本文關(guān)鍵詞：肺麟癌miRNA差異表達(dá)譜的篩選及miR-223-3p抑制肺鱗癌細(xì)胞增殖的研究

  更多相關(guān)文章： 肺鱗癌 患者來(lái)源的移植瘤 微陣列芯片 微小RNA 細(xì)胞增殖

【摘要】：目的構(gòu)建肺鱗癌組織裸鼠移植模型,篩選移植成瘤和未成瘤的肺鱗癌組織間差異表達(dá)的mi RNAs,并探索mi RNA-223-3p對(duì)肺鱗癌細(xì)胞功能的影響。方法選取2013年8月-2014年1月于安徽省立醫(yī)院胸外科經(jīng)手術(shù)切除獲得的21例人肺鱗癌組織,1 h內(nèi)移植于裸鼠皮下,觀察成瘤情況,并回顧性比較移植成瘤組和未成瘤組對(duì)應(yīng)患者的腫瘤特性。采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)移植瘤和對(duì)應(yīng)患者腫瘤組織中p63、細(xì)胞角蛋白5/6、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1和Ki-67的表達(dá)情況,并以組織化學(xué)評(píng)分(H-score)法進(jìn)一步對(duì)患者腫瘤組織Ki-67表達(dá)進(jìn)行半定量分析。借助mi RNA微陣列基因芯片建立移植成瘤和未成瘤的肺鱗癌組織間mi RNA差異表達(dá)譜。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)驗(yàn)證mi RNA芯片結(jié)果的可靠性,并檢測(cè)mi RNA-223-3p在12對(duì)肺鱗癌和相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)水平。FCM和MTT法檢測(cè)mi R-223-3p對(duì)肺鱗癌SK-MES-1細(xì)胞周期、凋亡和增殖的影響。結(jié)果21例人肺鱗癌組織行裸鼠皮下移植后成功12例。裸鼠皮下移植的成瘤性與腫瘤分化程度(P=0.005)及大小(P=0.005)密切有關(guān)。裸鼠移植瘤組織中p63、CK5/6、TTF-1和Ki-67表達(dá)情況均與對(duì)應(yīng)患者肺鱗癌組織的表達(dá)相一致。裸鼠皮下移植成瘤的相應(yīng)肺鱗癌組織中Ki-67的H-score評(píng)分為2.76±0.54,顯著高于移植未成瘤的肺鱗癌組織的1.37±0.77評(píng)分,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。相對(duì)移植未成瘤組織,在移植成瘤的肺鱗癌組織中共有27個(gè)mi RNAs顯著上調(diào),11個(gè)顯著下調(diào)。mi R-451a、mi R-223-3p的芯片結(jié)果以及q RT-PCR檢測(cè)表達(dá)均下調(diào)。同時(shí),肺鱗癌組織中mi R-223-3p表達(dá)水平明顯低于癌旁組織(P0.05),且在移植成瘤的腫瘤組織中下調(diào)的更顯著。mi R-223-3p模擬物轉(zhuǎn)染可抑制SK-MES-1細(xì)胞增殖(P0.05),且早期凋亡和S期細(xì)胞所占比例明顯增加(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建了人肺鱗癌組織的裸鼠移植瘤模型,移植成瘤性與腫瘤組織Ki-67表達(dá)水平有關(guān),且移植瘤保留了對(duì)應(yīng)患者原腫瘤的基本生物學(xué)特性,提示該模型可為肺鱗癌的研究提供良好平臺(tái)。此外,移植成瘤和未成瘤的肺鱗癌組織間存在差異表達(dá)的mi RNAs。mi R-223-3p在肺鱗癌組織中的表達(dá)水平下降,且在移植成瘤的組織中下調(diào)的更顯著。肺鱗癌SK-MES-1細(xì)胞中過(guò)表達(dá)mi R-223-3p可以明顯抑制細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和S期阻滯。
【關(guān)鍵詞】：肺鱗癌 患者來(lái)源的移植瘤 微陣列芯片 微小RNA 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 英文縮略詞5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-22
• 結(jié)果22-33
• 討論33-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 附錄40-41
• 致謝41-42
• 綜述42-51
• 參考文獻(xiàn)47-51

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本文編號(hào)：814799