目的研究原發(fā)性肝癌（HCC）Hep G2細(xì)胞中EMS1/cortactin的表達(dá)與定位,探討其功能特性。方法 RTq PCR、免疫熒光法檢測(cè)EMS1基因和cortactin（EMS1編碼蛋白）表達(dá),共聚焦顯微鏡觀察cortactin定位,并以人正常肝細(xì)胞L02為對(duì)照。將靶向EMS1的質(zhì)粒EMS1-shRNA轉(zhuǎn)染Hep G2,并以CCK8法、流式細(xì)胞周期檢測(cè)、劃痕和Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖、周期、遷移和侵襲能力。結(jié)果 Hep G2中EMS1 mRNA水平為L(zhǎng)O2的10.5倍;cortactin在Hep G2中高表達(dá),并聚集于細(xì)胞膜下皮質(zhì)區(qū),L02中cortactin彌散分布在胞質(zhì)中。與未處理組相比,轉(zhuǎn)染EMS1-shRNA組Hep G2中EMS1 mRNA水平下降68.00%,cortactin水平下降52.80%,細(xì)胞增殖能力下降9.50%,S期比例下降37.89%,遷移能力下降45.40%,侵襲能力下降64.91%（均P<0.05）。結(jié)論 EMS1/cortactin主要與Hep G2細(xì)胞遷移和侵襲相關(guān)。 

【文章來源】：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016,36(12)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞系:
        1.1.2 主要試劑:
    1.2 方法
        1.2.1 Rq PCR檢測(cè)EMS1表達(dá):
        1.2.2 免疫熒光法檢測(cè)cortactin表達(dá)和定位:
        1.2.3 質(zhì)粒構(gòu)建、細(xì)胞轉(zhuǎn)染和實(shí)驗(yàn)分組:
        1.2.4 RT-q PCR檢測(cè)各組細(xì)胞EMS1表達(dá):
        1.2.5 Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞cortactin表達(dá):
        1.2.6 CCK-8法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖能力:
        1.2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞周期:
        1.2.8 劃痕試驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞二維遷移能力:
        1.2.9 Transwell小室檢測(cè)各組細(xì)胞三維遷移能力:
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 EMS1/cortactin的表達(dá)與定位
    2.2 RNAi后Hep G2中EMS1 mRNA和cortactin表達(dá)
    2.3 下調(diào)EMS1對(duì)細(xì)胞增殖能力和細(xì)胞周期的影響
    2.4 下調(diào)EMS1對(duì)Hep G2細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]下調(diào)EMS1/cortactin對(duì)人高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞株遷移和內(nèi)吞的影響[J]. 周家名,陳莉,葉蘊(yùn)瑤,孫樹剛,王桂蘭,吳圓圓.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2012(11)
[2]皮動(dòng)蛋白及微絲相關(guān)蛋白2/3復(fù)合物介導(dǎo)的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的分子機(jī)制[J]. 喻丹,張培軍,ZHAN.XSteven.  生命的化學(xué). 2005(03)



本文編號(hào)：3518144