目的和意義肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC),以下簡稱肝癌,是第三位導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡的疾病。射頻消融(Radiofrequency ablation,RFA)術(shù)是列入肝癌診治指南的臨床常用的根治性微創(chuàng)治療技術(shù)。小肝癌RFA治療的無瘤生存率較手術(shù)切除低,術(shù)后腫瘤易早期復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)的機(jī)制尚未完全闡明,但已明確與不充分的RFA(Insufficient or Incomplete RFA,IRFA)導(dǎo)致肝癌微觀殘留(微觀殘癌)有顯著關(guān)系。目前認(rèn)為微觀殘癌細(xì)胞的研究最終均需聚焦在細(xì)胞增殖或凋亡上,抑制殘癌細(xì)胞增殖或促進(jìn)殘癌細(xì)胞凋亡是提高RFA療效的關(guān)鍵,也是改善患者預(yù)后的關(guān)鍵。長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,lncRNA)在諸多腫瘤中異常表達(dá),在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中也發(fā)揮重要作用,參與細(xì)胞增殖的調(diào)控。綜上,研究lncRNA在調(diào)控IRFA后殘癌細(xì)胞增殖中的作用及分子機(jī)制有望為延緩肝癌復(fù)發(fā)提供治療策略。因此,本研究以IRFA后微觀殘癌細(xì)胞為研究對象,建立50℃IRFA細(xì)胞和動(dòng)物模型,采用基因芯片技術(shù)、RNA-蛋白互作等技術(shù)分析lncRNA在肝癌R...

【文章頁數(shù)】：138 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1cRNA擴(kuò)增和標(biāo)記操作程序

圖1cRNA擴(kuò)增和標(biāo)記操作程序.1.2.7qRT-PCR法驗(yàn)證亞致死性熱（50℃）處理的肝癌細(xì)胞lncRNA和胞總RNA標(biāo)本按TaKaRa試劑盒，利用2PowerTaqPCRMasterMixration,Beijing,China)試劑，Ge....

圖2RNA濃度測定結(jié)果

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文2.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.2.1用于基因芯片實(shí)驗(yàn)的RNA標(biāo)本質(zhì)量檢測結(jié)果為了檢測lncRNA和mRNA在亞致死性熱處理的肝癌細(xì)胞中的表達(dá)情況，我們50℃水浴熱處理SMMC-7721細(xì)胞10min，37℃，5%CO2環(huán)境中恢復(fù)培養(yǎng)24h。正常培養(yǎng)的SMMC-7....

圖3RNA電泳結(jié)果圖

理SMMC-7721細(xì)胞10min，37℃，5%CO2環(huán)境中恢復(fù)培養(yǎng)24h。正常21細(xì)胞為對照組，然后將細(xì)胞樣本送北京博奧晶典生物技術(shù)有限公mRNA表達(dá)譜芯片檢測，采用TRIzol法提取細(xì)胞樣本總RNA，進(jìn)行RN2)和RNA電泳（圖3），結(jié)果顯示A260/280＞1.80，RN....

圖5每條染色體上表達(dá)差異的lncRNA和mRNA的總數(shù)

我們統(tǒng)計(jì)了每條染色體上差異表達(dá)的lncRNA和mRNA的數(shù)目，結(jié)果發(fā)現(xiàn)染色體1的表達(dá)上調(diào)和下調(diào)的lncRNA數(shù)目最多，Y染色體的表達(dá)上調(diào)和下調(diào)的lncRNA數(shù)目最少（圖5A）。染色體19的表達(dá)上調(diào)的mRNA數(shù)目最多，染色體1的表達(dá)下調(diào)的mRNA數(shù)目最多，Y染色體的表達(dá)上調(diào)和下調(diào)....

本文編號：4031227