本文關(guān)鍵詞：鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)麻鴨卵巢抗氧化功能及相關(guān)基因表達(dá)量的影響

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【摘要】：為了探究鉬鎘聯(lián)合暴露對(duì)鴨卵巢的組織學(xué)、抗氧化能力及相關(guān)基因表達(dá)量的影響,本研究選取360只11日齡“江南2號(hào)”麻鴨,并隨機(jī)分成6組,每組60只,分別是Control組、鉬Ⅰ組、鉬Ⅱ組、鎘組、鉬鎘聯(lián)合Ⅰ組和鉬鎘聯(lián)合Ⅱ組。Control組飼喂基礎(chǔ)日糧,其余各組飼料分別在每千克基礎(chǔ)日糧中添加15 mg Mo、100 mg Mo、4 mg Cd、15 mg Mo+4 mg Cd以及100 mg Mo+4 mg Cd。實(shí)驗(yàn)選用七鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H2O]作為鉬源,硫酸鎘(3Cd SO4·8H2O)為鎘源。試驗(yàn)期為120d。在試驗(yàn)進(jìn)行至第60d、90d和120d時(shí),每組隨機(jī)選取10只麻鴨,剖殺并采集卵巢組織。檢測(cè)卵巢組織勻漿的抗氧化指標(biāo),炎癥細(xì)胞因子基因NF-κB、TNF-α、COX-2,凋亡基因Bcl-2、Bak-1和Caspase-3及CP基因mRNA的表達(dá)量;同時(shí),制作120d卵巢組織病理切片和超薄切片,觀察卵巢組織學(xué)變化和細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果如下:1.鉬鎘共同作用導(dǎo)致卵巢組織勻漿中T-AOC、SOD、XOD、CAT酶活性顯著降低(P0.05),NOS活性和MDA含量增加(P0.05);2.鉬鎘共同作用導(dǎo)致卵巢細(xì)胞膜損傷,線粒體腫脹、空泡化、嵴斷裂,細(xì)胞器溶解,核固縮,核膜破裂;3.低劑量的鉬(15 mg/kg Mo)和高劑量的鉬(100 mg/kg Mo)對(duì)卵巢組織的損傷程度較輕。鎘(4 mg/kg Cd)對(duì)卵巢組織的損傷程度大于低鉬和高鉬,導(dǎo)致部分卵泡發(fā)育不良,充血、出血明顯。鉬鎘聯(lián)合處理對(duì)卵巢組織的損傷更加嚴(yán)重,其中,高鉬鎘(100 mg/kg Mo+4 mg/kg Cd)導(dǎo)致大量卵泡發(fā)育不良,出血、壞死程度加劇及面積增大,大量結(jié)締組織呈纖維素性壞死,對(duì)卵巢組織造成的損傷最為嚴(yán)重。4.鉬鎘共同作用導(dǎo)致卵巢Bak-1和Caspase-3基因mRNA表達(dá)量顯著上升(P0.05),CP和Bcl-2 mRNA的表達(dá)量顯著下降(P0.05);5.鉬鎘聯(lián)合顯著上調(diào)卵巢中NF-κB、TNF-α、COX-2基因mRNA表達(dá)量(P0.05);結(jié)論:鉬鎘聯(lián)合作用可致鴨卵巢脂質(zhì)過氧化水平上升,造成卵巢氧化損傷;同時(shí)導(dǎo)致多數(shù)卵泡發(fā)育不良,卵巢間質(zhì)充血、出血明顯,大量結(jié)締組織呈纖維素樣壞死。鉬鎘聯(lián)合作用導(dǎo)致CP和Bcl-2基因mRNA的表達(dá)量下降,Bak-1和Caspase-3的mRNA表達(dá)量增加。鉬鎘聯(lián)合作用可誘導(dǎo)卵巢中炎癥細(xì)胞因子NF-κB、COX-2和TNF-α基因mRNA表達(dá)量明顯增加,誘發(fā)卵巢發(fā)生炎性應(yīng)答反應(yīng),造成卵巢的炎性損傷。
【關(guān)鍵詞】：鉬 鎘 鴨 卵巢 凋亡基因 炎癥細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.32
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 縮略詞表8-9
• 前言9-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-20
• 1 鉬10-15
• 1.1 鉬元素介紹10-11
• 1.2 鉬的動(dòng)力學(xué)11
• 1.2.1 鉬的分布11
• 1.2.2 鉬的吸收和代謝11
• 1.3 鉬的生物學(xué)作用11-12
• 1.4 鉬缺乏12-13
• 1.5 鉬的毒性作用13-15
• 1.5.2 鉬中毒對(duì)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的影響13-14
• 1.5.3 鉬中毒對(duì)生殖系統(tǒng)的影響14
• 1.5.4 鉬中毒對(duì)組織的病理損傷14-15
• 2 鎘15-17
• 2.1 鎘的毒性作用15-16
• 2.2 鎘中毒對(duì)生殖系統(tǒng)的影響16
• 2.3 鎘中毒對(duì)機(jī)體抗氧化機(jī)能的影響16
• 2.4 鎘中毒對(duì)組織的病理損傷16-17
• 3 鉬、鎘對(duì)銅藍(lán)蛋白的影響17-18
• 4 鉬、鎘對(duì)細(xì)胞凋亡基因的影響18-19
• 5 鉬、鎘對(duì)炎癥細(xì)胞因子的影響19
• 6 本研究的目的和意義19-20
• 第二章 試驗(yàn)研究20-48
• 1 材料與方法20-26
• 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理20
• 1.2 主要儀器20-21
• 1.3 輔助器材21
• 1.4 主要試劑21
• 1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)21-22
• 1.6 樣品采集22
• 1.7 卵巢組織勻漿的制作22-23
• 1.8 卵巢組織中總RNA的提取與熒光定量擴(kuò)增反應(yīng)23-25
• 1.8.1 卵巢總RNA的提取及基因引物探針的設(shè)計(jì)23-24
• 1.8.2 RNA純度及完整性檢測(cè)24
• 1.8.3 去基因組DNA和反轉(zhuǎn)錄24
• 1.8.4 Taq Man RT-PCR反應(yīng)24-25
• 1.8.5 SYBR Green RT-PCR反應(yīng)25
• 1.9 數(shù)據(jù)分析25-26
• 1.9.1 相對(duì)定量計(jì)算方法25-26
• 1.9.2 數(shù)據(jù)差異性分析26
• 2 結(jié)果與分析26-41
• 2.1 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢抗氧化能力的影響26-30
• 2.1.1 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢NOS活性的影響26-27
• 2.1.2 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢T-AOC的影響27
• 2.1.3 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢XOD活性的影響27-28
• 2.1.4 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢SOD活性的影響28-29
• 2.1.5 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢CAT活性的影響29
• 2.1.6 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢MDA含量的影響29-30
• 2.2 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢相關(guān)基因mRNA表達(dá)量的影響30-37
• 2.2.1 凋亡基因Bcl-2 mRNA相對(duì)表達(dá)量的結(jié)果30-31
• 2.2.2 凋亡基因Bak-1 mRNA表達(dá)量的結(jié)果31-32
• 2.2.3 凋亡基因Caspase-3 mRNA表達(dá)量的結(jié)果32-33
• 2.2.4 卵巢CP基因mRNA表達(dá)量的結(jié)果33-34
• 2.2.5 卵巢NF-κB基因mRNA表達(dá)量的結(jié)果34-35
• 2.2.6 卵巢TNF-α 基因mRNA表達(dá)量的結(jié)果35-36
• 2.2.7 卵巢COX-2 基因mRNA表達(dá)量的結(jié)果36-37
• 2.3 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢組織病理學(xué)的影響37-38
• 2.4 卵巢超微結(jié)構(gòu)的觀察結(jié)果38-41
• 3 討論41-47
• 3.1 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢抗氧化能力的影響41-42
• 3.2 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢組織的病理損傷42-43
• 3.3 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢超微結(jié)構(gòu)的損傷作用43
• 3.4 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢凋亡調(diào)控基因mRNA表達(dá)量的影響43-45
• 3.5 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢CP mRNA表達(dá)量的影響45
• 3.6 鉬鎘聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì)卵巢炎癥細(xì)胞因子基因mRNA表達(dá)量的影響45-47
• 4 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 附錄：碩士期間發(fā)表的論文54-55
• 致謝55

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