本文關鍵詞：基于樣品檢測的布魯氏菌熒光定量PCR方法的建立

  更多相關文章： 布魯氏菌 熒光定量PCR 外源內參 內源內參

【摘要】：目的本文建立一種基于樣品檢測的特異性好、靈敏性高的布魯氏菌熒光定量PCR檢測方法。方法以哺乳動物beta-actin基因和外源重組質粒為內參,針對布魯氏菌屬特異性基因IS711,建立用于樣品檢測的布魯氏菌熒光定量PCR方法,并驗證其敏感性、特異性及穩(wěn)定性,繪制標準曲線。將該方法用于哺乳動物樣品檢測,并與細菌分離培養(yǎng)檢測結果比較。結果熒光定量PCR方法對布魯氏菌檢測有良好的特異性,3對引物對陰性對照菌均無非特異性擴增;該方法用于樣品檢測的最低檢測限為17拷貝;內外源內參同時存在條件下,布魯氏菌熒光定量PCR的標準曲線相關系數(shù)為R2=0.997(Y=-3.12X+40.9)。將該方法直接用于181份動物樣本的檢測,并與分離培養(yǎng)結果相比,熒光定量PCR檢測陽性率為11.4%,細菌分離培養(yǎng)檢測陽性率為9.9%,且細菌分離培養(yǎng)陽性樣品與熒光定量PCR陽性樣品中編號基本一致。結論本文建立的熒光定量PCR檢測方法靈敏性高、特異性及穩(wěn)定性好,可直接應用于樣品的檢測,檢測結果受內參基因質控。
【作者單位】： 重慶理工大學藥學與生物工程學院;中國動物衛(wèi)生與流行病學中心;寧夏回族自治區(qū)動物疾病預防控制中心;重慶市墊江縣中醫(yī)院;
【關鍵詞】： 布魯氏菌 熒光定量PCR 外源內參 內源內參
【基金】：寧夏地區(qū)主要人獸共患病防控關鍵技術研究與示范(No.2013ZZN30)資助~~
【分類號】：R440;R516.7
【正文快照】： (1.Chongqing University of Technology,Chongqing400054,China;2.China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao 266110,China;3.Ningxia Hui Autonomous Region Animal Disease Prevention and Control Center,Ningxia,750000,China;4.Dianjiang Hospital of Tradi

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 劉華,賴德明,游正蕓;30例男性尿道分泌物細菌分離培養(yǎng)的結果分析[J];醫(yī)學科技;1993年02期

2 李麗,高良;前列腺炎的支原體與細菌分離培養(yǎng)結果[J];臨床檢驗雜志;2000年05期

3 張萍;前列腺液的支原體與細菌分離培養(yǎng)結果分析[J];中國誤診學雜志;2004年05期

4 李紅;徐紅萍;王貝;;前列腺液細菌分離培養(yǎng)與支原體藥敏結果分析[J];中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育;2010年05期

5 ;[J];;年期

，

本文編號：1114391