發(fā)布時(shí)間：2024-06-27 23:10

　　目的:本研究旨在確定miR-152-3p是否在甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞(papillary thyroid carcinoma,PTC)的生長中起到關(guān)鍵作用,并探討其靶向關(guān)系。方法:miR-152-3p的表達(dá)水平由實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Realtime-PCR)的方法進(jìn)行檢測,研究對(duì)象是20對(duì)PTC組織和癌旁甲狀腺組織。轉(zhuǎn)染miR-152-3p模擬物(mimics)和miR-152-3p抑制物(inhibitor)至PTC細(xì)胞株(KTC-1)中,設(shè)置陰性對(duì)照組(Negative control),PCR檢測miR-152-3p各分組的轉(zhuǎn)染效率。通過細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒CCK-8法,能夠檢測出PTC細(xì)胞株的增殖能力,細(xì)胞遷移能力則應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)中劃痕寬度的比值來反映,采用Transwell小室法對(duì)各組PTC細(xì)胞的侵襲能力進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。經(jīng)靶向預(yù)測篩得TGFA(Transforming growth factor-α)為miR-152-3p靶點(diǎn),雙熒光素酶報(bào)告基因檢測TGFA與mi R-152-3p是否互補(bǔ)結(jié)合,行免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)和PCR(Polymerase Chain Re...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1.前言
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 樣本的收集
        2.1.2 試劑及其配置
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.2.2 實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Realtime-PCR)
        2.2.3 細(xì)胞增殖能力檢測
        2.2.4 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)
        2.2.7 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.結(jié)果
    3.1 組織中mi R-152-3p和 TGFA的表達(dá)
    3.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的檢測
    3.3 mi R-152-3p對(duì) KTC-1 細(xì)胞增殖的影響
    3.4 mi R-152-3p對(duì) KTC-1 細(xì)胞遷移的影響
    3.5 mi R-152-3p對(duì) KTC-1 細(xì)胞侵襲的影響
    3.6 TGFA作為mi R-152-3p靶點(diǎn)的分析
    3.7 TGFA對(duì) PTC細(xì)胞增殖和侵襲的影響
4.討論
5.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄一
附錄二
致謝



本文編號(hào)：3996077