目的:采用動(dòng)物血清藥理學(xué)方法,游離脂肪酸誘導(dǎo)建立非酒精性脂肪肝體外模型,觀察加味茵芍散含藥血清對(duì)非酒精性脂肪肝細(xì)胞模型中脂質(zhì)代謝、肝酶指標(biāo)的作用及自噬中Ⅲ型PI3K/Beclin1通路的影響,進(jìn)一步探討該方治療非酒精性脂肪肝的作用機(jī)制。方法:將HepG2細(xì)胞用不同終濃度的油酸和棕櫚酸（摩爾比為2比1）混合液誘導(dǎo)培養(yǎng)24h,CCK-8法、油紅O染色確定建立NAFLD細(xì)胞模型的最佳誘導(dǎo)濃度;光電比色法鑒定NAFLD細(xì)胞模型;CCK-8實(shí)驗(yàn)篩選出各組含藥血清最佳作用濃度;通過游離脂肪酸誘導(dǎo)建立NAFLD細(xì)胞模型后,實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、模型組、中藥組和易善復(fù)組,光電比色法檢測各組細(xì)胞內(nèi)TG、AST、ALT含量;Real-time PCR檢測自噬相關(guān)指標(biāo)Beclin1和LC3-II mRNA表達(dá)水平,Western blot測定Beclin1和LC3-II的蛋白表達(dá)。結(jié)果:1.CCK-8檢測顯示:HepG2細(xì)胞用不同終濃度的油酸和棕櫚酸（摩爾比為2比1）混合液誘導(dǎo)培養(yǎng)24h后,當(dāng)油酸和棕櫚酸混合液終濃度超過0.5mmol/L時(shí)對(duì)HepG2細(xì)胞活力具有顯著的抑制作用。2.油紅O染色觀察結(jié)果:與空白... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
Abstract
引言
第一部分 理論研究
    1 關(guān)于Ⅲ型 PI3K/Beclin1 通路與NAFLD關(guān)系的研究進(jìn)展
        1.1 自噬與Ⅲ型PI3K/Beclin1 通路的關(guān)系
        1.2 Ⅲ型PI3K/ Beclin1 通路調(diào)節(jié)NAFLD的機(jī)制研究
    2 非酒精性脂肪肝的中醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展
        2.1 非酒精性脂肪肝的中醫(yī)病名認(rèn)識(shí)
        2.2 非酒精性脂肪肝的中醫(yī)病因病機(jī)認(rèn)識(shí)
        2.3 非酒精性脂肪肝的中醫(yī)辨證治療
第二部分 實(shí)驗(yàn)部分
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 主要儀器
        1.4 主要藥品及試劑
        1.5 主要溶液的制備
    2 方法
        2.1 HepG2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 含藥血清制備
        2.3 NAFLD細(xì)胞模型的建立與鑒定
        2.4 CCK-8 實(shí)驗(yàn)確定加味茵芍散含藥血清最佳濃度
        2.5 HepG2 細(xì)胞分組干預(yù)及相關(guān)指標(biāo)的檢測
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 NAFLD細(xì)胞模型最佳誘導(dǎo)濃度
        3.2 油紅O染色結(jié)果
        3.3 光電比法結(jié)果
        3.4 CCK-8 實(shí)驗(yàn)確定各組含藥血清最佳給藥濃度
        3.5 光電比色法指標(biāo)檢測結(jié)果
        3.6 加味茵芍散含藥血清對(duì)LC3-II和 Beclin1 mRNA表達(dá)的影響
        3.7 加味茵芍散含藥血清對(duì)LC3-II、Beclin1 蛋白表達(dá)的影響
第三部分 討論部分
    1 加味茵芍散含藥血清抗非酒精性脂肪肝的中醫(yī)機(jī)制探討
        1.1 加味茵芍散方藥分析
        1.2 加味茵芍散方藥的現(xiàn)代藥理研究
        1.3 總結(jié)
    2 加味茵芍散含藥血清抗非酒精性脂肪肝的現(xiàn)代機(jī)制探討
        2.1 非酒精性脂肪肝體外模型的建立
        2.2 自噬與非酒精性脂肪肝之間的聯(lián)系
        2.3 加味茵芍散含藥血清對(duì)非酒精性脂肪肝細(xì)胞模型的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號(hào)：3092403