RNA干擾hTERT基因?qū)θ藧盒院谒亓鯝375細(xì)胞增殖的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-11-09 06:24
目的:建立特異性hTERT基因沉默模型并探討靶向調(diào)控hTERT基因?qū)θ藧盒院谒亓鯝375細(xì)胞增殖能力的影響。方法:培養(yǎng)人惡性黑素瘤A375細(xì)胞且通過(guò)細(xì)胞STR分型鑒定確認(rèn)細(xì)胞及交叉污染情況,將不同濃度(0、5.0、15.0、35.0nmol/L)的攜帶綠色熒光標(biāo)記的特異性siRNA與不同體積(1.5、3.0、4.5μl)的轉(zhuǎn)染試劑Hiperfect轉(zhuǎn)染人惡性黑素瘤A375細(xì)胞,細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率采用熒光顯微鏡判定,選出最佳的siRNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑體積;合成4條hTERT-siRNA(hTERT-siRNA-203、hTERTsiRNA-210、hTERT-siRNA-217、hTERT-siRNA-224)在最佳轉(zhuǎn)染條件下分別轉(zhuǎn)染人惡性黑素瘤A375細(xì)胞,24h后提取總mRNA,通過(guò)qPCR篩選干擾效率最佳的hTERT-siRNA,利用MTT法觀察靶向沉默hTERT基因?qū)谒亓黾?xì)胞增殖能力的影響。結(jié)果:0、5.0、15.0、35.0nmol/L攜帶綠色熒光標(biāo)記的特異性siRNA分別與1.5μlHiperfect轉(zhuǎn)染人惡性黑素瘤A375細(xì)胞后,各組內(nèi)轉(zhuǎn)染效率分別為1.44%?0.49%、3...
【文章來(lái)源】:新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:51 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
人惡性黑素瘤A375細(xì)胞STR基因分型圖譜
3分別為1.5、3.0、4.5μl轉(zhuǎn)染試劑組.圖2a 5.0nmol/L siRNA與3ulHiperfect轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的熒光顯微鏡下圖Fig.2a Fluorescence microscopes of 5.0nmol/L siRNA and 3ulHiperfect transfected cells圖 2b 5.0nmol/L siRNA 與 3ulHiperfect 轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的明視野圖Fig.2b The visual field of 5.0nmol/L siRNA and 3ulHiperfect transfected cells圖 2c 不同濃度 siRNA 組和不同體積 Hiperfect 的轉(zhuǎn)染效率圖(%)Fig.2c The tr
(F=57.21,P<0.05),5.0nmol/L siRNA與3ulHiperfect的轉(zhuǎn)染效率明顯高于其他各組(均P<0.05),轉(zhuǎn)染效率最佳(如圖2a,圖2b,圖2c,表2)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Inhibition of choroidal neovascularization by lentivirusmediated PEDF gene transfer in rats[J]. Ya-Jie Yu,Bin Mo,Lu Liu,Yan-Kun Yue,Chang-Li Yue,Wu Liu. International Journal of Ophthalmology. 2016(08)
[2]人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶mRNA在不同類(lèi)型黑素瘤中的表達(dá)及其意義[J]. 曾明鳳,康曉靜,曾穎,柴莉,吳秀娟,趙娟,孫振柱,王瑩,王唯嘉. 腫瘤研究與臨床. 2016 (07)
[3]New advances in hepatocellular carcinoma[J]. Sonia Pascual,Iván Herrera,Javier Irurzun. World Journal of Hepatology. 2016(09)
[4]鼻咽癌患者外周血端粒酶hTERT mRNA的定量檢測(cè)及其臨床意義[J]. 付新灑,申聰香,李冠雪,張?chǎng)斡?文忠. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(06)
[5]siRNA干擾缺氧誘導(dǎo)因子-2α對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響[J]. 李娜,王洪興,張潔,李永真,千新來(lái). 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2014(01)
[6]High-throughput RNA interference screens integrative analysis: Towards a comprehensive understanding of the virus-host interplay[J]. Sandeep Amberkar,Narsis A Kiani,Ralf Bartenschlager,Gualtiero Alvisi,Lars Kaderali. World Journal of Virology. 2013(02)
[7]靶向hTERT的小干擾RNA誘導(dǎo)前列腺癌PC3細(xì)胞凋亡的機(jī)制[J]. 王建,何志巍. 中國(guó)腫瘤. 2012(03)
本文編號(hào):3484796
【文章來(lái)源】:新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:51 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
人惡性黑素瘤A375細(xì)胞STR基因分型圖譜
3分別為1.5、3.0、4.5μl轉(zhuǎn)染試劑組.圖2a 5.0nmol/L siRNA與3ulHiperfect轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的熒光顯微鏡下圖Fig.2a Fluorescence microscopes of 5.0nmol/L siRNA and 3ulHiperfect transfected cells圖 2b 5.0nmol/L siRNA 與 3ulHiperfect 轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的明視野圖Fig.2b The visual field of 5.0nmol/L siRNA and 3ulHiperfect transfected cells圖 2c 不同濃度 siRNA 組和不同體積 Hiperfect 的轉(zhuǎn)染效率圖(%)Fig.2c The tr
(F=57.21,P<0.05),5.0nmol/L siRNA與3ulHiperfect的轉(zhuǎn)染效率明顯高于其他各組(均P<0.05),轉(zhuǎn)染效率最佳(如圖2a,圖2b,圖2c,表2)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Inhibition of choroidal neovascularization by lentivirusmediated PEDF gene transfer in rats[J]. Ya-Jie Yu,Bin Mo,Lu Liu,Yan-Kun Yue,Chang-Li Yue,Wu Liu. International Journal of Ophthalmology. 2016(08)
[2]人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶mRNA在不同類(lèi)型黑素瘤中的表達(dá)及其意義[J]. 曾明鳳,康曉靜,曾穎,柴莉,吳秀娟,趙娟,孫振柱,王瑩,王唯嘉. 腫瘤研究與臨床. 2016 (07)
[3]New advances in hepatocellular carcinoma[J]. Sonia Pascual,Iván Herrera,Javier Irurzun. World Journal of Hepatology. 2016(09)
[4]鼻咽癌患者外周血端粒酶hTERT mRNA的定量檢測(cè)及其臨床意義[J]. 付新灑,申聰香,李冠雪,張?chǎng)斡?文忠. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(06)
[5]siRNA干擾缺氧誘導(dǎo)因子-2α對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響[J]. 李娜,王洪興,張潔,李永真,千新來(lái). 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2014(01)
[6]High-throughput RNA interference screens integrative analysis: Towards a comprehensive understanding of the virus-host interplay[J]. Sandeep Amberkar,Narsis A Kiani,Ralf Bartenschlager,Gualtiero Alvisi,Lars Kaderali. World Journal of Virology. 2013(02)
[7]靶向hTERT的小干擾RNA誘導(dǎo)前列腺癌PC3細(xì)胞凋亡的機(jī)制[J]. 王建,何志巍. 中國(guó)腫瘤. 2012(03)
本文編號(hào):3484796
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