HBV-DNA變異的臨床研究[D];鄭州大學(xué);2006年

4 晏存育;毛竹不同變異類型的生物學(xué)與生理學(xué)特性研究[D];中南林業(yè)科技大學(xué);2011年

5 張稱心;瓠瓜雜種一代及其親本DNA甲基化遺傳和變異的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

6 任耀忠;栓皮櫟4個(gè)不同類型遺傳測定及其評價(jià)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

本文編號：2023444