本文關鍵詞：微滴數(shù)字PCR定量檢測全血樣品中結核分枝桿菌特異CFP10基因

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【摘要】：目的采用微滴數(shù)字PCR技術(droplet digital PCR,dd PCR)檢測全血中結核分枝桿菌特異性CFP10(10-k Da culture filtrate protein,CFP10)基因的拷貝數(shù)含量。方法收集10例活動性肺結核患者(active tuberculosis,a TB)、10例肺外結核患者(extrapulmonary tuberculosis,EPTB)和5例健康對照者(healthy donars,HDs)全血并提取DNA,優(yōu)化引物最佳擴增條件并制定重組質(zhì)粒標準曲線,對樣本中CFP10基因的拷貝數(shù)含量分別用dd PCR與實時定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)進行檢測和比較。結果對重組質(zhì)粒的靈敏度檢測顯示dd PCR技術明顯優(yōu)于q PCR技術。對樣本的檢測顯示q PCR技術檢測a TB、EPTB患者與健康人的全血中CFP10含量之間無統(tǒng)計學意義;但是dd PCR技術檢測a TB、EPTB患者與健康人之間有顯著統(tǒng)計學意義(P0.0001);dd PCR檢測a TB和EPTB患者(共20例)CFP10基因絕對定量的濃度約為3.4~94.0 copies/μL。結論本研究首次報道采用dd PCR技術能靈敏地用于TB患者全血的診斷。
【作者單位】： 武漢大學病毒學國家重點實驗室/湖北省過敏及免疫相關疾病重點實驗室/武漢大學醫(yī)學研究院/武漢大學基礎醫(yī)學院免疫學系;武漢市醫(yī)療救治中心;
【關鍵詞】： 微滴數(shù)字PCR 結核分枝桿菌 定量檢測 CFP
【基金】：國家重大傳染病專項(2012ZX10003002) 國家自然科學基金項目(31270176,81471910) 國家杰出青年科學基金(81025008)
【分類號】：R52;R440
【正文快照】： (1.武漢大學病毒學國家重點實驗室/湖北省過敏及免疫相關疾病重點實驗室/武漢大學醫(yī)學研究院/武漢大學基礎醫(yī)學院免疫學系,湖北武漢430071;2.武漢市醫(yī)療救治中心,湖北武漢430071)結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB),俗稱結核桿菌,是引起人結核病的主要病原菌。結核

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