發(fā)布時間：2021-12-31 04:01

　　背景:磺酰脲類降糖藥是目前非胰島素依賴型糖尿病治療中主要使用的降糖藥之一,雖然應(yīng)用廣泛,但其降糖療效和毒副作用呈現(xiàn)明顯的個體差異給臨床應(yīng)用帶來困擾和風險。OATP1B1、OATP1B3的基因多態(tài)性會影響轉(zhuǎn)運體的功能活性,CYP2C9的基因多態(tài)性也會導致酶的活性改變這是導致用藥個體差異的重要原因。已經(jīng)證實格列美脲、格列苯脲和格列吡嗪是CYP2C9的底物,同時我們實驗室前期研究表明格列美脲是OATP1B1轉(zhuǎn)運攝取底物,格列苯脲和格列吡嗪是OATP1B3轉(zhuǎn)運攝取底物。那么格列美脲、格列苯脲和格列吡嗪在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運與代謝可能受其基因多態(tài)的影響,從而導致療效和毒副作用的個體差異出現(xiàn)。本課題研究目的在于探究轉(zhuǎn)運體OATP1B1/1B3和代謝酶CYP2C9的基因多態(tài)性對格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪的轉(zhuǎn)運代謝之間的影響機制,為磺酰脲類降糖藥物能夠在臨床上得以更合理有效安全的應(yīng)用從而為實現(xiàn)個體化用藥提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。目的:通過建立CYP2C9*1、*2、*3重組酶模型和穩(wěn)定高表達的OATP1B1*1a、*5、*15以及OATP1B3、OATP1B3（344T>G）、OATP1B3（699G&g... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型CYP2C9中代謝差異研究
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器與設(shè)備
        2.1.2 藥品及試劑
    2.2 方法
        2.2.1 溶液的配制
        2.2.2 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪代謝孵育方法及樣品處理方法建立
        2.2.3 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在CYP2C9重組酶孵育體系中的LC-MS定量檢測
        2.2.4 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在各基因型CYP2C9重組酶中酶促動力學反應(yīng)條件的探索
        2.2.5 統(tǒng)計分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 方法學專屬性
        2.3.2 重組酶中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪定量測定線性范圍的確定
        2.3.3 提取回收率
        2.3.4 準確度與精密度
        2.3.5 不同基因型CYP2C9重組酶中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪酶促動力學條件分析
        2.3.6 不同基因型CYP2C9重組酶對格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪的酶促動力學比較
    2.4 小結(jié)
第3章 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型OATP1B1/1B3細胞中的轉(zhuǎn)運研究
    3.1 材料
        3.1.1 細胞株
        3.1.2 主要儀器與設(shè)備
        3.1.3 主要藥品與試劑
    3.2 方法
        3.2.1 主要溶液配制
        3.2.2 HEK293T細胞培養(yǎng)及其生長曲線的繪制
        3.2.3 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪對HEK293T細胞毒性測定
        3.2.4 BCA法測定HEK293T細胞裂解液蛋白含量
        3.2.5 細胞樣品中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪LC-MS檢測方法的建立
        3.2.6 格列美脲在不同基因型OATP1B1-HEK293T細胞中的攝取實驗
        3.2.7 格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型OATP1B3-HEK293T細胞中的攝取實驗
        3.2.8 統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果
G), (699G>A)- HEK293T細胞的培養(yǎng)和生長曲線繪制">        3.3.1 OATP1B1*1a,*5,*15-HEK293T和OATP1B3，(344T>G), (699G>A)- HEK293T細胞的培養(yǎng)和生長曲線繪制
        3.3.2 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪對HEK293T細胞毒性測定結(jié)果分析
        3.3.3 HEK293T細胞裂解液蛋白曲線的繪制
        3.3.4 細胞樣品中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪LC-MS方法學測定分析
        3.3.5 格列美脲在不同基因型OATP1B1-HEK293T攝取動力學分析
        3.3.6 格列苯脲在不同基因型OATP1B3-HEK293T攝取動力學分析
        3.3.7 格列吡嗪在不同基因型OATP1B3-HEK293T攝取動力學分析
    3.4 小結(jié)
第4章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3559579