本文關(guān)鍵詞：茶樹亞硝酸還原酶基因CsNiR的克隆及表達(dá)分析

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【摘要】：以‘龍井43’茶樹葉片的c DNA為模板,利用RT PCR技術(shù)克隆了茶樹亞硝酸還原酶基因(CsNiR),得到完整的ORF全長(zhǎng)為1 764 bp,編碼587個(gè)氨基酸;所推導(dǎo)的氨基酸序列與垂枝樺(Betula pendula)、擬南芥(Arabidopsis thaliana)、菠菜(Spinacia oleracea)和水稻(Oryza sativa)的同源性均大于76%。生物信息學(xué)分析表明,CsNiR分子量為68.648 k D,等電點(diǎn)為6.12,為親水性的非分泌蛋白;二級(jí)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)顯示,Cs Ni R具有完整的Ni R蛋白結(jié)構(gòu),含血紅素蛋白β 化合物區(qū)域和4Fe-4S區(qū)域。實(shí)時(shí)熒光定量結(jié)果表明,該基因在成熟葉片中表達(dá)量高于一芽二葉和根。采用營(yíng)養(yǎng)液水培3個(gè)茶樹品種,在氮饑餓兩周后分別供應(yīng)正常氮素和低氮素(1和0.1 mmol·L~(-1) NH4NO3),q RT-PCR測(cè)定發(fā)現(xiàn),正常氮素處理的2 h和6 h,誘導(dǎo)根CsNiR表達(dá)量顯著增加,葉片中的表達(dá)量變化延遲到24 h之后,且變化幅度存在基因型之間的差異;低氮處理對(duì)CsNiR表達(dá)量的影響相對(duì)較小。因此,研究Cs Ni R基因的表達(dá)特性及其在茶樹氮素利用中所發(fā)揮的作用,需結(jié)合茶樹基因型、組織部位、供氮水平等進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所國(guó)家茶樹改良中心;
【關(guān)鍵詞】： 茶樹 亞硝酸還原酶 克隆 基因表達(dá) 氮素
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31570695) 國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-23) 浙江省農(nóng)業(yè)新品種選育重點(diǎn)專項(xiàng)(2012C2905-4)
【分類號(hào)】：S571.1
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3 西疇縣茶葉工作站 張發(fā)勇;茶樹修剪的利與弊[N];云南科技報(bào);2013年

4 本報(bào)記者 劉e，

本文編號(hào)：724036