IFN-α治療后發(fā)生HBsAg轉(zhuǎn)陰的慢性乙型肝炎患者外周血免疫庫(kù)譜特征分析
本文關(guān)鍵詞: 免疫庫(kù) T細(xì)胞受體 慢性乙肝感染 HBsAg轉(zhuǎn)陰 出處:《免疫學(xué)雜志》2017年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的通過(guò)對(duì)慢性乙型肝炎患者經(jīng)IFN-α治療后出現(xiàn)HBs Ag轉(zhuǎn)陰病例與未轉(zhuǎn)陰病例外周血中T細(xì)胞受體β鏈(TCRβ,TRB)序列分析比較,探討HBs Ag轉(zhuǎn)陰病人外周血免疫庫(kù)TCRβ的特征,為預(yù)測(cè)病人臨床結(jié)局以及評(píng)價(jià)治療效果提供新的指標(biāo)。方法收集HBV感染病人的外周血樣進(jìn)行密度梯度離心獲得淋巴細(xì)胞,凍存。待IFN-α治療一段時(shí)間后,取HBs Ag轉(zhuǎn)陰病例與未轉(zhuǎn)陰病例相應(yīng)的凍存細(xì)胞,提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄為c DNA后通過(guò)多重PCR對(duì)TCRβ鏈的CDR3區(qū)序列進(jìn)行擴(kuò)增、純化,高通量測(cè)序后將測(cè)序結(jié)果與IMGT數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),以找到HBs Ag轉(zhuǎn)陰病人外周血TRB-CDR3免疫組庫(kù)的特征,分析人外周血TRB-CDR3多樣性及其他免疫學(xué)特征與HBs Ag轉(zhuǎn)陰之間的關(guān)系。結(jié)果 IFN-α治療后HBs Ag轉(zhuǎn)陰的患者TRB-CDR3的多樣性高于未轉(zhuǎn)陰患者,并表現(xiàn)出其特有的免疫學(xué)特征,包括高頻取用的V、J家族、V-J家族配對(duì)、基因的插入、CDR3區(qū)長(zhǎng)度分布等均與未轉(zhuǎn)陰組有明顯差異,而基因的缺失方面未發(fā)現(xiàn)差異。結(jié)論 IFN-α治療后HBs Ag轉(zhuǎn)陰的患者的免疫組庫(kù)呈現(xiàn)明顯的免疫學(xué)特征,可為臨床療效的預(yù)測(cè)提供新的切入點(diǎn)。
[Abstract]:Objective to analyze and compare the sequence of T cell receptor 尾 chain TCR 尾 -tbb in peripheral blood of patients with chronic hepatitis B (CHB) treated with IFN- 偽. Objective: to investigate the characteristics of TCR 尾 in peripheral blood immune library of patients with HBs Ag turning negative. Methods Peripheral blood samples from patients with HBV infection were collected to obtain lymphocytes by density gradient centrifugation. Cryopreservation. After treatment with IFN- 偽 for a period of time, RNA was extracted from frozen cells of HBs Ag negative cases and non-negative cases. The sequence of CDR3 region of TCR 尾 chain was amplified by multiplex PCR and purified by reverse transcription to c DNA. After high throughput sequencing, the sequence results were compared with IMGT database. In order to find out the characteristics of peripheral blood TRB-CDR3 immune library in patients with HBs Ag turning negative. The relationship between TRB-CDR3 diversity and other immunological characteristics of human peripheral blood and the conversion of HBs Ag to negative was analyzed. Results HBs was treated with IFN- 偽. The diversity of TRB-CDR3 in patients with negative Ag was higher than that in patients without negative. And showed its unique immunological characteristics, including the high-frequency Vapor J family V-J family pairing, gene insertion CDR3 length distribution and so on there are significant differences between the negative group and non-negative group. Conclusion the immune group library of patients with negative HBs Ag after IFN- 偽 therapy has obvious immunological characteristics, which may provide a new entry point for the prediction of clinical efficacy.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)研究所;西南醫(yī)院全軍傳染病研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金國(guó)際(地區(qū))合作與交流項(xiàng)目(81220108024)
【分類號(hào)】:R512.62
【正文快照】: 乙肝(viral hepatitis B)是由乙型肝炎病毒引起的肝炎疾病,目前仍是世界性的健康難題[1-2]。核苷類似物(UA)等藥物的使用大大改善了HBV的治療現(xiàn)狀[3],但是并不能使大多數(shù)患者完全治愈,表現(xiàn)在乙肝表面抗原(HBs Ag)不能轉(zhuǎn)陰。而HBs Ag的水平又與肝癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[4]。因此
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,本文編號(hào):1448354
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