調(diào)控叉頭盒轉(zhuǎn)錄基因F1表達(dá)對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、遷移和侵襲的作用
發(fā)布時(shí)間:2021-11-15 15:27
目的通過慢病毒介導(dǎo)的shRNA敲低人非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)細(xì)胞株P(guān)C9中叉頭盒轉(zhuǎn)錄基因F1(forkhead box-F1,FOXF1)的表達(dá),研究FOXF1對細(xì)胞生長及侵襲遷移等能力的影響及可能的分子機(jī)制。方法慢病毒介導(dǎo)的shRNA敲低FOXF1的表達(dá),采用實(shí)時(shí)熒光定量qRTPCR實(shí)驗(yàn)及Western Blot技術(shù)檢測細(xì)胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表達(dá)變化,平板克隆實(shí)驗(yàn)及CCK-8法檢測細(xì)胞增殖情況,Transwell實(shí)驗(yàn)檢測FOXF1基因表達(dá)對遷移及侵襲的影響,Western Blot檢測上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果慢病毒介導(dǎo)的shRNA感染PC9細(xì)胞后,有效下調(diào)了PC9細(xì)胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表達(dá)水平(P <0.05),細(xì)胞的增殖能力受到抑制,細(xì)胞體外遷移及侵襲能力明顯降低;Western Blot結(jié)果顯示,抑制FOXF1表達(dá)后β-Catenin、N-cadherin、Vimentin、Snail表達(dá)下調(diào),E-cadherin、ZO-1表達(dá)上調(diào)。結(jié)論下調(diào)FOXF1表達(dá)可抑制非小細(xì)胞肺癌PC9細(xì)胞的...
【文章來源】:實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2020,36(14)北大核心
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞及主要試劑
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定株的構(gòu)建
1.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量Real-time RT-PCR
1.2.4 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖
1.2.5 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖
1.2.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移
1.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞侵襲
1.2.8 Western Blot法檢測細(xì)胞FOXF1蛋白的表達(dá)
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 shRNA-FOXF1對PC9細(xì)胞的沉默效果
2.2 FOXF1沉默對細(xì)胞增殖的影響
2.3 FOXF1沉默對PC9細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響
2.4 FOXF1沉默處理對細(xì)胞EMT相關(guān)基因表達(dá)的影響
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]循環(huán)腫瘤細(xì)胞在非小細(xì)胞肺癌中的研究進(jìn)展[J]. 田程,許新華. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2019(11)
[2]Risk factors for gastroesophageal reflux disease and analysis of genetic contributors[J]. Alexandra Argyrou,Evangelia Legaki,Christos Koutserimpas,Maria Gazouli,Ioannis Papaconstantinou,George Gkiokas,George Karamanolis. World Journal of Clinical Cases. 2018(08)
[3]上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化與非小細(xì)胞肺癌放療敏感性相關(guān)的研究進(jìn)展[J]. 張志浩,張為民. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2017(13)
本文編號(hào):3497039
【文章來源】:實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2020,36(14)北大核心
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞及主要試劑
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定株的構(gòu)建
1.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量Real-time RT-PCR
1.2.4 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖
1.2.5 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖
1.2.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移
1.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞侵襲
1.2.8 Western Blot法檢測細(xì)胞FOXF1蛋白的表達(dá)
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 shRNA-FOXF1對PC9細(xì)胞的沉默效果
2.2 FOXF1沉默對細(xì)胞增殖的影響
2.3 FOXF1沉默對PC9細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響
2.4 FOXF1沉默處理對細(xì)胞EMT相關(guān)基因表達(dá)的影響
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]循環(huán)腫瘤細(xì)胞在非小細(xì)胞肺癌中的研究進(jìn)展[J]. 田程,許新華. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2019(11)
[2]Risk factors for gastroesophageal reflux disease and analysis of genetic contributors[J]. Alexandra Argyrou,Evangelia Legaki,Christos Koutserimpas,Maria Gazouli,Ioannis Papaconstantinou,George Gkiokas,George Karamanolis. World Journal of Clinical Cases. 2018(08)
[3]上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化與非小細(xì)胞肺癌放療敏感性相關(guān)的研究進(jìn)展[J]. 張志浩,張為民. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2017(13)
本文編號(hào):3497039
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