本文關(guān)鍵詞：微滴數(shù)字PCR定量檢測(cè)全血樣品中結(jié)核分枝桿菌特異CFP10基因

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【摘要】：目的采用微滴數(shù)字PCR技術(shù)(droplet digital PCR,dd PCR)檢測(cè)全血中結(jié)核分枝桿菌特異性CFP10(10-k Da culture filtrate protein,CFP10)基因的拷貝數(shù)含量。方法收集10例活動(dòng)性肺結(jié)核患者(active tuberculosis,a TB)、10例肺外結(jié)核患者(extrapulmonary tuberculosis,EPTB)和5例健康對(duì)照者(healthy donars,HDs)全血并提取DNA,優(yōu)化引物最佳擴(kuò)增條件并制定重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)樣本中CFP10基因的拷貝數(shù)含量分別用dd PCR與實(shí)時(shí)定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)進(jìn)行檢測(cè)和比較。結(jié)果對(duì)重組質(zhì)粒的靈敏度檢測(cè)顯示dd PCR技術(shù)明顯優(yōu)于q PCR技術(shù)。對(duì)樣本的檢測(cè)顯示q PCR技術(shù)檢測(cè)a TB、EPTB患者與健康人的全血中CFP10含量之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但是dd PCR技術(shù)檢測(cè)a TB、EPTB患者與健康人之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001);dd PCR檢測(cè)a TB和EPTB患者(共20例)CFP10基因絕對(duì)定量的濃度約為3.4~94.0 copies/μL。結(jié)論本研究首次報(bào)道采用dd PCR技術(shù)能靈敏地用于TB患者全血的診斷。
【作者單位】： 武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/湖北省過敏及免疫相關(guān)疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)研究院/武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系;武漢市醫(yī)療救治中心;
【關(guān)鍵詞】： 微滴數(shù)字PCR 結(jié)核分枝桿菌 定量檢測(cè) CFP
【基金】：國(guó)家重大傳染病專項(xiàng)(2012ZX10003002) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31270176,81471910) 國(guó)家杰出青年科學(xué)基金(81025008)
【分類號(hào)】：R52;R440
【正文快照】： (1.武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/湖北省過敏及免疫相關(guān)疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)研究院/武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系,湖北武漢430071;2.武漢市醫(yī)療救治中心,湖北武漢430071)結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB),俗稱結(jié)核桿菌,是引起人結(jié)核病的主要病原菌。結(jié)核

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1114277