本文關(guān)鍵詞：基于動物源基因分析的地溝油檢測技術(shù)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：地溝油的危害及普遍性已廣為人知,其檢測鑒別方法已有很多相關(guān)研究,但至今未形成各方認(rèn)同的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。大部分地溝油中不可避免的會混入動物源成分,本課題從分子生物學(xué)角度進(jìn)行系統(tǒng)研究,首先探討了食物鏈中主要動物基因信息在油脂精煉工藝中的衰減規(guī)律,其次利用PCR技術(shù)研究了4種動物源信息在油脂中的檢出狀況和檢出限,并進(jìn)行了盲樣驗(yàn)證,得到了一種較為可行的動物信息鑒別檢測技術(shù),為地溝油的鑒別檢測提供新的技術(shù)依據(jù)。主要結(jié)論如下:(1)針對食物鏈中主要的4種動物肉,以DNA濃度和純度為指標(biāo),比較兩種不同DNA提取前處理方法。結(jié)果表明:真空冷凍干燥處理提取出的DNA濃度和純度高,方法較優(yōu)。(2)對以雞油和豬油為代表的動物油脂進(jìn)行脫膠、脫色、脫臭處理,模擬油脂精煉工藝,研究其DNA信息衰減變化。結(jié)果表明:雞油精煉處理后DNA含量下降了9.5%,豬油精煉處理后DNA含量下降了11%,因此確證了油脂精煉工藝會對動物基因信息造成部分損失。(3)不同動物油脂檢出限研究:將不同的動物油脂(豬油、牛油、羊油和雞油)按10%、5%、1%、0.5%、0.1%的比例與食用油混摻,提取油中DNA后用PCR技術(shù)檢測食用油中摻入的動物油信息。結(jié)果表明:食用油中0.1%(m/m)單一動物源性信息均可被檢出。(4)油脂中不同種類混摻的動物油檢測鑒別試驗(yàn):將兩種、三種、四種動物油脂分別與食用油混摻,提取其DNA后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果表明:在多種動物信息共存的情況下每種引物只對相應(yīng)動物信息進(jìn)行擴(kuò)增,其他動物源信息對表達(dá)無干擾,其對應(yīng)動物源信息檢出限亦為0.1%(m/m),藉此,該技術(shù)可實(shí)現(xiàn)對混合油樣的分析鑒別,可用于疑似地溝油分析評判。(5)盲樣驗(yàn)證試驗(yàn):自制了在食用油中混摻了不同比例和種類的動物油6個(gè)油樣進(jìn)行盲樣分析。結(jié)果表明:所測樣品中盲樣檢出率為100%,鑒別正確率為92%。本研究建立的基于PCR技術(shù)鑒別檢測食用油中混摻動物油脂的方法是可行的,可用于地溝油初步篩查。
【關(guān)鍵詞】：地溝油 動物基因信息 PCR技術(shù) 衰減規(guī)律 檢出限
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：TS227
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-20
• 1.1 地溝油概述10-11
• 1.1.1 概念10
• 1.1.2 危害10
• 1.1.3 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢10-11
• 1.2 地溝油檢測技術(shù)研究進(jìn)展11-17
• 1.2.1 光譜檢測技術(shù)11-14
• 1.2.2 色譜檢測技術(shù)14-15
• 1.2.3 免疫及分子生物學(xué)技術(shù)15-16
• 1.2.4 電子鼻技術(shù)16
• 1.2.5 電化學(xué)分析技術(shù)16-17
• 1.2.6 其他檢測技術(shù)17
• 1.2.7 感官鑒別法17
• 1.3 聚合酶鏈?zhǔn)剑≒CR）技術(shù)的應(yīng)用17-18
• 1.4 本課題研究目的及意義18-19
• 1.5 主要研究內(nèi)容19
• 1.6 技術(shù)路線19-20
• 第二章 DNA提取方法的研究20-23
• 2.1 試驗(yàn)材料與方法20-22
• 2.1.1 動物組織DNA的提取20-21
• 2.1.2 油中DNA的提取21-22
• 2.2 結(jié)果與討論22
• 2.2.1 動物組織DNA的提取22
• 2.3 小結(jié)22-23
• 第三章 動物基因信息在油脂精煉過程中衰減規(guī)律研究23-27
• 3.1 試驗(yàn)材料與方法23-25
• 3.1.1 試驗(yàn)材料23
• 3.1.2 試驗(yàn)試劑23-24
• 3.1.3 主要儀器及設(shè)備24
• 3.1.4 模擬油脂精煉過程24
• 3.1.5 油中DNA的提取方法24-25
• 3.1.6 DNA含量的測定25
• 3.2 結(jié)果與討論25-26
• 3.3 小結(jié)26-27
• 第四章 動物油脂在食用油中檢出限和檢出狀況研究27-38
• 4.1 試驗(yàn)材料與方法27-29
• 4.1.1 試驗(yàn)材料27
• 4.1.2 試驗(yàn)試劑27-28
• 4.1.3 主要儀器設(shè)備28
• 4.1.4 試驗(yàn)方法28-29
• 4.2 結(jié)果與討論29-37
• 4.2.1 食用油中單一動物源性成分特異性和靈敏性檢測29-32
• 4.2.2 食用油中多種動物源性成分的檢出狀況和靈敏性檢測32-37
• 4.3 小結(jié)37-38
• 第五章 盲樣驗(yàn)證38-42
• 5.1 試驗(yàn)材料與方法38
• 5.1.1 試驗(yàn)材料38
• 5.1.2 試驗(yàn)試劑38
• 5.1.3 主要儀器設(shè)備38
• 5.1.4 試驗(yàn)方法38
• 5.2 結(jié)果與討論38-40
• 5.3 小結(jié)40-42
• 第六章 結(jié)論與展望42-44
• 6.1 結(jié)論42
• 6.2 創(chuàng)新點(diǎn)42-43
• 6.3 展望43-44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 致謝49-50
• 作者簡介50

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