發(fā)布時(shí)間：2017-10-29 19:30

  本文關(guān)鍵詞：基于樣品檢測(cè)的布魯氏菌熒光定量PCR方法的建立

  更多相關(guān)文章： 布魯氏菌 熒光定量PCR 外源內(nèi)參 內(nèi)源內(nèi)參

【摘要】：目的本文建立一種基于樣品檢測(cè)的特異性好、靈敏性高的布魯氏菌熒光定量PCR檢測(cè)方法。方法以哺乳動(dòng)物beta-actin基因和外源重組質(zhì)粒為內(nèi)參,針對(duì)布魯氏菌屬特異性基因IS711,建立用于樣品檢測(cè)的布魯氏菌熒光定量PCR方法,并驗(yàn)證其敏感性、特異性及穩(wěn)定性,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。將該方法用于哺乳動(dòng)物樣品檢測(cè),并與細(xì)菌分離培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果比較。結(jié)果熒光定量PCR方法對(duì)布魯氏菌檢測(cè)有良好的特異性,3對(duì)引物對(duì)陰性對(duì)照菌均無(wú)非特異性擴(kuò)增;該方法用于樣品檢測(cè)的最低檢測(cè)限為17拷貝;內(nèi)外源內(nèi)參同時(shí)存在條件下,布魯氏菌熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)為R2=0.997(Y=-3.12X+40.9)。將該方法直接用于181份動(dòng)物樣本的檢測(cè),并與分離培養(yǎng)結(jié)果相比,熒光定量PCR檢測(cè)陽(yáng)性率為11.4%,細(xì)菌分離培養(yǎng)檢測(cè)陽(yáng)性率為9.9%,且細(xì)菌分離培養(yǎng)陽(yáng)性樣品與熒光定量PCR陽(yáng)性樣品中編號(hào)基本一致。結(jié)論本文建立的熒光定量PCR檢測(cè)方法靈敏性高、特異性及穩(wěn)定性好,可直接應(yīng)用于樣品的檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果受內(nèi)參基因質(zhì)控。
【作者單位】： 重慶理工大學(xué)藥學(xué)與生物工程學(xué)院;中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心;寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心;重慶市墊江縣中醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 布魯氏菌 熒光定量PCR 外源內(nèi)參 內(nèi)源內(nèi)參
【基金】：寧夏地區(qū)主要人獸共患病防控關(guān)鍵技術(shù)研究與示范(No.2013ZZN30)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R440;R516.7
【正文快照】： (1.Chongqing University of Technology,Chongqing400054,China;2.China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao 266110,China;3.Ningxia Hui Autonomous Region Animal Disease Prevention and Control Center,Ningxia,750000,China;4.Dianjiang Hospital of Tradi

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 劉華,賴(lài)德明,游正蕓;30例男性尿道分泌物細(xì)菌分離培養(yǎng)的結(jié)果分析[J];醫(yī)學(xué)科技;1993年02期

2 李麗,高良;前列腺炎的支原體與細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2000年05期

3 張萍;前列腺液的支原體與細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果分析[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2004年05期

4 李紅;徐紅萍;王貝;;前列腺液細(xì)菌分離培養(yǎng)與支原體藥敏結(jié)果分析[J];中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育;2010年05期

5 ;[J];;年期

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本文編號(hào)：1114391