發(fā)布時(shí)間：2024-07-09 06:20

　　第一部分離心法增加HaCaT細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染效率目的:HaCaT細(xì)胞是自發(fā)性的人永生化表皮細(xì)胞株,常用于皮膚功能與疾病的相關(guān)研究,但常規(guī)脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染該細(xì)胞的效率極低。本研究主要探討離心是否能夠增加脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染HaCaT細(xì)胞的效率。方法:即以Lipofectamine?2000為脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,pEGFP-C1為質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HaCaT細(xì)胞后分別使用常規(guī)法和離心法處理,利用熒光倒置顯微鏡、流式細(xì)胞儀測(cè)定轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞增殖活力實(shí)驗(yàn)檢測(cè)離心是否對(duì)細(xì)胞活力產(chǎn)生影響。熒光素酶報(bào)告基因、Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)離心法實(shí)際效應(yīng)對(duì)目的基因表達(dá)的影響。結(jié)果:離心法處理組所測(cè)得的轉(zhuǎn)染效率均高于常規(guī)法處理組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、Western Blot實(shí)驗(yàn)則進(jìn)一步證實(shí)了轉(zhuǎn)染后離心的性?xún)r(jià)效應(yīng)能增加目的基因的表達(dá),具有較高的實(shí)用性。結(jié)論:常規(guī)轉(zhuǎn)染步驟后離心能夠增加HaCaT細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染效率。第二部分IL36RN基因突變鑒定及其致病機(jī)制的研究目的:泛發(fā)性膿皰型銀屑病(GPP)是一種罕見(jiàn)但臨床癥狀十分嚴(yán)重的炎癥性皮膚病,有時(shí)甚至危及到患者的生命,本文主要目的是對(duì)新發(fā)現(xiàn)的IL36RN基因的單核苷...

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 離心法增加HaCaT細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染效率
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
第二部分 IL36RN基因突變鑒定及其致病機(jī)制的研究
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文題目



本文編號(hào)：4004527