目的:分析自身免疫性甲狀腺疾病遺傳易感基因啟動子區(qū)DNA甲基化水平,比較病例對照組間啟動子區(qū)DNA甲基化水平差異,選取顯著性差異的位點,進(jìn)一步擴(kuò)大樣本驗證,為尋找自身免疫性甲狀腺疾病的表觀遺傳標(biāo)志提供理論依據(jù)。方法:按照病例對照組的納入標(biāo)準(zhǔn)選取2016年6月至2017年6月在我科住院患者22例,其中對照組5例,病例組17例,收集資料并抽取外周血標(biāo)本提取DNA,通過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化、PCR擴(kuò)增、體外轉(zhuǎn)錄等方法進(jìn)行甲基化定量檢測,發(fā)現(xiàn)甲基化差異顯著的位點后擴(kuò)大樣本量,驗證樣本選取對照組35例、病例組64例,對該位點所在引物檢測序列進(jìn)一步進(jìn)行分析該序列的甲基化程度。結(jié)果:去除了擴(kuò)增失敗的6個位點和完全無甲基化的3個位點,得到15個位點進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)CTLA4第5個位點、CD40第11個位點,IL2RA第21、22、23位點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,且病例組均處于低甲基化狀態(tài),其中CD40第11個位點病例對照組差異更明顯(P<0.001)。因此選擇CD40的編號第11位點進(jìn)行擴(kuò)大樣本量驗證,發(fā)現(xiàn)檢測的20個CpG位點中部分位點在病例對照組間存在明顯差異(P<0.05)結(jié)論:病例對照組間的甲基...

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1兩組CD40-3片段中CpG位點的甲基化水平Fig.1MethylationlevelsoftheCpGsitesintheCD40-3fragmentbetweentwogourps

而病例組無甲基化；其他位點在病例對照組間均存在一定程度的甲基化，但是病例對照組間的甲基化率不同，如CG11位點的平均甲基化率在病例組0.60，而對照組為0.75，且病例組均處于低甲基化狀態(tài)（見表6、圖1）圖1兩組CD40-3片段中CpG位點的甲基化水平Fig.1Methyla....

本文編號：4031779