目的研究原發(fā)性肝癌（HCC）Hep G2細胞中EMS1/cortactin的表達與定位,探討其功能特性。方法 RTq PCR、免疫熒光法檢測EMS1基因和cortactin（EMS1編碼蛋白）表達,共聚焦顯微鏡觀察cortactin定位,并以人正常肝細胞L02為對照。將靶向EMS1的質(zhì)粒EMS1-shRNA轉(zhuǎn)染Hep G2,并以CCK8法、流式細胞周期檢測、劃痕和Transwell小室實驗檢測細胞增殖、周期、遷移和侵襲能力。結(jié)果 Hep G2中EMS1 mRNA水平為LO2的10.5倍;cortactin在Hep G2中高表達,并聚集于細胞膜下皮質(zhì)區(qū),L02中cortactin彌散分布在胞質(zhì)中。與未處理組相比,轉(zhuǎn)染EMS1-shRNA組Hep G2中EMS1 mRNA水平下降68.00%,cortactin水平下降52.80%,細胞增殖能力下降9.50%,S期比例下降37.89%,遷移能力下降45.40%,侵襲能力下降64.91%（均P<0.05）。結(jié)論 EMS1/cortactin主要與Hep G2細胞遷移和侵襲相關(guān)。 

【文章來源】：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016,36(12)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞系:
        1.1.2 主要試劑:
    1.2 方法
        1.2.1 Rq PCR檢測EMS1表達:
        1.2.2 免疫熒光法檢測cortactin表達和定位:
        1.2.3 質(zhì)粒構(gòu)建、細胞轉(zhuǎn)染和實驗分組:
        1.2.4 RT-q PCR檢測各組細胞EMS1表達:
        1.2.5 Western blot檢測各組細胞cortactin表達:
        1.2.6 CCK-8法檢測各組細胞增殖能力:
        1.2.7 流式細胞術(shù)檢測各組細胞周期:
        1.2.8 劃痕試驗檢測各組細胞二維遷移能力:
        1.2.9 Transwell小室檢測各組細胞三維遷移能力:
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 EMS1/cortactin的表達與定位
    2.2 RNAi后Hep G2中EMS1 mRNA和cortactin表達
    2.3 下調(diào)EMS1對細胞增殖能力和細胞周期的影響
    2.4 下調(diào)EMS1對Hep G2細胞遷移和侵襲能力的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]下調(diào)EMS1/cortactin對人高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細胞株遷移和內(nèi)吞的影響[J]. 周家名,陳莉,葉蘊瑤,孫樹剛,王桂蘭,吳圓圓.  臨床與實驗病理學(xué)雜志. 2012(11)
[2]皮動蛋白及微絲相關(guān)蛋白2/3復(fù)合物介導(dǎo)的細胞運動的分子機制[J]. 喻丹,張培軍,ZHAN.XSteven.  生命的化學(xué). 2005(03)



本文編號：3518144