目的:既往研究顯示,長(zhǎng)鏈非編碼RNA ANCR在上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化EMT和腫瘤轉(zhuǎn)移中起作用。然而,ANCR在調(diào)節(jié)肝細(xì)胞癌HCC轉(zhuǎn)移中的作用尚不清楚。為此,本研究擬探討肝癌轉(zhuǎn)移中ANCR的調(diào)控作用以及促癌的潛在機(jī)制。方法:采用MTT法和Transwell法檢測(cè)肝癌細(xì)胞增殖和遷移/侵襲能力。建立異種移植模型,觀察ANCR對(duì)肝癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響。采用芯片法檢測(cè)ANCR啟動(dòng)子區(qū)域H3和H4組蛋白乙�；健Ｓ肦NA下拉和RIP分析ANCR與異質(zhì)性核糖核蛋白A1 HNRNPA1的關(guān)系。通過雙熒光素酶報(bào)告基因分析確定了ANCR與miR-140-3p之間的相互作用。結(jié)果:ANCR在肝癌組織和細(xì)胞中高表達(dá),且能促進(jìn)了肝癌細(xì)胞的增殖和遷移、侵襲。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,干擾ANCR可抑制肝癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在肝癌組織和細(xì)胞中,ANCR啟動(dòng)子區(qū)域的H3/H4組蛋白乙酰化水平升高,干擾組蛋白去乙�；�3 HDAC3可顯著上調(diào)ANCR的表達(dá)。ANCR可與HNRNPA1結(jié)合,通過調(diào)節(jié)HNRNPA1的降解促進(jìn)HNRNPA1的表達(dá)。此外,ANCR通過海綿miR-140-3p上調(diào)HNRNPA1的表達(dá)。最后,我們發(fā)現(xiàn)ANCR通過調(diào)節(jié)H... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

LncRNAANCR在肝細(xì)胞癌(HCC)組織和細(xì)胞中上調(diào)A.采用qRT-PCR方法檢測(cè)肝癌組織和配對(duì)的正常組織中ANCR的表達(dá)

結(jié)果213.3體內(nèi)干擾ANCR抑制肝癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移由于在HepG2和Huh7細(xì)胞中干擾ANCR抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，因此我們?cè)隗w內(nèi)干擾ANCR，觀察ANCR對(duì)肝癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移的影響。將Lenti-si-ANCR或Lenti-GFP轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，然后將慢病毒感染的HepG2細(xì)胞皮下注射到5周齡雌性裸鼠的右側(cè)背部。28天后處死小鼠，收集腫瘤。如圖3A所示，Lenti-si-ANCR組的腫瘤體積和瘤重明顯小于Lenti-GFP組(p<0.01)，表明干擾ANCR抑制了HCC的增殖。然后，將慢病毒感染的HepG2細(xì)胞經(jīng)尾靜脈注射到小鼠體內(nèi)，計(jì)數(shù)肺結(jié)節(jié)數(shù)，以明確si-ANCR的抗轉(zhuǎn)移能力。我們發(fā)現(xiàn)，與Lenti-GFP組相比，Lenti-si-ANCR組的肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)明顯減少(p<0.01)，并且H&E染色顯示結(jié)節(jié)中的腫瘤細(xì)胞較少(圖3B)，這表明干擾ANCR抑制了HCC的肺轉(zhuǎn)移，并且與Lenti-GFP組相比，Lenti-si-ANCR組的肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)明顯減少(p<0.01)，并且H&E染色顯示Lenti-si-ANCR組結(jié)節(jié)內(nèi)腫瘤細(xì)胞較少。與Lenti-GFP組相比，Lenti-si-ANCR組肝癌組織中ANCR的表達(dá)明顯下調(diào)(圖3C，p<0.01)，提示抑制HCC的增殖和轉(zhuǎn)移與下調(diào)ANCR有關(guān)。

體內(nèi)干擾LncRNAAN


本文編號(hào)：3103781