本文選題：人乳頭瘤病毒 + 滅活仙臺(tái)病毒　； 參考：《揚(yáng)州大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：人乳頭瘤病毒(Human Papilloma Virus,HPV)在人群中廣泛傳播,感染人體皮膚和粘膜引起良性或惡性病變。研究發(fā)現(xiàn)尋常疣、尖銳濕疣、宮頸癌、皮膚癌、陰道癌、陰莖癌、肛門(mén)癌、乳腺癌等均與HPV感染相關(guān),其中95%的宮頸癌由高危型人乳頭瘤病毒感染引起。HPV感染分布存在年齡與地區(qū)差異性,不同年齡段、不同地區(qū)HPV的感染率和亞型分布不同。我們通過(guò)分析揚(yáng)州地區(qū)10473例婦女HPV感染情況,對(duì)本地區(qū)婦女HPV感染情況進(jìn)行初步了解,為當(dāng)?shù)豀PV感染性疾病的防治提供依據(jù),同時(shí)探討日本血凝病毒囊膜(Hemagglutinating virus of Japan envelope,HVJ-E)誘導(dǎo) HPV18 陽(yáng)性的 Hela 細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制,為腫瘤治療提供新的手段。一、HPV感染情況分析目的:了解揚(yáng)州地區(qū)婦女人群中人乳頭瘤病毒感染情況,為當(dāng)?shù)豀PV感染性疾病的防治提供依據(jù)。方法:收集2015年10月--2016年10月在蘇北人民醫(yī)院皮膚科和婦科門(mén)診就診的18-86歲10473例女性患者宮頸脫落上皮細(xì)胞,采用PCR-反向點(diǎn)雜交法檢測(cè)HPV 21種基因亞型。按患者年齡劃分為≤29歲,30-39歲,40-49歲,50-59歲,≥60歲五個(gè)年齡組,分析HPV各亞型分布特點(diǎn),卡方檢驗(yàn)比較各年齡組感染率。結(jié)果:10473例女性患者,感染HPV 2577例,感染率為24.61%,單一感染1819例,多重感染758例,感染率分別為17.37%,7.24%;≤29歲,30-39歲,40-49歲,50-59歲,≥60歲五個(gè)年齡組HPV感染率和HPV感染陽(yáng)性百分比分別為23.88%,23.36%,23.77%,28.25%,32.27%和 17.66%,27.40%,34.65%,14.82%,5.47%;Hr-HPV 感染檢出率為28.40%,其中Hr-HPV-16,52,58,53,39,51檢出數(shù)位居前六,檢出率依次為4.54%,4.33%,3.64%,2.96%,2.17%,1.96%,Hr-HPV-18 檢出率較低,僅為 1.46%;Lr-HPV 感染檢出率為5.99%,其中Lr-HPV-81,11,6,44檢出數(shù)位居前四,檢出率依次為3.16%,0.93%,0.91%,0.72%。結(jié)論:揚(yáng)州地區(qū)HPV感染分布具有年齡差異性及區(qū)域性;感染的高峰人群集中在30-49歲,常見(jiàn)高危及低危亞型分別為Hr-HPV-16,52,58,53,39,51和Lr-HPV-81,11,6,44。在揚(yáng)州地區(qū)開(kāi)展HPV 21種基因亞型檢測(cè)對(duì)揚(yáng)州地區(qū)HPV感染性疾病的防治具有指導(dǎo)意義。二、HVJ-E誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究目的:選取HPV18陽(yáng)性的Hela細(xì)胞為研究對(duì)象,探討HVJ-E誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。方法:取不同濃度的HVJ-E病毒粒子接種Hela細(xì)胞,倒置顯微鏡觀察Hela細(xì)胞形態(tài)變化,CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活力,FACS法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,western blot法檢測(cè)p53、Bcl-2/Bax、Caspase信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路蛋白表達(dá)情況。為進(jìn)一步證實(shí)Caspase信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路在HVJ-E誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡中的作用,用Caspase廣譜抑制劑Z-VAD-FMK(50μM),ERK1/2 抑制劑 U0126(18μM),JNK 抑制劑 SP600125(5產(chǎn)M),p38 抑制劑SB203580(12.5產(chǎn)M)分別預(yù)處理 Hela 細(xì)胞 20min,2h,40min,2h,加入 HVJ-E(800MOI)病毒粒子,CCK-8法檢測(cè)各組細(xì)胞活力,FACS法檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率,western blot法檢測(cè)Caspase-3、PARP、p-ERK1/2、p-JNK、p-p38蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:HVJ-E作用于Hela細(xì)胞,引起細(xì)胞生長(zhǎng)停滯、皺縮及破裂;隨著HVJ-E病毒粒子濃度增加,Hela細(xì)胞活力逐漸降低,凋亡率逐漸增加,p53、Caspase-9、Caspase-3、PARP蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng),Bcl-2抗凋亡蛋白表達(dá)逐漸減弱,Bax促凋亡蛋白無(wú)明顯變化,Bcl-2與Bax比值隨病毒濃度增加而降低;在MAPK通路中,ERK1/2、JNK和p38磷酸化蛋白的表達(dá)量與病毒濃度呈劑量效應(yīng)關(guān)系。抑制劑處理Hela細(xì)胞后可下調(diào)HVJ-E誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,減少HVJ-E導(dǎo)致的細(xì)胞死亡,同時(shí)抑制Caspase-3、PARP、p-ERK1/2、p-JNK、p-p38蛋白表達(dá)。結(jié)論:HVJ-E能抑制Hela細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡;p53、Bcl-2/Bax、Caspase信號(hào)通路和MAPK信號(hào)通路在HVJ-E誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R511

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1767242