本文關(guān)鍵詞： 尖銳濕疣 血管內(nèi)皮細胞 ALA-PDT VEGF CD34　出處：《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景和目的尖銳濕疣(condyloma acuminatum,CA)是由人乳頭瘤狀病毒(human papilloma virus,HPV)感染引起的發(fā)生于皮膚黏膜的良性贅生物,為我國常見的性傳播疾病之一,其病理表現(xiàn)為表皮角質(zhì)形成細胞過度增殖,真皮淋巴細胞浸潤、毛細血管增生及血管擴張,凹空細胞是其特征性表現(xiàn),分布在顆粒層及棘層。傳統(tǒng)治療方法主要為冷凍、激光、手術(shù)或外用藥物,對于疣體有效,但其創(chuàng)傷性大且對亞臨床感染基本無效,治療后易復(fù)發(fā)。ALA-PDT(5-鹽酸氨酮戊酸光動力療法,5-aminolevulinic acid photodynamic therapy,ALA-PDT)是近年廣泛應(yīng)用于尖銳濕疣及腫瘤等的治療方法,治療CA具有副作用小、復(fù)發(fā)率低等優(yōu)點。其基本原理為光敏劑特異性地在代謝旺盛的組織中累積,在特定波長的光照下,產(chǎn)生單線態(tài)氧及氧化物,其可產(chǎn)生細胞毒性作用而殺傷病變組織,但對周圍正常組織無損傷。但ALA-PDT殺傷病變組織細胞的機制尚不是很清楚,可能與促進細胞凋亡、抑制增殖、損傷組織血管、調(diào)節(jié)局部免疫力等相關(guān),目前尚缺乏ALA-PDT對CA組織血管生成影響的研究。本實驗通過研究ALA-PDT治療CA前后,疣體組織VEGF和CD34的表達變化,探討ALA-PDT對CA組織血管生成的影響,進一步豐富ALA-PDT殺傷CA組織的理論機制。材料與方法1.材料54例CA患者,均來自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚科門診,其中女23例,男31例,年齡18~60歲,平均年齡為34.15歲;患病病程為19天~165天,平均為52.36天;所有入選患者均符合尖銳濕疣的實驗室、臨床及病理診斷標準,患者臨床表現(xiàn)典型,病理診斷明確。所有患者均為初次確診,且在此次就診前均未接受任何治療,對于患有其他系統(tǒng)性疾病患者均排除在外。2.方法對于符合實驗標準的54例患者,于治療前取其疣體組織設(shè)為對照組,對所有患者進行ALA-PDT治療,治療后1周復(fù)診,取其治療后組織作為實驗組。利用免疫組織化SP法,對實驗組和對照組CA組織中VEGF蛋白以及血管內(nèi)皮細胞標記物CD34的表達情況進行檢測。結(jié)果判定標準:VEGF的判斷標準:VEGF蛋白的陽性顯色是淺黃至棕褐色顆粒,主要是胞質(zhì)著色。在光鏡下,陽性細胞率的計算是隨機抽取每張切片的5個不同高倍視野,然后取其平均值,要求在400倍鏡下,連著計數(shù)200個細胞。陽性細胞所占總細胞百分比:0分是0~10%、1分是11%~25%、26%~50%對應(yīng)2分、3分是51%~75%、4分對應(yīng)76~100%。著色強度:0分是不著色、1分是淺黃色、2分為棕黃色、3分是棕褐色;將其二者評分相乘,得出總分�？偡謹�(shù)為0分、1~4分、6~8分、9~12分分別對應(yīng)為陰性(-)、弱陽性(+)、陽性(++)、強陽性(+++)。微血管密度計數(shù)(microvessel density,MVD):CD34陽性的細胞是血管內(nèi)皮細胞胞核或胞漿著色為淡至棕褐色或黃色的顆粒。先將高血管密度區(qū)在(40x)低倍鏡下找出,然后于(200x)高倍鏡下,找出著色的微小血管及毛細血管并進行計數(shù)。計數(shù)5個高倍視野的血管數(shù),最后結(jié)果用其平均數(shù)來表示。3.統(tǒng)計學(xué)處理對所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,用χ2檢驗統(tǒng)計ALA-PDT治療前和治療后VEGF陽性表達率差異;治療前后陽性表達強度差異采用秩和檢驗;采用t檢驗統(tǒng)計ALT-PDT治療前和治療后兩組間MVD差異;檢驗水準采用P0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.ALT-PDT治療前和治療后CA組織中VEGF的表達VEGF蛋白的陽性顯色是淺黃至棕褐色顆粒,主要是胞質(zhì)著色。54例CA患者ALA-PDT治療前疣體中VEGF的陽性表達例數(shù)為45例,陽性表達率為83.33%(45/54),ALA-PDT治療后陽性表達例數(shù)為24例,陽性表達率為44.44%(24/54),治療前后的陽性表達率比較,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=17.69,P0.001)。ALA-PDT治療前疣體中VEGF陽性表達強度多在++~+++,治療后表達強度多在-~++,治療前后的表達強度比較,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-5.25,P0.001)。2.ALT-PDT治療前和治療后疣體組織中MVD的變化CD34陽性的細胞是血管內(nèi)皮細胞胞核或胞漿著色為淡至棕褐色或黃色的顆粒。ALA-PDT治療前血管內(nèi)皮細胞CD34表達強度多在++~+++,MVD平均為(36.20土8.80)%;ALA-PDT治療后血管內(nèi)皮細胞CD34表達強度多在+~++,MVD平均為(11.83土1.71)%,比較治療前后兩組MVD,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=19.95,P0.001)。結(jié)論1.CA組織在經(jīng)ALA-PDT治療后,其VEGF陽性表達率、表達強度均下降,表明ALA-PDT可通過抑制組織中的促血管內(nèi)皮細胞生成因子表達,進而抑制疣體的增生。2.CA組織在經(jīng)ALA-PDT治療后,其用血管特異性標記物CD34測量的MVD值明顯下降,表明ALA-PDT通過減少組織中的微血管密度,從而抑制疣體增生。3.抑制血管內(nèi)皮細胞的增殖及損傷組織中的新生血管是ALA-PDT治療CA的機制之一。
[Abstract]:The mechanism of ALA - PDT has been widely used in the treatment of CA tissue . The mechanism of ALA - PDT has been widely used in treating CA tissue . The expression of VEGF protein and vascular endothelial cell marker CD34 in CA tissues of experimental group and control group were determined by immunohistochemical SP method . Results 1 . The positive expression rate of VEGF in the CA tissues before and after treatment was 45 cases , the positive rate of expression was 83.33 % ( 45 / 54 ) , the positive expression rate was 44.44 % ( 24 / 54 ) , and the positive expression rate before and after treatment was statistically significant ( 蠂2 = 17.69 , P0.001 ) . The expression intensity of VEGF was significantly higher than that before and after treatment with ALA - PDT ( Z = - 5.25 , P 0.001 ) . The expression intensity of CD34 in vascular endothelial cells before and after treatment was significantly higher than that before and after treatment ( Z = - 5.25 , P 0.001 ) . Conclusion 1 . After treated with ALA - PDT , the expression rate and intensity of VEGF in CA tissue decreased , indicating that ALA - PDT could inhibit the proliferation of wart .

【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R752.53

【參考文獻】

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1 林建華;梁月英;;尖銳濕疣患者外周血T細胞亞群及NK細胞水平及其與尖銳濕疣臨床復(fù)發(fā)的關(guān)系[J];實驗與檢驗醫(yī)學(xué);2016年01期

2 劉永生;周發(fā)春;;哮喘患者血清IL-13、TGF-β1、VEGF表達變化及與氣道炎癥、重塑的關(guān)系探討[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2012年10期

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本文編號：1503141