七鰓鰻是一種古老的無頜類動物,在進化上處于無脊椎動物和脊椎動物之間,對免疫系統(tǒng)的研究在理論上有著重要的進化意義。Toll樣受體是非特異性模式識別受體(pattern-recognition receptors,PRRs),能夠識別病原體,是啟動先天免疫的關鍵。本研究克隆獲得東北七鰓鰻(Lethenteron morii)TLR7a、TLR7b、TLR14d和TLR2d基因,利用實時熒光定量PCR分析4個TLR基因在幼魚和成魚中各組織的表達情況以及在銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)刺激后不同組織在不同時間點的表達量變化。構建真核表達載體并檢測TLR14d和TLR2d在HEK293T細胞中的定位。為深入探索TLR基因的功能及其信號轉(zhuǎn)導過程,本研究也進行TLR通路相關接頭分子(MyD88和TRAF6)以及下游轉(zhuǎn)錄因子NF-кB家族成員及其啟動子的研究,現(xiàn)取得以下結果:1.東北七鰓鰻TLR基因克隆及生物信息學分析:采用克隆技術獲得4個TLR基因的cDNA序列,TLR7a、TLR7b、TLR14d和TLR2d的開放閱讀框(ORF)分別為3252 bp、3117 bp、...

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圖1-1TLR信號傳導途徑中MyD88依賴和非依賴途徑[59]

圖1-1TLR信號傳導途徑中MyD88依賴和非依賴途徑[59]Fig.1-1MyD88dependentandindependentTLRsignalingpathways導的信號途徑主要包括MyD88依賴途徑和MyD88非依賴途TLR識別相應的....

圖1-2NF-B家族蛋白成員和結構

圖1-2NF-B家族蛋白成員和結構[99]Fig.1-2SchematicrepresentationofNF-Bproteinfamily前，NF-B家族在果蠅[107]、海膽（Echinoidea）[108]、文昌魚（Branchio點叉尾鮰[11....

圖2-5利用NJ法構建的東北七鰓鰻以及其他物種TLR系統(tǒng)進化樹

圖2-5利用NJ法構建的東北七鰓鰻以及其他物種TLR系統(tǒng)進化樹采用MEGA7.0軟件的NJ法構建系統(tǒng)發(fā)育樹，各序列的GenBank登錄號分別為：人TLR2（Homsapiens，XP_016864065.1）；鼠TLR2（Musmusculus，AA....

圖2-6A東北七鰓鰻TLR7a在不同組織中的相對表達量（a）幼魚（b）成魚

圖2-6A東北七鰓鰻TLR7a在不同組織中的相對表達量（a）幼魚（b）成魚Fig.2-6ARelativeexpressionofTLR7aindifferencetissuesofL.morii（a）healthyjuvenile(b)heal....

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