手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一種法定丙類傳染性疾病,能夠由多種腸道病毒血清型引起。HFMD多發(fā)于5歲以下兒童,目前研究表明造成該病的主要病原體有人腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)、柯薩奇病毒A組6型(Coxsackievirus A 6,CVA6)、CVA10、CVA16和CVA2[1,2]。CVA2衣殼由四種結(jié)構(gòu)蛋白(VP1,VP2,VP3,VP4)組成,其中VP1含有的結(jié)合表位能與細(xì)胞受體特異性識(shí)別^[3]。目前,關(guān)于CVA2蛋白功能的研究較為缺乏,根據(jù)其它腸道病毒的研究,推測(cè)CVA2 VP1、VP2和VP3可含有抗原表位能促使機(jī)體產(chǎn)生抗病毒的中和抗體,因此本研究選擇了CVA2的VP1和VP3片段,將CVA2-VP1和CVA2-VP3部分基因分別整合入pGEX-6p-1載體,并經(jīng)誘導(dǎo)、純化免疫等步驟最終獲得兔抗血清并進(jìn)行鑒定,為研究CVA2提供了結(jié)構(gòu)蛋白抗原檢測(cè)的方法。在研發(fā)疫苗過(guò)程中,有兩個(gè)非常重要的技術(shù)環(huán)節(jié):一是候選疫苗株的篩選;二是建立動(dòng)物模型用以評(píng)價(jià)候選疫苗的體內(nèi)保護(hù)效力。本研究作...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖0.1腸道病毒基因組結(jié)構(gòu)與蛋白功能Fig.0.1Structureoftheenterovirusgenome

武漢生物制品研究所2020屆碩士研究生畢業(yè)論文95′UTR復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)能夠形成莖環(huán)，Poly(A)尾巴位于3′UTR，中間為一段較長(zhǎng)的開放閱讀框（ORF）。ORF能編碼產(chǎn)生病毒的結(jié)構(gòu)蛋白P1域以及非結(jié)構(gòu)蛋白P2和P3域，且蛋白酶能將P1分解為4種病毒衣殼蛋白（VP1、VP2、V....

圖0.2多克隆抗體制備技術(shù)路線圖

武漢生物制品研究所2020屆碩士研究生畢業(yè)論文11技術(shù)路線本研究為多價(jià)手足口病疫苗研發(fā)項(xiàng)目的子課題，目的是在小鼠模型的建立以及疫苗株的篩選過(guò)程中能夠取得突破。為此本研究主要從四個(gè)部分進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，第一部分是制備CVA2–VP1、VP3兔抗血清用于后續(xù)抗原的鑒定，第二部分是制備CV....

圖0.3主動(dòng)免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖

武漢生物制品研究所2020屆碩士研究生畢業(yè)論文11技術(shù)路線本研究為多價(jià)手足口病疫苗研發(fā)項(xiàng)目的子課題，目的是在小鼠模型的建立以及疫苗株的篩選過(guò)程中能夠取得突破。為此本研究主要從四個(gè)部分進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，第一部分是制備CVA2–VP1、VP3兔抗血清用于后續(xù)抗原的鑒定，第二部分是制備CV....

圖1.1pGEX-6p-1表達(dá)載體圖譜

武漢生物制品研究所2020屆碩士研究生畢業(yè)論文12第一章材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料1.1.1細(xì)胞RD細(xì)胞由本研究所質(zhì)量控制部提供，Vero細(xì)胞由美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)中購(gòu)買而來(lái)。1.1.2菌株、載體菌株：大腸桿菌DH5α、BL21(DE3)、感受態(tài)細(xì)胞本研究所病毒性疫苗研究一室(以下....

本文編號(hào)：3998939