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微小RNA-146a-5p在新生隱球菌、脂多糖誘導THP-1細胞中表達的對比分析

發(fā)布時間:2018-03-17 09:42

  本文選題:微小RNA-a-p 切入點:新生隱球菌 出處:《中國感染與化療雜志》2015年06期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的為探討微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)在新生隱球菌所致隱球菌性腦膜炎中的調控作用及機制奠定基礎。方法把體外培養(yǎng)的人單核細胞系THP-1細胞分成新生隱球菌刺激組和脂多糖(LPS)刺激組,分別用與細胞數量相同的滅活新生隱球菌(WM148)和濃度為1 mg/L的LPS刺激THP-1細胞,分別于0、3、6、9、12 h收集上清液和細胞。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測細胞上清液中腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-6的表達水平,實時熒光定量聚合酶鏈反應(Real-time PCR)檢測細胞miR-146a-5p的表達情況。結果新生隱球菌誘導后,細胞中miR-146a-5p的表達對比對照組(0h)明顯升高(P0.05),3 h達到最高值,隨后逐漸下降;上清液中TNF-α的表達在誘導后12 h達到最高值,IL-6的表達各時間點變化不明顯。LPS誘導后,miR-146a-5p的表達逐漸升高,12 h達到最高值;上清液中TNF-α的表達3 h后一直處于峰值;IL-6的表達逐漸增加,12 h達到最高值。結論新生隱球菌、LPS誘導THP-1細胞炎性反應后,miR-146a-5p表達隨時間延長呈現不同的規(guī)律,TNF-α、IL-6的動態(tài)變化表現不同的特點。表明miR-146a-5p參與新生隱球菌、LPS誘導THP-1炎性反應存在不同的調控機制。
[Abstract]:Objective to study the micro RNA-146a-5p (miR-146a-5p) basis function and regulatory mechanism in Cryptococcus neoformans induced cryptococcal meningitis. Methods the in vitro cultured human monocytic THP-1 cells into Cryptococcus neoformans stimulation group and lipopolysaccharide (LPS) stimulation group, respectively with the same number of cells inactivated Cryptococcus aureus (WM148) and the concentration of 1 mg/L LPS stimulation of THP-1 cells, h and 0,3,6,9,12 respectively. Cell supernatant was collected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) detected in the supernatant of tumor necrosis factor (TNF) - alpha, interleukin (IL) -6 expression, real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR) to detect the expression of miR-146a-5p cells. The results of Cryptococcus neoformans induced expression of miR-146a-5p in cells compared with control group (0h) was significantly increased (P0.05), 3 h reached a maximum value, then decreased gradually; the supernatant Expression of TNF- in the liquid after induction of 12 h reached the highest value, the expression of IL-6 at each time point did not change significantly after induction of.LPS miR-146a-5p expression gradually increased, H 12 has reached the highest value; at the peak 3 h after the expression of TNF- in the supernatant; the expression of IL-6 increased gradually, reached the highest value of 12 h conclusion Cryptococcus neoformans, LPS THP-1 cells induced by inflammatory reaction after miR-146a-5p expression with time show different patterns, dynamic changes of TNF- alpha, IL-6 showed different characteristics. Suggested the involvement of miR-146a-5p in Cryptococcus neoformans, LPS THP-1 induced inflammatory response in different regulatory mechanisms.

【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學附屬長征醫(yī)院皮膚科;
【分類號】:R519.4

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